简介:摘要目的探究高毒力肺炎克雷伯菌(hypervirulent Klebsiella pneumoniae, hvKP)通过激活NLRP3炎症小体引发肝脓肿。方法C57BL/6小鼠腹腔分别注射对数期的K1型hvKP(K1-hvKP)和K35型肺炎克雷伯菌(K35-非hvKP)悬液构建小鼠肝脓肿模型。流式细胞术检测CD45+和Gr-1+免疫磁珠分选的人外周血中性粒细胞纯度。总糖试剂盒检测K1-hvKP和K35-非hvKP荚膜多糖含量。实时荧光定量RT-PCR和ELISA分别检测K1-hvKP和K35-非hvKP对人血中性粒细胞IL-18与IL-33的mRNA和蛋白质表达水平的影响。Western blot检测K1-hvKP和K35-非hvKP对人血中性粒细胞NLRP3炎症小体活化的影响。激光共聚焦显微镜观察K1-hvKP和K35-非hvKP对人血中性粒细胞NETosis形成的影响。结果与K35-非hvKP比较,K1-hvKP感染C57BL/6小鼠后产生明显的肝脓肿。分离的人外周血中性粒细胞纯度>95%。K1-hvKP的荚膜多糖含量显著高于K35-非hvKP。与K35-非hvKP比较,K1-hvKP显著促进人血中性粒细胞IL-18和IL-33的表达、NLRP3炎症小体活化和NETosis的形成。结论hvKP通过激活NLRP3炎症小体促进人血中性粒细胞NETosis形成而引发肝脓肿。
简介:摘要目的研究下调丝氨酸消旋酶(SRR)缓解β-淀粉样蛋白(Aβ)对PC12细胞的神经毒性、突触损伤作用及其可能机制。方法(1)将体外培养的PC12细胞分为0、20、40、80 μmol/L Aβ25-35组,分别加入0、20、40、80 μmol/L Aβ25-35作用24 h,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞存活率,采用Western blotting实验检测细胞SRR蛋白的表达。用40 μmol/L Aβ25-35分别处理PC12细胞0、12、24、48 h,采用CCK-8法、Western blotting实验分别检测细胞存活率、SRR蛋白的表达。(2)将PC12细胞分为对照组、无义序列组、SRR小干扰RNA(siRNA) 1组、SRR siRNA 2组、SRR siRNA 3组,后4组细胞分别转染SRR无义序列或不同SRR siRNA序列,48 h后采用Western blotting实验检测细胞SRR蛋白的表达,选择效果最佳的SRR siRNA用于后续实验。(3)将PC12细胞分为对照组、AD组、AD+无义序列组、AD+SRR siRNA组,后2组细胞分别瞬时转染无义序列或SRR siRNA,作用48 h,后3组细胞均加入40 μmol/L Aβ25-35,对照组加入等量溶剂。处理24 h后采用Western blotting实验检测细胞SRR蛋白的表达,CCK-8法检测细胞存活率,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡,ELISA法检测细胞半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)活性,Western blotting实验检测细胞活化Caspase 3、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体相关蛋白、突触后致密蛋白95(PSD95)的表达。结果(1)0、20、40、80 μmol/L Aβ25-35组细胞存活率依次降低,SRR蛋白的表达依次增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。40 μmol/L Aβ25-35处理PC12细胞0、12、24、48 h后细胞存活率依次降低,SRR蛋白的表达依次增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)SRR siRNA 1组、SRR siRNA 2组、SRR siRNA 3组细胞SRR蛋白的表达均低于对照组和无义序列组,差异均有统计学意义(P<0.05),其中SRR siRNA 2组降低最明显。(3)与对照组比较,AD组细胞SRR蛋白的表达、细胞凋亡率升高,细胞存活率降低,Caspase 3活性和活化Caspase 3蛋白表达升高,NMDA受体2A(NMDAR2A)和NMDA受体2B(NMDAR2B)蛋白的表达升高,PSD95蛋白的表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与AD组比较,AD+SRR siRNA组细胞SRR蛋白的表达、细胞凋亡率降低,细胞存活率升高,Caspase 3活性和活化Caspase 3蛋白表达降低,NMDAR2A蛋白的表达降低,PSD95蛋白的表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论下调SRR可通过降低PC12细胞内NMDAR2A蛋白表达,缓解细胞NMDA受体的过度激活,减少细胞凋亡,提高细胞存活率,保护Aβ25-35损伤的神经细胞,还可以升高PSD95蛋白的表达,缓解突触损伤。
简介:摘要;目的:建立2,4二氨基甲苯的测试方法。方法:塑料样品用粉碎机粉碎,用甲苯甲醇(1:1)溶液60℃下超声萃取2小时,分别在LC-MSMS和GCMS测试,在1~20mg/L的浓度范围内线性良好,线性相关系数达到0.996以上。
简介:【摘要】目的 对水囊压迫联合欣母沛治疗产后出血患者的疗效及对其血流动力学指标的影响展开研究。方法 选取我院2018年8月-2020年7月期间收治的92例产后出血患者为研究对象,并采用随机分组法其分为两组,观察组与对照组各46例。对照组患者均接受单一欣母沛卡前列素氨丁三醇治疗,观察组则在对照组基础上施加水囊压迫疗法对患者展开治疗,对两组临床疗效以及血流动力学指标展开对比观察与分析。结果 对比发现观察组止血更早,出血量更少,治疗后血流动力学指标水平更理想,两组比较均呈显著差异性,存在统计学意义(P均<0.05)。结论 综上所述,欣母沛联合水囊压迫技术治疗产后出血能够缩短止血时间,降低出血量,同时有效改善患者血流动力相关指标水平,值得推广。
简介:【摘要】目的 观察改良B-lynch缝合术在凶险性前置胎盘治疗中的应用效果及其对卵巢功能的影响。方法 本次研究80例凶险性前置胎盘患者均为本院2019年8月-2020年12月接收,随机分为对照组(40例,常规治疗)与观察组(40例,改良B-lynch缝合术),对两组治疗效果进行比较。结果 FSH、AMH、LH和E2方面,治疗前,两组对比,差异较小(P>0.05);观察组治疗后更低,与对照组存在明显差异(P