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  • 简介:应用酵母双杂交技术构建重组人雌激素受体基因酵母,用以检测类,抗雌激素化合物和环境样品类,抗雌激素活性.采用多聚酶链反应(PCR)法扩增人雌激素受体(hER)基因,构建诱饵质粒pGBKT7-ERLBD;分别提取并纯化两种含有ER共激活因子基因靶质粒pGADg24-GRIP1和pGAD424-SRC1;诱饵质粒和靶质粒同时转染酵母细胞Y187,于营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-Leu)上筛选阳性菌落,分别构建两种ER双杂交酵母ER+GRIP1和ER+SRC1.考察双杂交酵母与不同激素:17β-雌二醇(E2)、二氢睾酮(DHT)、孕酮(PG)以及三碘甲状腺原氨酸(T3)结合情况,并考察了雌激素受体拮抗剂4-羟基他莫昔芬(4-OHT)与酵母相互作用.结果表明:ER+GRIP1和ER+SRC1酵母均能够专一性和E2结合,并存在显著剂量-效应关系,E2对ER+GRIP1和ER+SRC1酵母β-半乳糖苷酶活性诱导EC50值分别为7.3×10^-11mol·L^-1和1.5×10^-10mol·L^-1,其中ER+GRIP1酵母细胞诱导产生酶活性值明显高于ER+SRC1-酵母细胞.4-OHT能够抑制E2诱导ER+GRIP1酵母细胞产生酶活性,并存在显著剂量-效应关系,IC50值为1.0×10^-7mol·L^-1.表明重组人雌激素受体基因酵母可以用于检测化合物和环境样品类,抗雌激素活性.

  • 标签: 酵母双杂交 人雌激素受体 重组基因酵母 抗雌激素活性
  • 简介:为检测高效光引发剂4,4′-二甲基二苯基碘鎓盐六氟磷酸盐(IHT-PI820)和2-异丙基硫杂蒽酮(IHT-PIITX)染色体畸变作用,采用体外培养中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)染色体畸变实验,在代谢活化与非代谢活化条件下,观察PI820及ITX致CHL细胞株染色体数目及结构变化.结果显示:在非代谢活化条件下,PI820引起CHL细胞多倍体增加,并具有剂量反应关系,在代谢活化条件下未见对CHL细胞染色体有损伤作用;在代谢活化与非代谢活化条件下,均未观察到ITX对CHL细胞染色体损伤作用.PI820可引起CHL细胞染色体数目畸变,ITX无染色体畸变作用.

  • 标签: 4 4′-二甲基二苯基碘鎓盐六氟磷酸盐(IHT-PI820) 2-异丙基硫杂蒽酮(IHT-PIITX) 染色体畸变
  • 简介:彗星实验是瑞典科学家Ostling和Johanson于1984年发明检测毒物DNA损伤效应方法。它经历了从最初微电泳技术、中性彗星实验、碱性彗星实验、酶切彗星实验和双向垂直彗尾彗星实验等不断完善发展过程。在毒理学、遗传学和环境生态科学等领域有着重要应用,是经济合作与发展组织(OECD)和欧洲食品安全局等国际组织推荐测定遗传毒性方法之一。彗星实验关键点包括单细胞悬液制备、细胞裂解液成分与比例,低熔点琼脂糖凝胶浓度,电泳条件等。在典型应用领域,如蚯蚓、鱼、两栖动物、鼠和人彗星实验很难找到标准实验方案。成功彗星实验还需关注,实验设计时必须包括阳性对照,结果表述时必须有图为证,实验方案可能因物种或细胞而异。

  • 标签: 彗星实验 单细胞凝胶电泳 DNA损伤 遗传毒性
  • 简介:为了研究丙烯酰胺致小鼠睾丸细胞和外周血淋巴细胞DNA损伤及修复情况,同时比较这两种细胞对丙烯酰胺敏感性,将雄性昆明种小鼠一次性腹腔注射丙烯酰胺(50mg·kg^-1(bw)),在暴露后第1、2、4、6、8、10、12d,分别对其睾丸组织细胞和外周血淋巴细胞DNA损伤进行彗星实验分析.结果表明,暴露结束后每个时间点小鼠睾丸组织细胞、外周血淋巴细胞DNA迁移率均显著高于阴性对照组,随时间推移两种细胞DNA迁移距离逐渐降低,同一时间点睾丸组织细胞DNA损伤较外周血淋巴细胞DNA损伤更为严重,两者差异显著(p〈0.05).以上结果表明,睾丸组织和外周血淋巴细胞可能是丙烯酰胺作用位点;机体对丙烯酰胺造成遗传损伤有一定修复能力;与淋巴细胞相比,睾丸细胞对丙烯酰胺导致遗传损伤更为敏感.

  • 标签: 丙烯酰胺 彗星实验 生殖细胞 淋巴细胞 DNA损伤
  • 简介:为提高发酵啤酒糟高蛋白产量.以一次发酵黑曲霉和木霉双菌发酵啤酒糟为原料.粗蛋白含量为指标.对饲料酵母和枯草芽孢杆菌进行二次混菌发酵.其对应最佳条件为温度33.73℃.接种量16.51%.酵母菌和枯草芽孢杆菌接种量比为5∶1.添加硫酸铵5.00%.尿素添加量2..00%.发酵时间4d.理论粗蛋白质含量43.38%.表明通过二次混菌发酵能显著提高啤酒糟粗蛋白含量.图1.表6.参12.

  • 标签: 啤酒糟 混菌 二次发酵 响应面分析 高蛋白
  • 简介:近年来,大量规模养猪场不断出现,任意排放病死猪尸体已成为一个较为突出环境污染问题,不仅对生态环境和人体健康产生危害,还影响畜牧业可持续发展.试验利用sq复合菌剂、病死猪、米糠、泥炭土作为原材料,在发酵箱内,经过7d反复发酵搅拌后生产有机肥工艺流程,从微生物接种浓度、原材料投放C/N比例、原材料含水率、反应时翻堆间隔时间方面进行单因子试验,探究复合菌剂在工艺流程中最优反应参数.结果表明,微生物复合菌剂在接种浓度为2%,微生物与原材料碳氮比例为28∶1,原材料含水率保持在50~60%,12h堆翻一次工艺条件下反应效果最佳.

  • 标签: sq复合菌剂 病死猪 接种浓度 含水率
  • 简介:没有一种动物像马具有如此矫健完美、风姿绰约体形体态;没有一种动物像马拥有如此温文尔雅、高贵潇洒风度气质也没有一种动物像马在人类几千年文明史中扮演了如此重要角色。它经历了几乎全部人类战争刀光剑影、动乱腥风血雨,目睹了一个个王朝更迭和文明兴衰。

  • 标签: 扮演 完美 角色 风度 气质 形体
  • 简介:移动互联网技术下不断出现一些新教学模式如慕课、同步课堂、翻转课堂、专递课堂等,教师职业主次颠倒,建议采取教师职业再造、教学过程再造、课程模式再造和教学管理再造等应对策略.参19.

  • 标签: 移动互联网技术 教师职业 教学模式 教学管理 再造
  • 简介:湖北大学资源与环境管理学院利用白色塑料泡沫作为浮岛载体“生物浮岛”栽培技术近日获得成功,这种技术让栽培在浮岛内植物吸收水中营养物质,从而达到治理内陆江河湖泊水体富营养目的。

  • 标签: 湖泊水 植物吸收 水体富营养化 河湖 治理 江河
  • 简介:石漠是自然因素和不合理的人类活动导致土地功能退化、岩石裸露生态地质灾害,但其根源是脆弱地质环境,故其治理必须从地质条件入手.植物地境是植物地下生境,是植物生存地下空间,由土壤、部分母质及包含在其中水分、盐分、空气、有机质等构成.地境再造即是人工塑造植物所需地境条件,为植物生存提供基础.地境再造模式包括植物地境特征调查、地境空间再造、土壤再造和适应所选物种种植过程.事实证明,植物地境再造模式适用于石漠治理.图4,参10.

  • 标签: 石漠化 地境再造 生态地质
  • 简介:天然林拥有人工林所无法企及诸多优点,在整个生态系统中所发挥多种功能也非人工林所能替代。因而对天然林抢救和保护应当放在刻不容缓第一位。

  • 标签: 人工林 天然林 森林保护 植树 生态保护
  • 简介:为初步探讨全氟辛烷磺酸(Perfluorooctanesulfonate,PFOS)细胞免疫毒性,采用每天1次经口灌胃染毒方法,研究了PFOS经口重复剂量染毒对C57BL/6小鼠淋巴细胞增殖功能和NK细胞活性影响.选择雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为4组.实验组PFOS染毒剂量分别为5、10、20mg·kg-1(bw),对照组给予2%Tween-80.每天1次经口灌胃染毒7d后,制备脾脏T淋巴细胞悬液,以刀豆蛋白A(ConA)和大肠杆菌脂多糖(LPS)作为刺激源,采用MTT法检测T、B淋巴细胞增殖功能,乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞活性.结果表明,10mg·kg-1和20mg·kg-1PFOS染毒组小鼠体重呈明显下降趋势,且小鼠胸腺和脾脏指数显著低于对照组(p〈0.05),而各PFOS染毒组小鼠肝脏指数均显著高于对照组(p〈0.05).PFOS各染毒组T淋巴细胞增殖功能均显著低于对照组(p〈0.05);10mg·kg-1和20mg·kg-1PFOS染毒组小鼠NK细胞活性显著降低(p〈0.05).研究结果显示,PFOS暴露可降低小鼠淋巴细胞增殖功能和NK细胞活性,表明PFOS具有免疫抑制效应.

  • 标签: 全氟辛烷磺酸 淋巴细胞增殖 NK细胞活性
  • 简介:淋巴细胞激活剂可有效活化免疫细胞,进而促进细胞因子产生和分泌,但不同激活剂及激活方式选择直接影响细胞因子产生种类和水平。为呼价不同激活剂促细胞因子产生作用,筛选一种快速有效激活方法用于细胞因子检测,本研究采用不同浓度佛波素(PMA)/钙离子载体、植物血凝素(PHA)、刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)和美洲商陆素(PWM)体外激活大鼠外周全血0、2、4、6、8、10h,对各样本中10种细胞因子(白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介季13(IL-13)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)和转化生长因子13(TGF-β)含量进行检测,并评价了环孢素A和硫唑嘌呤2种免疫抑制剂对激活剂诱导产生细胞因子抑制作用。结果表明25ng·mL-1PMA和1μg·mL-1钙离子载体体外诱导6h可以显著升高大鼠外周全血IL-2、IFN-γ、TNF-α、RANTES和TGF-β含量,是一种作用广泛激活方法。其诱导产生细胞因子作用变化可反映机体免疫系统和功能损伤,可有效用于外源化学物免疫毒性评价。

  • 标签: 淋巴细胞激活剂 细胞因子 外周全血 悬浮芯片系统 免疫毒性评价
  • 简介:入侵植物会损害环境生态系统,影响生物多样性,给农业生产带来严重经济损失.目前,虽然入侵植物感作用研究较多,但是很多缺乏对感作用深入研究.结合国内外入侵植物研究进展,该研究阐述了小飞蓬研究现状、感物质分离鉴定方法以及入侵机理研究进展.参24.

  • 标签: 入侵植物 化感作用 小飞蓬
  • 简介:微囊藻毒素对生物机体具有强烈毒性.近几年研究表明,微囊藻毒素能够诱导细胞产生氧化胁迫,这可能是微囊藻毒素致毒机理一个重要方面.在总结国内外相关研究基础上,论文从微囊藻毒素诱导细胞氧化损伤以及影响其抗氧化防御系统两个方面综述了微囊藻毒素诱导细胞氧化应激研究进展.

  • 标签: 微囊藻毒素 氧化胁迫 致毒机理 抗氧化防御系 细胞氧化损伤
  • 简介:细胞凋亡是调控机体发育和维护内环境稳定重要机制。在克隆了稀有鮈鲫(Gobiocyprisrarus)肝脏组织中凋亡相关bcl-2、apaf-1、caspase-3和caspase-9基因部分cDNA片段之后,进行了序列分析。结果表明,caspase-3和caspase-9基因片段与唐鱼(Tanichthysalbonubes)相对应核苷酸序列同源性最高,而bcl-2、apaf-1基因片段则分别与鮈鱼(Gobiogobio)和鲤鱼(Cyprinuscarpio)相对应核苷酸序列同源性最高,为99%和89%。基于稀有鮈鲫和已知物种caspase-3基因核苷酸序列构建了系统发育树,发现稀有鮈鲫与唐鱼、斑马鱼(Daniorerio)亲缘关系最近,而与金头鲷(Sparusaurata)、红鳍东方鲀(Takifugurubripes)亲缘关系较远。本研究为深入理解外源性化学物质对鱼类毒理学机制及其生态健康风险评价提供科学数据,同时也为稀有鮈鲫在鲤科鱼类分类及进化地位研究提供分子水平重要参考。

  • 标签: 稀有鮈鲫 基因克隆 同源性分析 系统发育树
  • 简介:大蒜感作用研究很广泛,实验采用不同浓度大蒜鳞茎浸提液对芥菜种子萌发、根长、茎长和幼苗鲜重影响,结果表明,经大蒜鳞茎浸提液处理后花叶芥菜种子在不同浓度下呈现不一样形态,其发芽率和发芽指数在不同浓度大蒜鳞茎浸提液影响下随着浓度而变化,在0.02g/mL浓度下,花叶芥菜发芽率为97.8%,为最适宜种子发芽浓度,而对于种子发芽势来说,最适宜浓度则为0.04g/mL,达到了54.8%,浓度为0.02g/mL时平均根长为1.82cm,平均茎长为2.28cm,平均茎重为0.05g,0.03g/mL时平均根重为0.06g.不同浓度大蒜鳞茎浸提液对种子幼苗不同部位促进和抑制作用也不一样.

  • 标签: 大蒜鳞茎浸提液 芥菜 发芽率 发芽势
  • 简介:马克思主义生态思想是马克思主义重要组成部分,马克思主义生态思想中国对对我国生态文明建设具有重要意义.本文通过对马克思主义生态思想中国含义、背景以及要求作简要分析,并就马克思主义生态思想中国生动实践进行系统阐述;从而来加快我国生态文明步伐和加速实现美丽"生态梦".

  • 标签: 马克思主义生态思想 中国化 生态文明建设 实践
  • 简介:为初步探讨硫化镉量子点(CdSQDs)细胞毒性作用机制,采用MTT毒性实验比较了CdSQDs和常规CdS对仓鼠肺细胞(CHL)毒性效应以及细胞内外活性氧水平.结果表明,1)在较低暴露浓度(≤20μg·mL-1)时,CdSQDs细胞毒性显著高于常规CdS,而在较高暴露浓度(〉20μg·mL-1)时,两者相差不大.2)在较低暴露浓度(≤40μg·mL-1)时,添加N-乙酰半胱氨酸(NAC)可显著降低CdSQDs细胞毒性,而在较高暴露浓度(〉40μg·mL-1)时,添加NAC对CdSQDs细胞毒性没有明显影响.添加NAC对常规CdS细胞毒性没有显著影响.综合实验结果推测CdSQDs细胞毒性与暴露剂量有关:在低浓度(〈20μg·mL-1)时,主要是活性氧氧化损伤作用;在中等浓度(20~40μg·mL-1)时,活性氧和Cd2+释放共同作用;在高浓度(〉40μg·mL-1)时,则是Cd2+释放占主导地位.

  • 标签: 硫化镉 量子点 细胞毒性 活性氧
  • 简介:纳米Fe3O4作为一种功能材料,在生物医药、生物靶向材料、微波吸收材料和高梯度磁分离器等方面应用前景广阔,其潜在生物毒性也备受关注。为研究纳米Fe3O4对生物体可能造成氧化损伤,以昆明小鼠为受试体,设置5、10、20和40mg·kg-14个染毒组,腹腔注射染毒7d后,测定小鼠肺组织中活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果显示,随着纳米Fe3O4染毒剂量升高,肺组织ROS和MDA含量逐渐上升,GSH含量逐渐降低,各指标均呈一定剂量-效应关系。剂量≥10mg·kg-1,肺组织ROS含量与对照组相比有显著差异(p〈0.05);剂量≥20mg·kg-1,肺组织MDA含量与对照组相比有显著差异(p〈0.05);剂量≥40mg·kg-1,肺组织GSH含量与对照组相比有显著差异(p〈0.05)。研究表明,较高剂量(≥20mg·kg-1)纳米Fe3O4颗粒材料会引起小鼠肺细胞氧化损伤。

  • 标签: 纳米FE3O4 小鼠 氧化损伤