简介:BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统是一种快速、高效、便捷的表达系统.将人可溶性CD14(sCD14)基因克隆入pFASTBAC1转移质粒中,重组质粒转化DH10BAC感受态细胞,目的基因通过同源重组插入BacmidDNA中,后者转染sf21昆虫细胞获得重组杆状病毒.利用重组蛋白C-末端的6×His@Tag,经TALON金属螯合色谱将重组病毒感染昆虫细胞获得的无血清培养上清--步纯化得到重组蛋白,计算表明从1L培养基中可纯化到约8mg纯度大于95%的重组sCD14蛋白,免疫印迹结果表明重组蛋白具有与抗6×His单抗和抗CD14单抗结合的抗原性.疑胶迁移实验和细胞活性实验表明重组sCD14蛋白能在体外与LPS结合,并能增强LPS诱导THP-1细胞产生细胞毒性因子.
简介:1稿件内容本刊登载生物技术各类学科的研究报告、研究简报、技术方法、综述、经验介绍、信息交流等文章。所有来稿都应是没有在国内外公开出版的刊物上发表过的,为了作者的学术道德声誉,请不要一稿多投。研究论文应为原始研究工作报告;研究简报是为争取时间以简要的形式发表的具有重要结果的原始研究工作报告。为充分利用版面,本刊欢迎有关生物技术的科学新闻、简讯、学术活动通知、书评、短评、启事等。2投稿要求请寄来作者工作单位的介绍信和审稿费20元整,并请所有署名作者在文稿或介绍信上签名。请用MicrosoftOfficeWord文本格式,以电子邮件的附件形式把文稿发给编辑部。请写明稿件联系人的详细通讯地址(