简介：拟建立抗HIV-p24蛋白的单克隆抗体细胞株及双抗体夹心法,用于检测艾滋病病人血清中的p24抗原.用纯化的基因工程表达的HIV-p24蛋白免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠的脾细胞和小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞融合,有限稀释法克隆细胞,ELISA筛选特异性抗体.结果克隆筛选出12株细胞,初步建立了检测HIV-p24抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验.本方法为监控艾滋病病毒感染的窗口期和艾滋病病人临床治疗效果提供了检测手段.

简介：在大肠杆菌中,利用新构建的含T7g-10LRBS以及λ-PR启动子的新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序列的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白p24的高效表达。克隆的gag-pol基因片段在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其表达的病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白的有效加工,产生成熟的核心蛋白p24及其它产物。重组p24以可溶形式存在,可以被抗p24的单克隆抗体特异识别。测定的N端8个氨基酸序列与从病毒纯化的p24完全一致。在使用硫酸铵沉淀后,采用两步离子柱层析,可将重组蛋白纯化到95％以上的纯度。结果表明,纯化的p24可以作为特异性很强的试剂而用于HIV感染的诊断及病情的预后,并可用于p24的生化及结构分析。

简介：WeproposedadynamicmodelidentificationanddesignofanH-Infinity(i.e.H_∞)controllerusingaLightweightPiezo-CompositeActuator(LIPCA).Asecond-orderdynamicmodelwasobtainedbyusinginputandoutputdata,andapplyinganidentificationalgorithm.TheidentifiedmodelcoincideswellwiththerealLIPCA.Toreducetheresonatingmodethatistypicalofpiezoelectricactuators,anotchfilterwasused.AfeedbackcontrollerusingtheH_∞controlschemewasdesignedbasedontheidentifieddynamicmodel;thus,theLIPCAcanbeeasilyusedasanactuatorforbiomemeticapplicationssuchasartificialmusclesormacro/micropositioninginbioengineering.Thecontrolalgorithmwasimplementedusingamicroprocessor,analogfilters,andpoweramplifyingdrivers.Oursimulationandexperimentalresultsdemonstratethattheproposedcontrolalgorithmworkswellinrealenvironment,providingrobustperformanceandstabilitywithuncertaindisturbances.

简介：Biomimeticsurfaceisaneffectivewaystopromotetheperformancegradeandappliedrangeofmaterialswithoutalteringtheirsubstrate.Manyimprovedpropertiessuchasresistingfatigue,enduringwear,etc,havebeenachievedbyapplyingbiomimeticmorphologyorstructuretosomeengineeringmaterialsurfaces.Inthispaper,aimingtorevealtherelationshipbetweenthermalcrackingbehaviorandmechanicalpropertiesofengineeringmaterialswithbiomimeticsurface,biomimeticspecimenswerefabricatedusinglasertechniquebyimitatingtheheterogeneousstructureonthesurfaceofplantleaves.TheeffectofthermalfatiguecyclingonthetensilepropertiesofH13diesteelspecimenswithdifferentsurfaces(severaltypesofbiomimeticsurfacesandasmoothsurface)wascomparedandinvestigated.Asaresult,duetothecouplingeffectsofthemorphologicalfeaturesonthesurfaceandthemicrostructurecharacteristicswithinunitzone,thesespecimenswithbiomimeticsurfaceexhibitremarkablyenhancedUltimateTensileStrength(UTS)and0.2%YieldStrength(YS)comparedwithreferencespecimenswhilecorrespondingductilityremainslargelyunaffectedevenheightened,whetherthethermalfatigueloadsornot.Therelativemechanismsleadingtotheseimprovementshavebeendiscussed.

简介：2009年3月在美国和墨西哥流感样患者的呼吸道标本中鉴定出新的猪源性甲型H1N1流感病毒。该病毒可人-人传播,已蔓延到112个国家和地区。为了遏制不断重组或重配的流感病毒,各国学者对甲型H1N1流感病毒的分子生物学特征、复制周期及实验室诊断做了细致的研究,以研发相应的药物或疫苗,这些成就为世界各国防控今年新鉴定的猪源性甲型H1N1流感病毒感染发挥了重要作用。现就猪源性甲型H1N1流感病毒的鉴定、基因组结构特征做一综述。

简介：目的:探讨在胸腰椎后路内固定手术术后早期伤口感染后使用负压封闭引流技术在保留内固定治疗中的应用。方法:回顾性分析我院2008年1月~2013年6月胸腰椎后路内固定术后感染的14例患者,应用敏感抗生素,保留内固定、彻底清创并结合负压封闭引流治疗伤口感染。结果:14例病人经过采用负压引流术,感染得到控制,内固定得以保留。随访9~36个月,患者感染均未再复发。结论:对于胸腰椎后路内固定术后早期感染,应用负压封闭引流可以有效控制感染,利于伤口的早期愈合,治疗腰椎后路内固定术后感染保留内固定装置治疗行之有效。

简介：目的：利用Red系统构建肠出血性大肠杆菌O157：H7的sRNA基因E40缺失突变株。方法：选取本实验室预测并经过实验验证的sRNA基因，根据NCBI上相应的序列，设计2对引物分别扩增该sRNA基因的上下游分别长464和455bp的同源臂，经PCR扩增，构建到相应的载体，最后以构建好的含上下游同源臂和卡那霉素抗性基因的长约2500bp的线性片段作为打靶片段，在Red重组系统的作用下与sRNA基因E40的上下游同源区域发生同组，从而把sRNA基因从基因组上置换下来，之后利用质粒pCP20将FRT位点间的卡那霉素抗性基因消除。结果与结论：构建了出血性大肠杆菌O157：H7的sRNA基因E40的缺失突变株，为进一步研究sRNA基因在出血性大肠杆菌O157：H7生长及致病过程中所起的功能奠定了良好的基础。

简介：目的：研究雷公藤红素对非小细胞肺癌细胞株H1299的杀伤作用及相关调控机制。方法：用细胞计数法测定不同浓度雷公藤红素对H1299细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测H1299细胞的细胞周期;用Westernblotting检测剪切的（cleaved）聚ADP核糖聚合酶（PARP）、cleavedcaspase-3和低氧诱导因子-1（HIF-1）的表达水平;用DCF-DA染色和荧光显微镜检测细胞内的活性氧（ROS）水平;用萤光素酶活性测定法检测NFκB的活性。结果：雷公藤红素以时间和剂量依赖性的方式抑制H1299细胞的增殖,并使细胞阻滞在G2/M期。同时,雷公藤红素显著上调cleavedPARP和cleavedcaspase-3的表达,提高细胞内的ROS水平,并且抑制NFκB的活性。结论：雷公藤红素以时间和剂量依赖性的方式抑制H1299细胞的增殖,并诱导caspase依赖性的细胞凋亡,具体机制与细胞内ROS的积累和NFκB的活性抑制有关。

简介：目的：应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成的H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础。方法：构建能共表达A/chicken/Jilin/2003（H5N1）禽流感病毒血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA）、A/PR/8/34（H1N1）流感病毒基质蛋白（M1）和离子通道蛋白（M2）的2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染的细胞内自主组装成病毒样颗粒。经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒的组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒的活性。结果：HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒;电镜观察到病毒样颗粒的形态与流感病毒一致,直径约80nm;血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞的活性。结论：应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案。

简介：目的：采用巢式PCR对甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链基因进行扩增，对获得的基因进行序列分析，并找出克隆鼠Igκ轻链和重链可变区基因的通用方法。方法：设计22对扩增鼠Igκ轻链可变区和重链可变区基因的引物，对6株鼠抗人甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体的轻链和重链可变区基因进行克隆并测序，与NCBI公布的鼠免疫球蛋白序列比对分析。结果：巢式PCR方法可以有效避免单克隆抗体克隆过程的假基因，并且得到的单克隆抗体的氨基酸序列均符合鼠免疫球蛋白可变区特征。结论：建立了克隆鼠免疫球蛋白轻链和重链可变区基因的通用方法，为后期克隆鼠源性单克隆抗体的可变区基因提供了基础，并为研究甲型H1N1流感病毒血凝素与抗体的结合位点提供了实验数据。