简介：摘要首先G文件就是GAAF文件的缩写，是指高空全月探测数据文件，我区于2011年开始对我区5站高空资料形成G文件格式，并进行格式检查及质量检查。

简介：摘要目的对非复制型痘苗病毒NTV感染人源细胞后的细胞形态变化及相关分子机制进行研究，为NTV载体的进一步优化改造和应用提供科学依据。方法用复制型痘苗病毒天坛株VTT和非复制型痘苗病毒NTV感染HeLa细胞，观察细胞的形态学变化。然后收获细胞，电泳检测rRNA断裂水平和Western blot检测凋亡相关分子信号，初步确定NTV诱导的早期细胞凋亡的通路与机制。结果在细胞形态学方面观察到被NTV感染的细胞，与VTT相比，能够在较早时间出现细胞变圆、皱缩等病变现象。DAPI染色观察到被NTV感染的细胞核在早期会出现染色质高度凝聚、边缘化的现象并随着时间的增加而崩解。rRNA断裂水平检测结果说明被NTV感染16 h后的rRNA已发生断裂和降解。Western blot检测结果说明在NTV感染HeLa细胞中能够检测到比正常细胞中更强的PARP、caspase-3及caspasee-9的分子信号，但caspasee-8并没有明显增加，而VTT的结果则与NTV相反。结论NTV在早期能够诱导细胞凋亡，为痘苗病毒载体改造提供理论依据。

简介：摘要目的阐释miR-340-5p对HBV复制的影响及其调控机制，并为HBV感染后的生物标志物和治疗用药提供新的策略。方法在肝癌细胞HepG2.2.15中转染miR-340-5p的模拟物(340-mimic)和抑制剂(340-inhibitor)及其对应的阴性对照。通过ELISA检测上清中HBeAg和HBsAg的水平变化。同时收取细胞，提取RNA和壳体化DNA，并采用qRT-PCR分别检测HBV总RNA和pgRNA的水平及HBV DNA拷贝数的变化；分子克隆构建STAT3的过表达质粒pEF-flag-stat3，通过qRT-PCR和western blot对STAT3的mRNA和蛋白表达加以验证；此外，共转染miR-340-5p的模拟物和pEF-flag-stat3后通过northern blot，qPCR和ELISA对HBV的复制情况进行检测。结果miR-340-5p过表达后，HBV转录生成总RNA和逆转录模板pgRNA的水平明显下降至对照组的45.89%、61.46% (P＝0.001、P＝0.003)；壳体化DNA的合成及HBeAg和HBsAg的分泌水平分别受到72.46%、18.27%、14.42%的抑制( P<0. 001、P<0. 001、P＝0.005)；干扰内源性miR-340-5p则与对照组相比分别增加44.02%、45.56%、22.66%、11.85%、14.04%(P＝0. 009、P＝0. 01、P＝0. 011、P＝0.013、P＝0.027)。相比之下在此基础上过表达信号转导和转录激活因子(STAT)3能够减弱被miR-340-5p抑制的HBV复制。进一步的实验结果也表明STAT3对HBV的复制有促进作用。结论miR-340-5p能够通过靶向作用于STAT3抑制其转录和翻译进而抑制HBV的复制。

简介：无

简介：摘要目的探讨人偏肺病毒(human metapneumovirus，hMPV)感染后辛伐他汀是否可以抑制病毒复制。方法体外试验，hMPV感染16HBE细胞(人支气管上皮样细胞)后用辛伐他汀试剂处理，qPCR和Western blot检测病毒滴度和自噬的强弱以及相关通路表达水平；体内试验，利用辛伐他汀灌胃处理被hMPV感染的BALB/c小鼠，肺组织切片观察病理情况，提取肺组织蛋白和RNA检测病毒载量的变化、自噬发生情况以及相关通路的表达。结果体外试验，辛伐他汀干预组病毒滴度降低，自噬水平高于病毒组；辛伐他汀干预组AKT/mTOR通路被抑制，使用通路特异性抑制剂雷帕霉素处理后进一步验证了通路的准确性。体内试验，辛伐他汀干预组病毒滴度低于病毒组，但自噬表达水平两组无明显差异，辛伐他汀干预组AKT/mTOR通路下调；HE染色病毒组病理改变明显，辛伐他汀干预后病理情况改善。结论辛伐他汀在人偏肺病毒感染后可以抑制其复制，该过程与AKT/mTOR通路诱导的自噬反应相关。

简介：摘要近些年来，随着我国观测工作逐渐朝着自动化观测的转变，在增强气象观测数据时效性和准确性的同时，也对气象观测的整体效率和质量提出了更高的要求。由于地面气象观测工作中受到多方面因素的共同作用，很容易影响地面观测数据文件质量。基于此，本文结合哈密市十三间房气象站开展地面测报工作的实际，在分析影响地面观测数据文件质量因素的同时，重点给出了几点提升地面观测数据文件质量对策，仅供相关部门进行参考。

简介：摘要目的建立复制型慢病毒(replication competent lentivirus, RCL) VSV-G qPCR检测方法，并进行方法学性能验证及初步应用。方法以慢病毒载体包膜VSV-G基因为目标序列，建立荧光定量PCR检测方法，并对方法的专属性、线性、扩增效率、精密度、准确度、线性范围、检测限、定量限及耐用性进行验证。利用所建立的方法进行CAR-T细胞、慢病毒载体生产终末细胞及慢病毒载体收获液样品的初步应用性研究。结果建立的VSV-G荧光定量PCR法，专属性较好，对293T细胞、PBMC细胞及C8166细胞均无特异性扩增，线性范围为1×102拷贝/test～1×109拷贝/test，R2能够达到0.998以上，扩增效率在93%～98%之间，精密度RSD<12%，准确度回收率为85%～106%，最低检出限和最低定量限分别为5拷贝/test和40拷贝/test。另外，该方法的耐用性较好。各项验证结果均表明该方法能够满足检测的要求。利用该方法对54批样品(包括CAR-T细胞、慢病毒载体及载体生产终末细胞)进行RCL C8166细胞培养法的终点检测，结果显示54批样品均为阴性。结论成功建立了VSV-G实时荧光定量PCR法，各项验证参数均可满足检测要求，该方法的应用将进一步提高慢病毒载体相关产品的安全性。

简介：摘要目的探究沉默信息调节因子1(silencing information regulator 1, SIRT1)通过调控相关下游蛋白进而限制流感病毒感染复制的机制。方法通过CRISPR-Cas9技术构建SIRT1敲除的A549细胞系，用甲型流感病毒感染野生型和SIRT1敲除的A549细胞，24 h后收集细胞进行RNA-Seq测序和基因集富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)，并通过免疫印迹测定两种细胞系中的流感病毒NP蛋白，以及SIRT1相关功能蛋白在流感病毒感染前后的表达水平。结果SIRT1敲除的A549细胞系中流感病毒复制增强。高通量测序共检测到2 671个差异表达基因，其中上调和下调差异表达基因分别为2 012和659个。这些差异表达基因主要参与炎症反应与细胞凋亡、天然免疫抗病毒反应以及细胞因子分泌等信号通路。免疫印迹结果显示相比野生型细胞，干扰素诱导的跨膜蛋白3(IFITM3)和自噬蛋白LC3-II在SIRT1敲除细胞系中都存在表达升高程度的下降。结论SIRT1通过调控下游重要蛋白诸如IFITM3和LC3-II来拮抗流感病毒复制。

简介：摘要随着地面气象观测自动化水平的增强，地面气象观测数据文件的审核重点逐渐转化为观测项目的合理性及数据质量控制分析。基于此，本文重点对地面气象观测数据文件审核进行分析，以期增强地面测报质量。

简介：摘要随着科学技术水平的快速发展，我国的地面气象探测自动化程度不断加深，计算机数据处理技术的发展，使得地面气象观测数据文件的程序化、信息化和自动化特征越发突出。数据审核的重点开始朝着目测项目的合理性以及数据质量分析和控制方向发展。本文主要论述地面测报资料数据文件审核技巧，以期为提高我国地面气象观测数据文件质量提供参考借鉴。

简介：摘要目前，火电项目工程文档管理普遍存在竣工文件组卷与工程建设不同步、无法及时完成竣工文件归档移交的现状，主要原因在于大多数项目采取将过程中产生的文件按照文种进行保管，待工程结束后才按照归档要求，大批量进行文件归档工作，这导致了文件的过程管理与文件归档工作的严重脱节，无法及时完成竣工文件归档移交现象。

简介：摘要目的研究miR-125b-1-3p在轮状病毒(rotavirus)复制过程中的作用和调控机制。方法将MA104细胞中的miR-125b-1-3p分别上调和下调后感染轮状病毒，通过RT-PCR分析miR-125b-1-3p的表达情况和轮状病毒拷贝数；免疫荧光分析miR-125b-1-3p对轮状病毒蛋白表达情况的影响；Western blot分析miR-125b-1-3p参与调控的相关蛋白表达情况。结果轮状病毒感染细胞后，miR-125b-1-3p的表达水平明显上调，上调miR-125b-1-3p后，轮状病毒的VP7、NSP3基因拷贝数下降，下调miR-125b-1-3p后，轮状病毒的VP7、NSP3基因拷贝数明显升高；上调miR-125b-1-3p的表达水平后轮状病毒蛋白荧光数下降，下调miR-125b-1-3p后，病毒蛋白荧光数增加；轮状病毒感染细胞16 h后PI3K/Akt通路活性受到抑制，上调miR-125b-1-3p能够抑制PI3K/Akt通路的活化。结论miR-125b-1-3p通过调控PI3K/Akt通路抑制轮状病毒的复制。研究结果为探讨miR-125b-1-3p和PI3K/Akt通路之间的具体调控机制研究提供了实验基础，为轮状病毒抗感染治疗提供了靶点。

简介：摘要乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是我国面临的重大公共卫生问题。尽管过去30年人们对HBV及HBV感染相关性肝细胞癌已有了相当深入的认识，但仍有大量关于HBV生命周期和病毒发病机制的问题亟待解决。由于缺乏HBV感染背景下可广泛使用的模式动物模型，所以制约了HBV研究的快速发展。本研究全面梳理了现有HBV小鼠模型在病毒学特征和致病性方面的不同侧重点。以HBV关键病毒学行为如病毒复制、共价闭合环状DNA的形成和持续性感染为关键词，建立不同处理手段与模型特征之间的相关性，从而便于选择正确模型开展针对性的研究，并基于此筛查有效治疗方案。

简介：摘要目的通过构建非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L，在细胞和小鼠体内分别评价病毒毒力。方法通过同源重组构建非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L，通过病毒的细胞扩散能力和复制能力，以及小鼠呼吸道感染实验和小鼠尾部划痕实验分别评估NTV-C7L的体外和体内毒力。结果经同源重组蓝白斑纯化获得的非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L，通过PCR和Western blot鉴定证明C7L基因正确插入并能表达C7L蛋白；在人胚肺成纤维细胞(MRC-5)和小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/C 3T3)中，NTV-C7L的扩散能力和复制能力比NTV强，但低于VTT；痘苗病毒小鼠滴鼻实验结果表明，106PFU病毒感染后TTV组小鼠体重与NTV及NTV-C7L组相比，体重下降差异具有统计学意义(t＝6.56, P<0.001；t＝5.73, P<0.001)，NTV组与NTV-C7L组相比，体重下降差异无统计学意义(t＝0.597，P＝0.081)；107PFU病毒感染后，NTV组及NTV-C7L组体重下降与TTV组相比，差异具有统计学意义(t＝12.86, P<0.001；t＝10.71, P<0.001)。NTV组与NTV-C7L组相比，体重下降差异具有统计学意义(t＝4.616，P<0.001)。小鼠尾部皮肤划痕实验表明，接种106PFU VTT组小鼠在第5天尾部形成较为明显皮肤红肿、损伤，而107PFU NTV组和NTV-C7L组仅在局部形成红肿，且范围较VTT小，后逐渐结痂愈合。结论非复制型痘苗病毒修饰株NTV-C7L在细胞内及小鼠体内毒力较NTV升高，但明显低于VTT，为痘苗病毒载体优化及应用提供了参考数据。

简介：在现今有源RFID技术不断发展成熟的过程当中，其所具有的功能也具有了较为复杂的特点。在本文中，将就有源RFID标签安全文件系统的设计进行一定的研究。

简介：

简介：摘要目的检测复制因子C4（RFC4）在胰腺导管腺癌组织中的表达情况，初步探究RFC4与胰腺导管腺癌的临床预后关系。探讨RFC4作为胰腺导管腺癌潜在的生物标志物的可能性。方法通过生物信息学的方法分析RFC4在胰腺导管腺癌组织及癌旁正常组织中的mRNA水平，并分析其表达与胰腺导管腺癌患者的生存率间的关系。回顾性分析76例接受手术治疗的胰腺导管腺癌患者的临床病理资料。采用免疫组化法检测胰腺导管腺癌组织和癌旁正常组织中的RFC4蛋白的表达水平，分析其与胰腺导管腺癌患者临床病理特征的关系。结果生物信息学分析结果显示，RFC4的mRNA在胰腺导管腺癌组织中显著高表达，并与患者总生存率（P=0.046）与无病生存率（P=0.042）显著相关。免疫组化结果表明，RFC4在胰腺导管腺癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织。RFC4在胰腺导管腺癌组织中的高表达与肿瘤大小相关（P=0.043），而与年龄、性别、肿瘤分级的相关性无统计学意义（均P>0.05）。结论胰腺导管腺癌组织中RFC4呈显著高表达并提示不良预后，且其表达水平与胰腺导管腺癌患者肿瘤大小有关。RFC4可能作为胰腺导管腺癌潜在的预后预测因子。

简介：摘要目的研究神经前体细胞表达发育调控样基因4(neural precursor cell-expressed developmentally down-regulated gene 4-like，NEDD4L)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)复制的影响及其可能的分子机制。方法采用Lipofectamine2000分别将靶向NEDD4L的小干扰RNA、NEDD4L的过表达质粒(pcDNA3.1-NEDD4L-HA)、HBV复制质粒(pGEM-HBV1.3)和poly(dAT：dAT)瞬时转染至HepG2细胞，并以可稳定表达HBV的HepG2.2.15细胞为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测NEDD4L、α干扰素、β干扰素、干扰素刺激基因56(interferon-stimulated gene 56，ISG56)、黏液病毒抗性蛋白A(myxovirus resistance protein A, MxA)、寡腺苷酸合成酶(oligoadenylate synthetase，OAS)等的mRNA水平，以及HBV DNA和3.5 kb HBV RNA的表达水平；采用蛋白质印迹法验证NEDD4L沉默或过表达效果，并检测相关信号分子的蛋白质水平；采用酶联免疫吸附测定法检测细胞上清液中β干扰素产量。统计学方法采用t检验。结果HepG2.2.15细胞中的NEDD4L mRNA和蛋白质水平分别为10.53±0.47和4.17±0.43，分别高于HepG2细胞中的1.00±0.05和1.26±0.25，差异均有统计学意义(t＝3.27，P＝0.008；t＝1.68，P＝0.030)。在敲减NEDD4L基因表达的细胞中，上清液HBV DNA表达水平为0.32±0.09，低于对照组的1.00±0.05，差异有统计学意义(t＝－0.93，P＝0.020)；3.5 kb HBV RNA表达水平为0.49±0.11，低于对照组的1.00±0.05，差异有统计学意义(t＝－0.68，P＝0.040)。与对照组相比，NEDD4L敲减组的β干扰素、ISG56、MxA和OAS的mRNA相对表达水平均上升，差异均有统计学意义(t＝4.66、9.38、7.29、7.01，均P<0.01)。NEDD4L敲减组β干扰素含量在poly(dAT：dAT)处理和水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus，VSV)刺激时分别为(776.41±115.49) ng/L和(961.21±130.19) ng/L，分别高于对照组的(320.15±56.05) ng/L和(440.17±67.82) ng/L，差异均有统计学意义(t＝2.43，P＝0.020；t＝2.85，P＝0.030)；NEDD4L过表达组β干扰素含量在poly(dAT：dAT)处理和VSV刺激时分别为(156.18±26.47) ng/L和(176.67±34.51) ng/L，分别低于对照组的(320.38±49.39) ng/L和(440.59±68.83) ng/L，差异均有统计学意义(t＝－2.03，P＝0.040；t＝－1.93，P＝0.030)。HBV复制下调了β干扰素上游黑色素瘤分化相关蛋白5(melanoma differentiation-associated protein 5，MDA5)的蛋白质水平，而该下调作用在敲减NEDD4L的细胞中并不明显。结论HBV复制能通过促进细胞NEDD4L的表达，下调MDA5而抑制β干扰素的产生，进而辅助HBV的固有免疫逃逸。

简介：摘要报告偏倚是影响系统综述真实性和可靠性的主要威胁。本文总结了获取临床研究报告和其他监管文件（监管数据）来应对报告偏倚的基本原理，以及有助于决定是否将监管数据纳入系统综述的决定因素。同时介绍了监管数据获取的来源和现状，并针对当前系统综述的作者在考虑将监管数据纳入系统综述时的做法进行的调查进行了总结。本文没有解决如何获得和提取监管数据的问题。应鼓励像Cochrane这样的组织机构和利益相关者使用临床研究报告中的数据作为药品干预评价的重要数据来源，尤其是干预措施非常重要，且报告偏倚发生风险较大时。

简介：摘要目的评价六西格玛理论提升护理文件书写质量的效果。方法采用历史比较法，按年份进行整群抽样，以2018年1—12月病历为对照组，共1 833份；以2019年1—12月病历为观察组，共1 758份。对照组根据病区培训计划常规落实护理文件书写规范的培训，每班护士进行本班次护理文件书写的完成和自查，护士长随机抽查和负责终末病历的质量把关。观察组应用六西格玛管理理论改进提升实施流程，确定护理文件书写质量改善目标，制订科学可靠的改进方案，追踪实施效果和评价。收集2018年和2019年每月护理文件书写的质控得分、病历错误数量等数据信息，比较两组的错误率和质控成绩。结果观察组每月度每份病历护理文件书写平均错误数低于对照组，护理文件书写质控成绩高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论在护理文件书写质量管理中，应用六西格玛管理理论能够降低护理文件书写错误率，改善提升护理文件书写质量。