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  • 简介:摘要目的探讨藤梨根调控乳腺癌细胞凋亡作用及其机制。方法分别采用藤梨根和磷酸盐缓冲液(PBS)处理乳腺癌细胞(MCF-7),分为藤梨根(实验组)组和PBS组(对照组)。噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;蛋白质印迹法(Western blot)法检测两组Wnt-1、β-连环蛋白(β-catenin)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)的表达;流式细胞术检测两组细胞凋亡情况。采用两独立样本t检验。结果藤梨根组A450值(0.532±0.017)小于PBS组A450值(0.978±0.31),差异有统计学意义(t=3.271,P<0.05)。藤梨根升高bax蛋白水平,降低bcl-2蛋白水平,bcl-2表达量(0.486±0.063)低于对照组(0.785±0.098),差异有统计学意义(t=4.445,P<0.05),bax表达量(1.235±0.251)高于对照组(0.426±0.015),差异有统计学意义(t=5.572,P<0.01);藤梨根对乳腺癌MCF-7细胞凋亡具有促进作用,细胞凋亡率适中(占细胞总数的47.86%),高于对照组(8.52%)。藤梨根组Wnt表达量(0.870±0.123)与PBS组(0.561±0.095,t=0.624,P<0.05),β-catenin表达量(1.020±0.348)与PBS组(0.782±0.106),差异有统计学意义(t=0.732,P<0.05)。结论藤梨根抑制MCF-7细胞生长,促进凋亡,可能与降低Wnt/β-catenin信号的功能有关。

  • 标签: 藤梨根 Wnt/β-连环蛋白 乳腺癌 凋亡
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  • 简介:摘要创面愈合是一个缓慢而复杂的生物学过程,包括炎症反应、细胞增殖分化和迁移、血管新生、细胞外基质沉积和组织重塑等。Wnt信号通路可分为经典通路和非经典通路,其中Wnt经典通路又称Wnt/β连环蛋白信号通路,其在细胞分化、迁移和组织稳态维持过程中发挥重要作用。许多炎症因子、生长因子等都参与该通路的上游调控。Wnt/β连环蛋白信号通路的激活在皮肤创面的发生、发展、再生、修复及相关治疗的过程中,起到了重要作用。该文综述了Wnt/β连环蛋白信号通路与创面愈合的关系,并总结了其对炎症反应、细胞增殖、血管新生、毛囊再生和皮肤纤维化等创面愈合重要过程的影响以及Wnt信号通路抑制因子在创面愈合中的作用。

  • 标签: 皮肤 Wnt信号通路 伤口愈合 细胞增殖 β连环蛋白
  • 简介:摘要目的探究姜黄素(CMM)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对脊髓损伤(SCI)小鼠的神经保护作用。方法采用改良Allen’s击打法制备SCI小鼠模型,采用随机数字表将小鼠分为CMM组和生理盐水处理组(Veh组)。术后3 d,小鼠麻醉处死,干湿称重法检测脊髓含水量,氟替啶(HEt)染色检测活性氧(ROS)的积累,酶联免疫吸附试验(ELISA试剂盒)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β的表达,BMS评分评价小鼠的运动功能,原味缺口末端标记法(TUNEL)试剂盒检测损伤部位附近区域的细胞凋亡数量,并通过检测Frizzled,β-catenin以及GSK-3β的蛋白表达探究其作用机制。组间比较采用t检验和单因素方差分析。结果(1)CMM组小鼠脊髓含水量[(79.01±1.12)%]低于Veh组[(81.32±2.10)%],差异有统计学意义(n=6,t=4.316,P<0.05)。(2)CMM组的荧光强度(1 329.83±149.82)明显低于Veh组(1 855.67±131.90),差异有统计学意义(n=6,t=7.200,P<0.05)。(3)CMM组致炎因子IL-1β的表达量(736.17±59.37)低于Veh组(1 117.17±50.14),TNF-α的表达量(795.83±49.07)低于Veh组(1 079.67±58.41),差异有统计学意义(n=6,t=5.340、6.981,P<0.05)。(4)SCI后第7、14、21、28天,CMM组BMS评分(2.50±0.31、3.75±0.45、4.00±0.50、4.50±0.21)高于Veh组(1.00±0.29、2.00±0.26、2.50±0.20、2.75±0.21),差异有统计学意义(n=6,F=6.743,P<0.05)。(5)CMM组细胞凋亡数量[(76.25±10.32)个]明显低于Veh组[(90.32±11.25)个],差异有统计学意义(n=6,t=6.901,P<0.05)。(6)对比Veh组,CMM组的Frizzled(1.24±0.46比1.01±0.02,n=6,t=5.329,P<0.05),β-catenin的蛋白表达量均上调(1.57±0.32比0.99±0.11,n=6,t=4.892,P<0.05),GSK-3β的蛋白表达量下调(0.72±0.31比0.98±0.06,n=6,t=6.210,P<0.05)。结论CMM通过Wnt/β-catenin信号通路对SCI小鼠发挥神经保护作用。

  • 标签: 姜黄素 脊髓损伤 神经保护
  • 简介:摘要随着颧骨降低术的推广,为适应手术时间更短和切口更加微创的需求,手术方式不断发生改变,而手术并发症相继出现,说明对颧骨手术认知不足。针对严重术后并发症,如骨不,暂无详细的诊疗资料参考。从多角度概述颧骨术后骨不诊疗进展,为整形医师提供思路。

  • 标签: 颧骨 整形术 骨不连 诊断 治疗
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  • 简介:摘要随着槽粗糙度要求越来越高,需要使用新型精车刀来达到要求。通过不同槽精车刀杆和刀片的试验结果,研究新型刀具的可行性。

  • 标签: 环槽 复合刀杆 粗糙度 修光刃
  • 简介:摘要随着槽粗糙度要求越来越高,需要使用新型精车刀来达到要求。通过不同槽精车刀杆和刀片的试验结果,研究新型刀具的可行性。

  • 标签: 环槽 复合刀杆 粗糙度 修光刃
  • 简介:摘要目的探讨一种简便、安全、有效的治疗复杂性创伤性文身的方法,评估远期疗效。方法2013年10月至2017年6月,解放军第960医院及连云港市第一人民医院烧伤整形科选择复杂性创伤性文身患者8例,男5例,女3例;年龄18~42岁,平均29岁。在局部肿胀麻醉下经钻钻取皮肤全层创伤性文身,留置创面自然愈合,创面外敷生肌育肤膏保湿促进伤口愈合,多次换药至创面愈合。结果8例患者全部获得成功,未出现术中和术后并发症。1年后随访,均获得满意效果,无明显瘢痕形成。结论切法治疗创伤性文身是一种操作简便、创伤轻微、并发症少、经济安全、效果较好的方法,尤其适合面部复杂创伤性文身,值得临床应用。

  • 标签: 多处创伤 环钻术 创面疗法 创伤性文身 生理性再生修复
  • 简介:摘要目的探讨苦肤康洗剂中抑菌剂的合理加入量。方法以铜绿假单胞菌、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和黑曲霉为试验菌株,依照《中国药典》四部通则1 121抑菌效力检查法,对含不同抑菌剂的苦肤康洗剂进行抑菌效力测定。结果0.1%羟苯乙酯-0.4%苯甲酸钠的组合添加量可使苦康肤洗剂抑菌效力达到《中国药典》2015年版中皮肤给药制剂的相关规定。结论0.1%羟苯乙酯-0.4%苯甲酸钠作为苦康肤洗剂的抑菌剂,安全有效。

  • 标签: 防腐剂,药物 中草药 苦连肤康洗剂 苯甲酸钠 大肠埃希菌 假单胞菌,铜绿 葡萄球菌,金黄色 念珠菌,白色 药物稳定性
  • 简介:摘要目的建立紫油的HPLC指纹图谱和含量测定方法,为紫油的质量控制与评价提供依据。方法采用薄层色谱法对紫油中紫草、黄连、冰片进行定性鉴别;采用HPLC法测定不同批次紫油的指纹图谱,并测定β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁含量。结果薄层色谱法鉴别显示,紫草、黄连、冰片斑点清晰,专属性好;通过HPLC指纹图谱分析,标定了紫油的13个共有峰,并确认了盐酸小檗碱和β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁的特征峰,各批次间的指纹图谱相似度≥0.981;β,β'-二甲基丙烯酰阿卡宁在40.48~202.40 μg范围内线性关系良好。结论本研究建立的薄层色谱鉴别、指纹图谱和含量测定方法简单、可靠,稳定性好,可为紫油的质量控制提供参考。

  • 标签: 色谱法,薄层 高效液相色谱 紫连油 指纹图谱 含量测定(中药)
  • 简介:摘要目的了解长期吸烟的股骨干骨折患者戒烟与否与发生骨不之间的联系。方法回顾性分析近2年在上海市奉贤区中心医院就诊的股骨干骨折患者病例资料。纳入标准为采用髓内钉治疗的男性单侧股骨干骨折、吸烟者的吸烟史≥5年;排除标准为开放性骨折、长期卧床、严重骨质疏松症、合并其他部位骨折、感染性骨不。根据患者吸烟、戒烟情况,将受伤前无吸烟史的患者纳入为非吸烟组、受伤后戒烟的患者纳入为戒烟组、受伤后未戒烟的患者纳入为未戒烟组。记录3组患者达到骨折临床愈合的时间,进行卡方检验,了解3组患者骨不连发生情况的差异;并对骨折达到临床愈合的中位时间用Kaplan-Meier法进行预估及比较。结果非吸烟组有12.5%(4例)、戒烟组有20.4%(11例)、未戒烟组有52.9%(9例)出现骨不,差异具有统计学意义(χ2=10.705,P<0.05),成对比较提示未戒烟组的骨不连发生情况明显高于非吸烟组(χ2=9.315,P<0.0167)、及戒烟组(χ2=6.779,P<0.0167)。3组患者骨折达到骨折临床愈合的中位时间估计值分别为15.1周[95%置信区间(14.9,15.3)周]、22.0周[95%置信区间(21.7,22.4)周]和51.1周,3组患者达到骨折临床愈合时间的差异有统计学意义(P <0.05)。结论长期吸烟的股骨干骨折患者伤后及时戒烟能减少骨不连发生,但骨折临床愈合时间比未吸烟患者稍有延长。

  • 标签: 戒烟 股骨骨折 骨折固定术,髓内 骨折愈合 回顾性研究
  • 简介:摘要目的观察猪脱细胞真皮基质(pADM)在小鼠创面修复过程中对蛋白激酶B(Akt)及β-连环蛋白(β-catenin)表达水平的影响。方法猪皮经脱细胞处理后制成微粒皮,15只C57BL/L小鼠在脊柱左右各制作直径为6 mm的圆形皮肤缺损,左侧以纱布覆盖,常规护理,右侧以pADM覆盖,不作特别处理,按处理方法分为pADM组(实验组)及纱布组(对照组),建模后第1、2、3、4、6周每次取3只小鼠处死,并取创面组织,使用免疫组织化学方法检测Akt及β-catenin在组织中的表达。组间比较采用t检验。结果在模型建立后的第1、2、3、4、6周,实验组各时间点AKT蛋白表达量两两比较差异均有统计学意义(4 022.02±652.42、1 160.12±225.60、3 422.17±675.91、324.15±64.67、27.26±4.49,t1-2=9.458、t2-3=-4.839、t3-4=8.776、t4-6=7.436,P<0.05)。同时对照组蛋白表达在各时间点间有统计学意义(1 110.98±219.14、337.13±61.37、118.80±18.08、834.98±64.19、395.70±76.79,t1-2=8.802、t2-3=4.951、t3-4=-19.584,t4-6=6.835,P<0.05)。第2、3、4、6周时实验组(1 160.12±225.60、3 422.17±675.91、324.15±64.67、27.26±4.49)及对照组(337.13±61.37、118.80±18.08、834.98±64.19、395.70±76.79)的蛋白表达差异有统计学意义(t2=8.574、t3=8.694、t4=-10.183、t6=-7.880,P<0.05),其他组差异无统计学意义(4 022.02±652.42、1 160.12±225.60,t1=-0.363,P>0.05)。实验组各时间点β-catenin蛋白表达量两两比较差异均有统计学意义(3 646.32±687.04、8 447.29±1 181.79、9 488.65±1 439.52、6 158.74±1 083.52,t1-2=-6.626、t3-4=12.101,P<0.05),对照组蛋白表达在各时间点间有统计学意义(4 364.09±811.29、2 187.85±424.84、2 752.27±500.01、7 522.95±1 109.30、2 592.14±474.23,t1-2=-4.334、t3-4=-5.594、t4-6=12.154,P<0.05),实验组(8 447.29±1 181.79、9 488.65±1 439.52)及对照组(2 187.85±424.84、2 752.27±500.01)两组间的β-catenin的蛋白表达在第2、3周时差异有统计学意义(t2=9.351、t3=-9.225,P<0.05),其他组差异无统计学意义(3 646.32±687.04、6 158.74±1 083.52、5 487.60±1 068.96;4 364.09±811.29、7 522.95±1 109.30、2 592.14±474.23,t1=0.377、t4=0.386、t6=0.051,P>0.05)。实验组及对照组两组间的Akt及β-catenin蛋白在创面组织中的表达,均于第2周开始升高,于第3周达高峰,具有相似的变化趋势。结论pADM可能是通过影响Akt/β-catenin信号通路的表达从而影响创面愈合。

  • 标签: 脱细胞真皮基质 蛋白激酶B β-连环蛋白 创面
  • 简介:摘要目的分析肺动脉瓣与主动脉瓣比值(GA比值),探讨GA比值在预测法洛四联症(TOF)患儿根治术中是否需要跨补片的应用价值。方法回顾性分析2016年1月至2017年12月首都医科大学附属北京安贞医院小儿心脏中心诊断TOF并行根治术的355例患儿,其中男182例,女173例。将其分为跨补片组与非跨补片组,收集2组肺动脉瓣和主动脉瓣值,分别计算肺动脉Z-score评分和GA比值,并统计分析。结果156例患儿(43.9%)需要跨补片,199例(56.1%)患儿未行跨补片。跨补片组的GA比值和肺动脉Z-score评分均小于非跨补片组[0.45±0.12比0.54±0.15、(-1.75±0.98)分比(-0.86±1.39)分],差异均有统计学意义(t=5.29、6.32,均P<0.01)。受试者工作特征曲线分析显示,行跨补片患儿肺动脉Z-score评分为-2的曲线下面积(AUC)为0.702(95%CI:0.64~0.76),敏感性为69%,特异性为83%;行跨补片患儿GA比值为0.58的AUC为0.712(95%CI:0.66~0.77),敏感性为70%,特异性为87%。结论GA比值是TOF根治中是否行TAP的简单有效的预测指标,可以在临床工作中应用。

  • 标签: 法洛四联症 跨环补片 肺动脉Z-score评分
  • 简介:摘要目的动态观察重型颅脑损伤(sTBI)急性期大鼠神经功能缺损评分(NSS)、Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路、脑源性神经营养因子(BDNF)与神经生长因子(NGF)的表达规律,探讨活血化瘀方剂的干预作用。方法将126只雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组(生理盐水2 kg/L)、模型组(生理盐水2 kg/L)、脑蛋白水解物组(BP组,5.6 g/kg)、桃红四物汤组(TH组,10.2 g/kg)、血府逐瘀汤组(XF组,15.6 g/kg)、通窍活血汤组(TQ组,9.6 g/kg)、补阳还五汤组(BY组,28.7 g/kg)7组,每组18只。采用改良Feeney自由落体法建立sTBI大鼠模型;对照组不予创伤处理。各组分别于伤后6 h灌胃相应药物,伤后1、3、7 d进行NSS评分;取大鼠海马组织,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Wnt3a和β-catenin的mRNA表达;采用免疫组化法检测BDNF和NGF的阳性表达。结果与对照组比较,模型组大鼠伤后1 d即出现明显的颅脑损伤症状,表现为NSS评分明显升高,Wnt3a和β-catenin的mRNA表达明显上调,BDNF和NGF阳性表达明显增加,说明sTBI大鼠模型制备成功,并随时间延长呈现一定自我修复能力。与模型组相比,XF组、TQ组和BY组NSS评分于伤后1 d即明显下降(分:6.6±1.5、6.1±2.0、5.7±2.4比9.4±1.5,均P<0.05),而BP组及TH组NSS评分于伤后7 d才明显下降,且TQ组和BY组NSS评分下降幅度较其他药物组更加显著。与模型组比较,BP组海马组织Wnt3a和β-catenin的mRNA表达分别于伤后1 d、3 d明显升高,并随时间延长持续升高;4个活血化瘀方剂组Wnt3a和β-catenin的mRNA表达于伤后1~3 d均有不同程度的波动,但均于伤后7 d明显高于模型组,以BY组升高更为显著〔Wnt3a mRNA(2-ΔΔCt):154.7±4.1比17.4±1.0,β-catenin mRNA(2-ΔΔCt):17.05±0.45比2.74±0.13,均P<0.05〕,其次为TQ组〔Wnt3a mRNA(2-ΔΔCt):126.6±2.8比17.4±1.0,β-catenin mRNA(2-ΔΔCt):8.70±1.19比2.74±0.13,均P<0.05〕。与模型组比较,BP组BDNF和NGF的阳性表达在伤后1 d升高,但3 d达峰值后有所下降;4个活血化瘀方剂组BDNF和NGF的阳性表达于伤后1~3 d均有不同程度的波动,但均于伤后7 d明显高于模型组,其中TQ组和BY组在伤后1 d即明显高于模型组〔BDNF阳性细胞(个/MP):56.4±6.2、61.6±7.0比37.4±2.0,NGF阳性细胞(个/MP):58.4±5.0、62.4±4.4比53.4±3.6,均P<0.05〕,且伤后7 d时升高幅度较其他药物组更为显著。结论桃红四物汤、血府逐瘀汤、通窍活血汤和补阳还五汤对sTBI急性期大鼠的神经再生修复均有一定疗效,但作用强度有所不同,以补阳还五汤和通窍活血汤起效更快、效果更好。

  • 标签: 桃红四物汤 血府逐瘀汤 通窍活血汤 补阳还五汤 重型颅脑损伤 Wnt/β-连环蛋白信号通路 神经营养因子
  • 简介:摘要目的探讨电穿孔介导的局部基因治疗对兔下颌骨牵引区新生骨痂中Wnt3a和β -连环蛋白(catenin)表达的影响。方法2019年9—12月,在南京医科大学友谊整形外科医院实验室进行实验,新西兰大白兔48只分为对照组、基因治疗组、生理盐水组,每组16只。3组动物双侧下颌骨截骨后4 d以0.8 mm/d速度行下颌骨牵引,连续牵引7 d进入固定期。对照组只行牵引;基因治疗组在牵引开始时在牵引区局部注射重组质粒pIRES-hBMP2-hVEGF165,并给予电穿孔刺激;生理盐水组在牵引开始时,在牵引区局部注射与基因治疗组相同剂量的生理盐水后,施加电穿孔刺激。3组分别于牵引结束、固定7、14、28 d取牵引区新生骨骨痂行免疫组织化学染色和RT-PCR检查Wnt3a和β-catenin表达。结果免疫组织化学染色显示,Wnt3a和β-catenin主要定位于骨痂组织的成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞胞质和胞核中。免疫组织化学和RT-PCR检查结果显示,Wnt3a和β-catenin表达在牵引结束时达高峰,随着牵引张力的消失,逐渐降低。经基因治疗干预后,Wnt3a和β-catenin基因及蛋白表达显著升高,与对照组和生理盐水组比较,基因治疗组在各时点Wnt3a、β-catenin表达量最高,差异有统计学意义(F=96.3,P<0.01)。结论基因治疗促进牵引区新生骨痂Wnt3a和β-catenin表达,以此调节骨重建系统的平衡,从而促进牵引区新骨生成。

  • 标签: 骨痂 基因治疗 牵引成骨 Wnt3a β-连环蛋白
  • 简介:摘要目的探讨人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)在防治大鼠激素性骨质疏松(GIOP)方面的疗效及其潜在的分子生物学机制。方法采用光学显微镜、流式细胞技术对HUC-MSCs进行表征和鉴定。成骨细胞MC3T3-E1分为对照组、地塞米松(DEX)组、DEX+不同比例HUC-MSCs组。对照组加入正常培养基,DEX组加入10 μmol/L DEX处理,DEX+不同比例HUC-MSCs组加入10 μmol/L DEX处理细胞,然后将HUC-MSCs按照1∶1、10∶1、100∶1的比例在共培养小室中与MC3T3-E1非接触式共培养48 h。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞活力。24只SD大鼠随机分成3组(n=8):对照组、模型组、治疗组(HUC-MSCs组)。模型组使用DEX构建GIOP模型,对照组给予等量磷酸盐缓冲液(PBS),治疗组在构建GIOP模型的同时通过尾静脉注射约106个HUC-MSCs进行治疗。8周后取股骨组织样本,采用苏木精-伊红(HE)染色观察空骨陷窝率,脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色评价细胞凋亡。进行Micro CT扫描,测量骨密度(BMD)、单位组织体积的骨量(Bv/Tv)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)、骨小梁数量(Tb.N)等骨质疏松相关指标。提取组织蛋白后,用蛋白印迹法(Western blot)检测通路蛋白表达。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果流式细胞鉴定结果显示,HUC-MSCs高表达CD44(99.9%)、CD73(98.0%)、CD90(100.0%)、CD105(99.6%)、CD166(99.9%),低表达CD14(0.43%)、CD19(1.11%)、CD34(0.89%)、CD45(1.06%)、HLA-DR(0.38%),符合HUC-MSCs表面特异性抗原表达规律。CCK-8显示,模型组较对照组细胞活力明显下降,与HUC-MSCs共培养后可部分恢复MC3T3-E1活力。HE染色对照组、模型组、HUC-MSCs组空骨陷窝率分别为(2.546±1.049)%、(28.720±1.546)%、(13.600±1.012)%。TUNEL染色结果对照组、模型组、HUC-MSCs组TUNEL阳性细胞的比例分别为(2.334±0.789)%、(24.140±4.646)%、(11.610±2.974)%。Micro CT显示模型组BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N均降低,Tb.Sp增加,HUC-MSCs治疗可以一定程度上逆转上述改变。Western blot结果表明,与对照组比较,模型组β-连环蛋白(β-catenin)、Runt相关基因2(Runx2)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)蛋白表达均明显下降,硬化素(SOST)蛋白表达增加,HUC-MSCs治疗组β-catenin、Runx2、BMP-2表达较模型组增加,SOST表达相应减少。结论HUC-MSCs能够通过Wnt/β-catenin信号通路改善地塞米松所致的骨丢失。

  • 标签: 人脐带间充质干细胞 Wnt/β-连环蛋白信号通路 骨质疏松 β-连环蛋白 骨形态发生蛋白-2