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  • 简介:目的:采用电生理研究方法,观察脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰骨髓间充质干细胞脊髓损伤修复作用。方法随机将大鼠分成3组:空白组10只(只切除椎板,暴露脊髓硬脊膜);SCI组10只;SCI术后细胞移植组10只;从以上三组大鼠随机抽取8只于细胞移植后1d、7d、14d、21d、30d、60d进行SEP(皮层体感诱发电位)、MEP(运动诱发电位)电生理检测技术,并观察大鼠运动评分恢复程度。结果细胞移植4d后,大鼠饮食活动开始增加;后肢变化过程如下:损伤后1~4d损伤侧后肢迟缓性瘫痪,拖地行走,损伤侧后肢由损伤初期运动减弱逐渐恢复,损伤后5~9d损伤侧后肢痉挛性瘫痪;10~14d损伤侧下肢恢复少量活动,损伤侧后肢恢复至损伤前稍弱状态;15~21d损伤侧后肢活动能力较之前有明显改善,至30d损伤侧后肢活动能力及肌张力恢复程度最明显,30d以后无更明显改善。免疫组化发现损伤处诱导标记骨髓间充质干细胞存活,行为学观察发现细胞移植改善了损伤大鼠运动能力。结论骨髓间充质干细胞BDNF基因修饰后可以促进脊髓损伤大鼠神经再生及部分传导功能恢复。

  • 标签: 骨髓间充质干细胞 BDNF基因 脊髓损伤 电生理
  • 简介:目的测定6~8龄Beagle犬正常生理、生化数据,为药理、毒理试验提供对照参考.方法血液学、血液生化学、血清激素水平、血压、呼吸、心电图、骨髓象、脏器系数指标均按现临床检测方法进行.结果48头6~8龄Beagle犬(雌雄各半)正常生理、生化参数,血清激素水平,骨髓象及主要脏器系数均取得平均值及标准差范围.结论6~8龄正常Beaele犬生理、生化参数个体差异较小,本研究结果可作为新药Beagle犬长毒试验中各项测试正常值参考.

  • 标签: 生理学 血液生物化学 骨髓 临床检测
  • 简介:目的通过观察左归丸含药血清对成骨细胞白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素.6(IL-6)环加氧酶-2(COX-2)表达影响,探讨其治疗骨质疏松作用机制。方法体外分离、培养成骨细胞,实验分为3组:正常血清组、卵巢切除(OVX)血清组OVX含药血清组。采用免疫组化法,检测成骨细胞IL-1、IL-6COX-2表达。结果OVX血清组成骨细胞IL-1、IL-6COX-2表达明显强于正常血清组,而OVX含药血清组表达OVX血清组明显减弱,正常血清组比较,则无显著性差异。结论在去势状态下,左归丸可能是通过抑制成骨细胞IL-1、IL-6前列腺素E2(PGE2分泌,进而达到治疗骨质疏松作用。

  • 标签: 左归丸 成骨细胞 白细胞介素类 前列腺素内过氧化物合酶
  • 简介:目的构建人胰岛素基因真核高效表达载体,为胰岛素转基因研究奠定基础.方法用限制性内切酶SpeⅠHindⅢ消化pEF1α-GFP,回收1.2kbEF1α启动子,插入到pCMV-mINSNruⅠHindⅢ位点中,获得重组质粒pEF1α-mINS;将pCMV-mINSpEF1α-mINS分别转染BHK细胞,用G418筛选,阳性克隆传至20代后,分别用放免方法免疫组化法分析胰岛素/或胰岛素原在BHK细胞中表达情况.结果放免测定,pCMV-mINSpEF1α-mINS在BHK细胞中胰岛素/或胰岛素原表达量分别为4.077μIU/ml6.897μIU/ml.免疫组化分析,pCMV-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平灰度值为190.0±19.56;pEF1α-mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平灰度值为181.4±18.45,在BHK细胞核中表达水平灰度值为155.4±11.66.结论在BHK细胞中启动子EF1α启动胰岛素基因表达活性比启动子CMV高.

  • 标签: 启动区 遗传学 人胰岛素基因 BHK细胞 表达
  • 简介:目的研究氧氟沙星昆明系小鼠胚胎胎鼠发育影响,确定其是否存在生殖毒性致畸性.方法①雄鼠分别灌服各剂量氧氟沙星,连续10d,末次给药24h后母鼠合笼,在妊娠第三天取胚胎,记录各剂量组胚胎发育率.②孕鼠妊娠零天给药,分别口灌服高、中、低剂量[36、72360mg/(kg.bw)]氧氟沙星溶液,连续给药3d,在妊娠第三天收集胚胎,记录胚胎发育率.③孕鼠妊娠零天给药,分别口灌服各剂量氧氟沙星溶液,连续给药10d,在妊娠第16天取出胎鼠,记录胎鼠体重、胎盘重、活胎数、胎鼠外观畸形内脏畸形指标.结果给药组对照组相比,雄鼠服用高剂量组360mg/(kg.bw)氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著(P<0.05),而中等剂量低剂量组对着床前胚胎发育影响不显著(P>0.05).雌鼠服用不同剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响不显著(P>0.05).氧氟沙星受孕鼠活胎数吸收胎数均无明显影响,给药组活鼠体重、胎盘重均未见明显差异(P>0.05);药物组对照组均未出现外观畸形内脏畸形,也不存在剂量效应关系.结论孕鼠服用不同剂氧氟沙星昆明系小鼠胚胎胎鼠发育无明显影响,表明氧氟沙星雌性鼠不具有明显生殖毒性致畸性;但雄鼠服用高剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著.

  • 标签: 氧氟沙星 生殖毒性 致畸性 发育影响 小鼠胚胎 着床前
  • 简介:目的通过度他雄胺大鼠附睾精子生育影响,探索调节雄性生育睾丸后作用靶点.方法使用度他雄胺2040mg/(kg·d)大鼠灌胃给药,连续2周.给药结束后雄雌鼠按12合笼,计算生殖指数;采用计算机辅助精子分析系统分析精子活力形态;采用SYBR-14PI双重荧光染色计算精子存活率;采用Elisa法测定大鼠睾酮(T)双氢睾酮(DHT)血清浓度;采用HE染色法各组睾丸、附睾进行组织学分析.结果度他雄胺低、高剂量组双氢睾酮浓度均显著下降,分别为0.540.28nmol/L(P<0.01),精子活力明显降低,分别为39.0%28.7%(P<0.01),畸形率分别增加为10.3%15.6%(P<0.05),最后受孕率分别降为62.5%38.4%.而睾酮水平和交配指数均无明显变化(P>0.05),睾丸附睾亦无明显病理学改变.结论度他雄胺通过抑制DHT生成,影响附睾精子成熟而导致大鼠不育,为今后男性避孕不育药物研发提供了新思路.

  • 标签: 度他雄胺 附睾 精子成熟 生育力
  • 简介:目的探讨噪声污染大鼠血激素水平和热休克蛋白-70(Hsp-70)表达影响。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(正常饲养)实验组(分为35、65、85dB三个组),每组10只动物。每天刺激1次,每次刺激30min,连续刺激20d。第21天采血用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血液中去甲肾上腺素(NA),睾酮(T),多巴胺(DA),Hsp-70水平。结果ELISA法检测发现,实验组(35、65、85dB组)大鼠体重比对照组分别减轻了23.45%,30.13%,35.64%,TDA水平分别降低了9.12%、20.06%、37.99%15.49%、18.31%、24.88%;血NAHsp-70水平分别升高了35.08%、171.52%、197.86%39.34%、195.09%、285.25%,差异均有显著性(均P<0.01)。结论噪声污染能显著影响大鼠血激素水平和热休克蛋白-70表达。

  • 标签: 噪声污染 激素 热休克蛋白-70 WISTAR大鼠
  • 简介:目的探讨高脂饮食西藏小型猪胰岛素抵抗(IR)及肝胰岛素受体底物(IRS)表达影响。方法将10只西藏小型猪随机分为正常对照组(Ctr)5只饲喂普通饲料、IR模型(IRmodel)组5只饲喂高脂饲料,连续造模12周。造模12周后,称重并测量体长,计算体质量指数(BMI),空腹取前腔静脉血测定总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、空腹血糖(FBG)胰岛素(insulin),计算胰岛素抵抗指数(homeostasismodelassessment-estimatedinsulinresistance,HOMA-IR);同时进行糖耐量试验,并计算糖耐量曲线下面积(AUC);取肝组织检测IRS-IRS-基因蛋白表达,并行油红O、PASHE染色,分别观察肝脂质沉积、糖原及组织病理变化。结果与正常对照组比,IR模型组体重、BMI指数、TC、LDL-C、HDL-C、FFA、FBG、insulinHOMA-IR指数均显著升高(P<0.05,P<0.01);糖耐量试验显示血糖胰岛素水平曲线下降延缓,而AUC血糖AUC胰岛素均明显升高(P<0.05,P<0.01);肝组织中出现脂质沉积、糖原增加和局部肝细胞浊肿、部分胞核消失或被挤向端,偶见淋巴细胞浸润;同时肝组织中IRS-IRS-mRNA蛋白表达均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论高脂饮食可引起西藏小型猪胰岛素抵抗,肝组织IRS-IRS-表达降低是高脂饮食影响西藏小型猪胰岛素敏感性分子机制之

  • 标签: 西藏小型猪 高脂饮食 胰岛素抵抗 胰岛素受体底物
  • 简介:目的观察灵光注射液(复方樟柳碱)失血性休克再灌注大鼠心脏肝脏损伤影响.方法将56只雄性大鼠随机分4组,分别设为假休克组(8只)、模型组(16只)、灵光注射液低剂量组(16只)高剂量组(16只),除假休克组外,大鼠均经历4kPa,70min失血性休克,在休克复苏后6h12h各组分别处死半数动物,检测血清CK、CK-MB、LDH、ALT、AST,心脏肝脏做组织学超微结构检查.结果与结论灵光注射液大鼠失血性休克再灌注引起心脏肝脏功能形态损伤均有明显治疗作用,其机制可能与改善微循环、清除氧自由基保护生物膜作用有关.

  • 标签: 樟柳碱 大鼠 休克 出血性 心脏 肝脏 灵光注射液
  • 简介:目的克隆日本大耳白兔白毛黑眼系(白毛黑眼兔)眼部虹膜Trp1、Trp2基因,获取其完整外显子序列。进步推测这两个基因编码蛋白,并分析其特征。方法从白毛黑眼兔黑色虹膜组织中提取RNA,并反转录成cDNA。利用来自小鼠、大鼠同源引物,扩增获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子片段。然后已知片段进行3’RACE5’RACE,从而获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子完整序列。利用相关软件获得序列进行翻译分析。结果首次获得了白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子全序列。该实验兔Trp1基因编码序列全长1604个碱基,其核苷酸序列与人相似度为87.9%,小鼠相似度为82.7%。TRP1成熟蛋白包含513氨基酸,氨基酸序列与人相似度为89.8%,小鼠相似度为86.6%。该实验兔Trp2基因序列全长1554个碱基,其核苷酸序列与人相似度为83.2%,小鼠相似度为81.9%。TRP2成熟蛋白包含494个氨基酸,其序列与人致度为84.2%,小鼠致度为84.4%。结论本研究获得TRP1、TRP2序列已知家兔酪氨酸相关蛋白家族成员TYR序列进行比对,结果显示这三种蛋白之间有较高相似度,并且TRP1TRP2蛋白序列表现出了酪氨酸酶家族结构上保守性特有的结构特征。

  • 标签: 白毛黑眼兔 酪氨酸相关蛋白1 酪氨酸相关蛋白2
  • 简介:观察2型糖尿病大鼠不同时期肺组织谷氨酰胺果糖转移酶1(Gfat1表达情况。方法SD大鼠随机分为正常对照组模型组,对照组18只,模型组28只。模型组高脂饲料喂养2个月后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ15mg/kg)复制糖尿病模型,统计体重变化及空腹血糖值。RT-PCR方法检测造模成功后2周、4周6周肺组织Gfat1mRNA表达。结果模型组大鼠体重增长较快,造模开始第28天,第42天,第56天第70天高脂模型组对照组体重差异有显著性(P〈0.05)。注射STZ高脂模型组空腹血糖值较高(FBG≥10.0),对照组比较,FBG差异有极显著性(P〈0.01)。糖尿病大鼠造模成功后2周,模型组肺组织Gfat1表达低于对照组,对照组比较差异无显著性(P〉0.05),4周模型组Gfat1表达高于对照组,模型组对照组比较差异有显著性(P〈0.05)。6周模型组Gfat1表达高于对照组,但模型组对照组比较差异无显著性(P〉0.05)。结论大鼠饲喂高脂饲料结合腹腔注射STZ可成功建立2型糖尿病大鼠模型;在不同时期2型糖尿病大鼠肺组织中,Gfat1表达水平发生改变。

  • 标签: 2型糖尿病模型 大鼠 Gfat1 表达 肺脏
  • 简介:建立动物模型目的是在实验动物身上复制人类疾病模型,用于研究人类疾病病因、发病、病理变化以及疾病预防治疗。目前尚无理想阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)动物模型,AD实验动物模型滞后在很大程度上制约了AD治疗药物筛选。随着AD病因发病机制研究不断深入,更完善AD动物模型也在陆续出现。近年来出现转基因动物模型属于AD病因模型,但也不能完整复制出AD所有特征。最大缺憾在于缺乏神经原纤维缠结(neurofibrillarytangles,NFTs)和在某些转基因模型中(尤其是单转基因模型)无广泛神经元丢失。虽然用免疫组化方法检测到tau蛋白,但从未发现成对螺旋纤丝(pairedhelicalfilaments,PHF)。

  • 标签: 转基因小鼠 β-淀粉样前体蛋白基因swe基因/突变早老蛋白dE9基因 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白
  • 简介:目的探明孕马血清促性腺激素(PMSG)调控哺乳动物生殖生理机制。方法用4IUPMSG分别处理出生第5天、第10天、第15天第21天幼鼠,观察其卵巢子宫发育影响。结果(1)PMSG处理后,出生第15天幼鼠卵巢指数(33.08%)对照组(27.16%)间差异显著(P〈0.05);(2)PMSG处理后,第5天、10天第15天幼鼠初级卵泡有腔卵泡相对数量对照相比无差异,而21d处理组次级卵泡相对数量显著增加;(3)虽然出生后10d前幼鼠子宫PMSG反应较弱,但是,PMSG出生后15-21d幼鼠子宫重量指数、子宫肌层子宫内膜层厚度发育具有明显促进作用,而对子宫腺体数量增加无影响。结论PMSG幼鼠卵巢发育无明显影响;PMSG出生后第15天前后子宫发挥作用,而且其作用随着出生日龄增加而增强。

  • 标签: PMSG 雌性幼鼠 卵巢 子宫
  • 简介:目的研究比较南极磷虾油实验性高血脂大鼠预防治疗给药辅助降血脂作用效果。方法喂养高脂肪高胆固醇饲料建立SD大鼠高脂血症模型。预防组于造模前给予磷虾油14d及造模期间继续给予磷虾油12d。治疗组则于造模期间给予高脂肪胆固醇饲料磷虾油12d。造模结束后采血检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),病理学检查观察各组肝组织病变。分析比较磷虾油对于高血脂大鼠辅助降血脂预防治疗功效。结果南极磷虾油预防给药组大鼠血清TCLDL-C显著降低(P0.05)。虾油治疗给药未见大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C明显下降(P〉0.05),辅助降血脂作用效果不明显。结论南极磷虾油辅助降血脂作用预防性给药效果明显,具有显著降低血脂TC作用。

  • 标签: 南极磷虾油 辅助降血脂 高血脂症 SD大鼠
  • 简介:目的对比观察滋补肾阴方温补肾阳方卵巢切除所致骨质疏松大鼠治疗作用。以探讨它们之间疗效是否存在差异。方法将雌性Wistar大鼠49只随机分为正常对照组,假手术组,卵巢切除组,滋阴组(灌服生药含量为1.05g/ml滋补肾阴方,按每100g体重0.7ml剂量),补阳组(灌服生药含量为0.78g/ml温补肾阳方,按每100g体重0.7ml剂量)。于造模3个月后开始给药,1次/日,连续6d,休息天后,再连续灌服6d。给药2个月后,将大鼠处死,取胫骨行不脱钙骨切片,甲苯胺蓝染色,其进行骨组织形态计量。结果切除卵巢5个月后,大鼠胫骨TBV%显著降低,TRS%以及TFS%,AFS%,MAR,BFR,OSWmAR皆显著增高。给大鼠灌服滋阴补肾方温补肾阳方2个月后,均能使上述指标发生逆转,但程度有所不同,温补肾阳方效果要明显优于滋补肾阴方。结论滋补肾阴方温补肾阳方卵巢切除所致骨质疏松均有明显治疗作用,但温补肾阳方疗效要优于滋阴补肾方。

  • 标签: 滋补肾阴方 温补肾阳方 卵巢切除 骨质疏松大鼠 治疗作用 对比研究
  • 简介:目的雌性树Ju麻醉,生殖器官解剖卵母细胞形态特征进行观察,为制备转基因树Ju奠定基础,方法1%戊巴比妥钠(10^-3ml/g体重)肌内注射树Ju麻醉,比较在不同环境温度下麻醉效果影响。雌性树Ju生殖器官解剖结构,卵母细胞形态特征进行观察。结果(1)在25-28℃,18-20℃下麻醉持续时间分别为80min,130min;(2)雌性树Ju子宫为双角子宫,卵巢外有包膜;(3)卵母细胞富含色素,卵母细胞透明带质膜韧性山羊强,结论在25-28℃下,用1%戊巴比妥钠(10^-3ml/g体重)树Ju麻醉时间比较适中,便于实验操作而且苏醒快,雌性树Ju生殖器官解剖结构,卵母细胞形态特征观察表明,树Ju胚胎移植,转基因实验操作小鼠类似,但树Ju受精卵须进行离心处理。

  • 标签: 雌性树Ju 麻醉 生殖器官 解剖 实验动物 卵母细胞
  • 简介:通过临床实验室研究,人类疾病诊断、治疗预防方法医学科学不断地发展,作为个基本方法,动物试验在医学研究领域起重要作用,并且解决许多以往不能解决实际问题重大理论问题。但同时也产生了个伦理学矛盾。方面,大部分活体动物实验都可能引起动物伤害,另方面,这些研究,人类疾病预防、治疗或减轻(症状或痛苦)又是非常有意义。对于如何解决这个矛盾,目前还没有统认识。本文以非人灵长类(non-humanprimates,NHPs)动物模型在获得性免疫缺陷综合征(acquiredim-munodeficiencysyndrome,AIDS)研究中应用,研究医学动物实验动物福利关系。Medicalsciencesondiagnosis,treatmentandprophylaxisofhumandiseasesdevelopceaselesslythroughclinicaltrialsandexperiments.Asabasicmethod,animalexperimentsplayimportantroleinmedicalresearch...

  • 标签: 动物实验 动物福利 动物模型应用
  • 简介:目的利用在培养液中添加绵羊卵泡液次黄嘌呤,抑制卵母细胞GVBD发生,延长转录活性,从而使卵母细胞真正成熟,提高胚胎质量及生产效率。方法利用体外成熟技术有屠宰采集绵羊卵母细胞进行培养,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤,检查成熟效果。结果将卵母细胞培养在50%100%卵泡液中,24h后处于GV期卵母细胞分别为19%(8/42)33.3%(13/39)。在含有4mmol/L次黄嘌呤培养液中,24h后有21.6%(16/74)卵母细胞处GV期,而对照组中只有6%(3/50),经过次黄嘌呤处理卵母细胞多数都停滞于PI期(44.6%,33/74),在4mmol/L次黄嘌呤培养液中添加FSH并未使受到抑制卵母细胞诱导成熟。结论卵泡液次黄嘌呤只能在有限程度上抑制减数分裂重新启动,并减数分裂全过程都有影响。这种影响程度抑制因子浓度相关。存在明显剂量效应。

  • 标签: 绵羊卵泡液 次黄嘌呤 卵母细胞 体外减数分裂
  • 简介:目的探讨原花青素(Procyanidolic,pc)急性呼吸窘迫综合征(Acuterespiratorydistesssyndrome,ARDS)大鼠疾病模型治疗作用.方法大鼠用百草枯(Paraquat,PQ)次性灌胃,剂量250mg/kg,治疗组分别于染毒6、24、48h各给予PC治疗剂量500mg/kg,染毒组治疗组分别于24、48、72h,取大鼠血浆支气管肺泡液(BALF),测试其血浆BALF中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,各组取肺病理组织做病理组织观察研究.结果治疗染毒组比较,血浆BALF中GSH-P\-X、SOD活力逐渐升高,差异有显著性P<0.05,MDA含量下降,差异有显著性P<0.05,染毒对照组比较,血浆BALF中MDA含量高于对照组,差异有显著性P<0.05,SODGSH-P\-X活力下降,差异有显著性P<0.05,肺组织病理学观察,ARDS组肺泡壁充血,炎症细胞浸润,Ⅰ型Ⅱ型细胞破坏,肺泡内有炎症渗出物,对照组肺泡壁完好,肺泡内没有炎症渗出物,没有炎症细胞浸润;给予PC治疗后,肺泡壁充血、出血减轻,炎症渗出物减少;结论PCARDS模型大鼠有治疗果.

  • 标签: 呼吸窘迫综合征 原花青素 治疗 大鼠模型