简介：无

简介：摘要目的探讨人偏肺病毒(human metapneumovirus，hMPV)感染后辛伐他汀是否可以抑制病毒复制。方法体外试验，hMPV感染16HBE细胞(人支气管上皮样细胞)后用辛伐他汀试剂处理，qPCR和Western blot检测病毒滴度和自噬的强弱以及相关通路表达水平；体内试验，利用辛伐他汀灌胃处理被hMPV感染的BALB/c小鼠，肺组织切片观察病理情况，提取肺组织蛋白和RNA检测病毒载量的变化、自噬发生情况以及相关通路的表达。结果体外试验，辛伐他汀干预组病毒滴度降低，自噬水平高于病毒组；辛伐他汀干预组AKT/mTOR通路被抑制，使用通路特异性抑制剂雷帕霉素处理后进一步验证了通路的准确性。体内试验，辛伐他汀干预组病毒滴度低于病毒组，但自噬表达水平两组无明显差异，辛伐他汀干预组AKT/mTOR通路下调；HE染色病毒组病理改变明显，辛伐他汀干预后病理情况改善。结论辛伐他汀在人偏肺病毒感染后可以抑制其复制，该过程与AKT/mTOR通路诱导的自噬反应相关。

简介：摘要目的探究沉默信息调节因子1(silencing information regulator 1, SIRT1)通过调控相关下游蛋白进而限制流感病毒感染复制的机制。方法通过CRISPR-Cas9技术构建SIRT1敲除的A549细胞系，用甲型流感病毒感染野生型和SIRT1敲除的A549细胞，24 h后收集细胞进行RNA-Seq测序和基因集富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)，并通过免疫印迹测定两种细胞系中的流感病毒NP蛋白，以及SIRT1相关功能蛋白在流感病毒感染前后的表达水平。结果SIRT1敲除的A549细胞系中流感病毒复制增强。高通量测序共检测到2 671个差异表达基因，其中上调和下调差异表达基因分别为2 012和659个。这些差异表达基因主要参与炎症反应与细胞凋亡、天然免疫抗病毒反应以及细胞因子分泌等信号通路。免疫印迹结果显示相比野生型细胞，干扰素诱导的跨膜蛋白3(IFITM3)和自噬蛋白LC3-II在SIRT1敲除细胞系中都存在表达升高程度的下降。结论SIRT1通过调控下游重要蛋白诸如IFITM3和LC3-II来拮抗流感病毒复制。

简介：摘要目的通过构建非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L，在细胞和小鼠体内分别评价病毒毒力。方法通过同源重组构建非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L，通过病毒的细胞扩散能力和复制能力，以及小鼠呼吸道感染实验和小鼠尾部划痕实验分别评估NTV-C7L的体外和体内毒力。结果经同源重组蓝白斑纯化获得的非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L，通过PCR和Western blot鉴定证明C7L基因正确插入并能表达C7L蛋白；在人胚肺成纤维细胞(MRC-5)和小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/C 3T3)中，NTV-C7L的扩散能力和复制能力比NTV强，但低于VTT；痘苗病毒小鼠滴鼻实验结果表明，106PFU病毒感染后TTV组小鼠体重与NTV及NTV-C7L组相比，体重下降差异具有统计学意义(t＝6.56, P<0.001；t＝5.73, P<0.001)，NTV组与NTV-C7L组相比，体重下降差异无统计学意义(t＝0.597，P＝0.081)；107PFU病毒感染后，NTV组及NTV-C7L组体重下降与TTV组相比，差异具有统计学意义(t＝12.86, P<0.001；t＝10.71, P<0.001)。NTV组与NTV-C7L组相比，体重下降差异具有统计学意义(t＝4.616，P<0.001)。小鼠尾部皮肤划痕实验表明，接种106PFU VTT组小鼠在第5天尾部形成较为明显皮肤红肿、损伤，而107PFU NTV组和NTV-C7L组仅在局部形成红肿，且范围较VTT小，后逐渐结痂愈合。结论非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L在细胞内及小鼠体内毒力较NTV升高，但明显低于VTT，为痘苗病毒载体优化及应用提供了参考数据。

简介：摘要目的研究神经前体细胞表达发育调控样基因4(neural precursor cell-expressed developmentally down-regulated gene 4-like，NEDD4L)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)复制的影响及其可能的分子机制。方法采用Lipofectamine2000分别将靶向NEDD4L的小干扰RNA、NEDD4L的过表达质粒(pcDNA3.1-NEDD4L-HA)、HBV复制质粒(pGEM-HBV1.3)和poly(dAT：dAT)瞬时转染至HepG2细胞，并以可稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测NEDD4L、α干扰素、β干扰素、干扰素刺激基因56(interferon-stimulated gene 56，ISG56)、黏液病毒抗性蛋白A(myxovirus resistance protein A, MxA)、寡腺苷酸合成酶(oligoadenylate synthetase，OAS)等的mRNA水平，以及HBV DNA和3.5 kb HBV RNA的表达水平；采用蛋白质印迹法验证NEDD4L沉默或过表达效果，并检测相关信号分子的蛋白质水平；采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中β干扰素产量。统计学方法采用t检验。结果HepG2.2.15细胞中的NEDD4L mRNA和蛋白质水平分别为10.53±0.47和4.17±0.43，分别高于HepG2细胞中的1.00±0.05和1.26±0.25，差异均有统计学意义(t＝3.27，P＝0.008；t＝1.68，P＝0.030)。在敲减NEDD4L基因表达的细胞中，上清液HBV DNA表达水平为0.32±0.09，低于对照组的1.00±0.05，差异有统计学意义(t＝－0.93，P＝0.020)；3.5 kb HBV RNA表达水平为0.49±0.11，低于对照组的1.00±0.05，差异有统计学意义(t＝－0.68，P＝0.040)。与对照组相比，NEDD4L敲减组的β干扰素、ISG56、MxA和OAS的mRNA相对表达水平均上升，差异均有统计学意义(t＝4.66、9.38、7.29、7.01，均P<0.01)。NEDD4L敲减组β干扰素含量在poly(dAT：dAT)处理和水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus，VSV)刺激时分别为(776.41±115.49) ng/L和(961.21±130.19) ng/L，分别高于对照组的(320.15±56.05) ng/L和(440.17±67.82) ng/L，差异均有统计学意义(t＝2.43，P＝0.020；t＝2.85，P＝0.030)；NEDD4L过表达组β干扰素含量在poly(dAT：dAT)处理和VSV刺激时分别为(156.18±26.47) ng/L和(176.67±34.51) ng/L，分别低于对照组的(320.38±49.39) ng/L和(440.59±68.83) ng/L，差异均有统计学意义(t＝－2.03，P＝0.040；t＝－1.93，P＝0.030)。HBV复制下调了β干扰素上游黑色素瘤分化相关蛋白5(melanoma differentiation-associated protein 5，MDA5)的蛋白质水平，而该下调作用在敲减NEDD4L的细胞中并不明显。结论HBV复制能通过促进细胞NEDD4L的表达，下调MDA5而抑制β干扰素的产生，进而辅助HBV的固有免疫逃逸。

简介：摘要报告偏倚是影响系统综述真实性和可靠性的主要威胁。本文总结了获取临床研究报告和其他监管文件（监管数据）来应对报告偏倚的基本原理，以及有助于决定是否将监管数据纳入系统综述的决定因素。同时介绍了监管数据获取的来源和现状，并针对当前系统综述的作者在考虑将监管数据纳入系统综述时的做法进行的调查进行了总结。本文没有解决如何获得和提取监管数据的问题。应鼓励像Cochrane这样的组织机构和利益相关者使用临床研究报告中的数据作为药品干预评价的重要数据来源，尤其是干预措施非常重要，且报告偏倚发生风险较大时。

简介：摘要目的评价六西格玛理论提升护理文件书写质量的效果。方法采用历史比较法，按年份进行整群抽样，以2018年1—12月病历为对照组，共1 833份；以2019年1—12月病历为观察组，共1 758份。对照组根据病区培训计划常规落实护理文件书写规范的培训，每班护士进行本班次护理文件书写的完成和自查，护士长随机抽查和负责终末病历的质量把关。观察组应用六西格玛管理理论改进提升实施流程，确定护理文件书写质量改善目标，制订科学可靠的改进方案，追踪实施效果和评价。收集2018年和2019年每月护理文件书写的质控得分、病历错误数量等数据信息，比较两组的错误率和质控成绩。结果观察组每月度每份病历护理文件书写平均错误数低于对照组，护理文件书写质控成绩高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论在护理文件书写质量管理中，应用六西格玛管理理论能够降低护理文件书写错误率，改善提升护理文件书写质量。

简介：摘要目的归纳和分析癌症疼痛护理文件书写中存在的问题并提出相应对策，以期提高疼痛护理文件书写的质量。方法采用便利抽样法，选取2019年7—9月北京大学肿瘤医院内科出院的150份恶性肿瘤伴慢性癌痛患者的终末病历，应用"癌症疼痛护理记录质量评价标准"对疼痛相关护理文件的书写质量进行评价。采用百分数表示不同得分的病历比例以及各条目书写的正确率。结果癌痛护理文件书写质量评价满分的病历占8.67%（13/150），90～99分占34%（51/150），80～89分占36%（54/150），70～79分占14.67%（22/150），<70分占6.67%（10/150）。癌痛护理文件书写正确率较低的条目依次是入院患者进行全面疼痛评估（32%，48/150）、药物不良反应预防及观察的护理指导（70%，105/150）、疼痛控制平稳（NRS≤3分）的患者至少每2周进行1次全面疼痛评估（72%，108/150）。结论癌痛护理文件书写的质量可反映疼痛护理工作的落实情况及护理质量，目前临床癌痛护理文件中仍存在较多问题，提示管理者应在制度完善、护士培训、质量督导及信息支持等方面采取有针对性的措施以提高癌痛护理文件书写的质量，促进护士在癌痛全程管理中更好地发挥专业作用。

简介：摘要目的建立并应用智能化护理体系文件管理系统,为临床护士提供床旁指导，规范临床护理服务。方法建立智能化护理体系文件管理系统，并在临床成功应用，其功能包括上传管理、智能检索、跨专科共享、多终端查阅、阅读痕迹管理、个体化文件修订提醒及文件效期管理等。收集人工管理纸质版体系文件和智能化系统管理电子体系文件时文件管理耗时、文件检索时间、文件管理中问题发生率的情况，评价智能化护理体系文件管理系统的应用效果。结果文件管理员领取、回收文件年均耗时原来为（492.68 ± 14.04）min与（195.43 ± 8.12）min，系统建立后可直接在电脑上做文件更新和作废处理，彻底节省了领取与回收的时间；检索目标文件耗时由原来的（82.72 ± 7.47）s下降至（44.75 ± 5.28）s，差异有统计学意义（t值为34.242，P<0.01）；病区文件缺失平均发生率为2.78%，版本不一致平均发生率为5.56%，系统上线后，文件统一管理、同步更新，杜绝文件缺失及版本不一致的情况；不再需要打印纸质文件，显著降低耗材成本。结论通过智能化护理体系文件管理系统的建立及应用，合理优化文件管理流程，有效提高文件使用的准确性与便捷性，降低文件管理的人力与耗材成本，提高文件管理的效率与质量。

简介：摘要目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV-DNA和前S1抗原(Pre S1-Ag)与HBV复制的相关性。方法收集2017年3月至2019年3月在北京友谊医院就诊的650例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清标本，采用ELISA法检测HBV-LP和Pre S1-Ag；化学发光微粒子免疫分析(CMIA)法检测HBV血清标志物(HBV-M)；实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测HBV-DNA。回顾性分析比较HBV-DNA、HBV-LP、Pre S1-Ag阳性率以及HBV-LP(S/CO值)、乙肝表面抗原(HBsAg，log10 IU/ml)与HBV-DNA(log10 IU/ml)的相关性。结果650例CHB患者HBV-DNA、HBV-LP和Pre S1-Ag的阳性率分别为65.4%(425/650)、79.2%(515/650)和43.1%(280/650)(P<0.01)。243例HBeAg阳性患者中HBV-DNA和HBV-LP的阳性率是93.0%(226/243)和94.6%(230/243)，差异无统计学意义(P＝0.45)；407例HBeAg阴性患者的两项指标阳性率分别为48.9%(199/407)和70.0%(285/407)(P<0.01)。HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA、HBV-LP的阳性率分别为92.8%(206/222)和94.1%(209/222)，差异无统计学意义(P＝0.56)；HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组两项指标阳性率分别为45.4%(124/273)和69.9%(191/273)(P<0.01)。425例HBV-DNA阳性和225例HBV-DNA阴性CHB患者中，HBeAg阳性率均显著低于HBV-LP阳性率，差异有统计学意义(P<0.01)。随着HBV-DNA载量的增高，HBV-LP的S/CO值以及阳性率均呈显著上升趋势(P<0.05)。结论与Pre S1-Ag、HBeAg和HBsAg相比较，HBV-LP与HBV-DNA载量的相关性良好，与HBV-M联合检测可灵敏反映病毒复制状态。

简介：摘要目的探究甲基转移酶样蛋白3(methyltransferase like 3，METTL3)和去甲基化酶肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein，FTO)在H7N9病毒感染中发挥的作用及可能的分子机制。方法利用Western blot(WB)检测H7N9病毒感染A549细胞后METTL3和FTO的表达。敲低和过表达METTL3和FTO，H7N9病毒感染后用WB和TCID50检测其对病毒复制的影响。利用转录组测序方法对METTL3或FTO敲低及野生型对照细胞进行了转录组水平基因差异表达分析，对发挥作用的潜在靶标进行初步分析。结果H7N9病毒感染A549细胞24 h后METTL3的表达上调，FTO无明显变化。敲低METTL3和FTO后，病毒核蛋白(nucleoprotein, NP)表达水平和病毒滴度显著下降，过表达METTL3和FTO后，病毒滴度显著增加。转录组测序结果显示在METTL3或FTO敲低组与对照组之间分别发现314和555个差异表达基因，GO功能富集分析和KEGG通路富集分析结果表明这些基因与宿主免疫应答相关。结论METTL3和FTO可能通过调节宿主-病毒相互作用在H7N9病毒感染中起关键作用。