简介：摘要成骨细胞是主要发挥骨形成功能的细胞，在骨重建中发挥重要作用。细胞骨架广泛存在于真核细胞中，不仅在维持细胞形态及细胞内部结构有序性中至关重要，还可参与机械信号转导，调控细胞分化、增殖、凋亡、迁移和相关基因的表达。研究成骨细胞细胞骨架的功能，可为口腔领域中如引导骨再生技术、正畸牙移动、牵张成骨及术后骨愈合等方面提供新的思路。本文就成骨细胞细胞骨架的相关研究进展进行综述。

简介：摘要足细胞位于肾小球基底膜外侧，其足突对维持正常肾小球滤过屏障的结构和功能起重要作用。足细胞细胞骨架包括中间丝、微管以及肌动蛋白。足细胞的肌动蛋白骨架紊乱在多种肾脏疾病中被广泛报道。本文就足细胞骨架蛋白的分类、功能、足细胞骨架调控通路及其潜在治疗靶点的研究进展进行综述。

简介：摘要目的探讨周期性机械牵张应力作用下，人软骨细胞中新型机械激活离子通道压力蛋白(Piezo1)与细胞骨架的关系。方法体外培养骨关节炎病人软骨细胞，然后利用多通道细胞牵张应力加载系统处理细胞，根据预实验结果分成无牵张应力组(空白组)，2 h牵张应力组，12 h牵张应力组，24 h牵张应力组，48 h牵张应力组和相应的抑制剂浓度为0.275 mmol/L的蜘蛛毒液肽(GsMTx4)组以及浓度为0.573 mmol/L细胞松弛素D组。免疫组化鉴定软骨细胞，荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测不同力学条件刺激下各组细胞的Piezo1的表达量。以及细胞松弛素D作用下Piezo1的表达量。免疫荧光定位人软骨细胞Piezo1蛋白的表达，激光共聚焦显微镜观察各组细胞的细胞骨架以及Piezo1蛋白共染相关性。RT-q PCR结果比较采用单因素方差分析，两两组间比较采用q检验。结果RT-q PCR检测结果显示，2 h牵张应力组比空白组Piezo1的表达量有所增加，但差异无统计学意义(P>0.05)。12 h牵张应力组比空白组相比有统计学意义(F＝9.785，P<0.05)。24 h牵张应力组表达量最多，48 h牵张应力组表达量有所降低。经GsMTx4处理后的各组Piezo1的表达量均出现明显降低(F＝13.907，P<0.001)。在牵张应力作用下，2 h牵张应力组至24 h牵张应力组细胞骨架呈渐进性增粗、浓集现象，但是48 h牵张应力组软骨细胞却出现了细胞骨架的松散与降解。相应的RT-qPCR结果显示Piezo1 mRNA表达量与细胞骨架的浓集与松散情况具有相同的趋势。GsMTx4处理后的各加力组表达均下降。结论机械敏感性离子通道Piezo1的开放和关闭是与细胞骨架微丝F-actin肌动蛋白密切相关，由细胞骨架F-actin形变激活Piezo1蛋白通道，并与力学加载呈时间依赖性。

简介：摘要目的通过高加速度离心加载装置建立高重力加载模型，探讨不同高重力加载环境对成骨细胞黏附及细胞骨架的影响，并且分析淫羊藿苷对高重力加载后细胞黏附和细胞骨架的影响。方法将MC3T3-E1细胞按2×105个/cm2的密度接种于细胞培养皿中。实验共分为6组：对照组、单纯给药组、10 G加载组、10 G给药组、40 G加载组、40 G给药组。加载组应用高加速度离心加载机对细胞施行加载，连续加载3 d，每天30 min。对照组和单纯给药组暴露于正常重力情况下，其余条件与实验组无差别。给药组淫羊藿苷均采用10-7 mol/L浓度，且按预防给药的方法实验。通过茜素红染色、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性测定、CCK-8细胞增殖实验、细胞骨架鬼笔环肽染色、qPCR和Western Blot等相关分子生物学技术检测淫羊藿苷对高重力环境下成骨细胞integrin α5、integrin β1和F-actin的影响。结果所有模型均成功制备。茜素红染色：淫羊藿苷可促进成骨细胞钙化结节形成，10 G加载可促进成骨细胞矿化，而40 G加载则抑制成骨细胞的矿化。ALP活性检测：单纯给药组、10 G加载组、40 G加载组的检测OD值分别为0.246、0.331、0.163，与对照组的0.207相比，差异均有统计学意义（P<0.05）；10 G给药组和40 G给药组分别为0.373和0.180，与各自加载组的差异有统计学意义（P<0.05）。CCK-8增殖实验：单纯给药组OD值为0.650，与对照组0.551的差异有统计学意义（P=0.031）；10 G加载组和40 G加载组OD值分别为1.193和0.245，与对照组的差异均有统计学意义（P<0.05）；且10 G给药组和40 G给药组1.300和0.310，与各自加载组的差异有统计学意义（P<0.05）。鬼笔环肽染色：10 G加载细胞促进的数量增加，但细胞形态及骨架未见明显变化，40 G加载则抑制，淫羊藿苷对细胞形态无影响，但对加载损伤后的细胞有一定修复作用。QPCR和Western Blot实验结果一致证实，淫羊藿苷作用后，integrin α5、integrin β1和F-actin的mRNA和蛋白表达上调，10 G加载可促进integrin α5、integrin β1和F-actin mRNA和蛋白的表达，40 G加载则明显抑制其mRNA和蛋白的表达。结论10 G条件和淫羊藿苷干预均可促进成骨细胞的生长发育、细胞黏附及细胞骨架的稳定，而40 G则具有明显抑制作用。

简介：摘要目的探讨脑源性微囊泡(BDMVs)对脐静脉内皮细胞骨架的影响。方法体外制备BDMVs，并予透射电镜观察及粒径检测。将PKH26荧光染料标记的BDMVs与脐静脉内皮细胞共培养0.5 h、1 h、2 h后，应用流式细胞术检测不同时间点的脐静脉内皮细胞吞噬BDMVs情况。将体外常规培养的脐静脉内皮细胞分为对照组、BDMVs组(加入终浓度1.5×107/mL的BDMVs处理细胞)及尼莫地平组[予2 μg尼莫地平(0.2 mg/mL)预处理10 min后加入终浓度1.5×107/mL的BDMVs处理细胞]，应用激光共聚焦显微镜观察罗丹明标记鬼笔环肽染色后各组脐静脉内皮细胞中纤维型肌动蛋白的荧光强度及应力纤维数目。结果透射电镜下可见体外制备的BDMVs具有完整的膜结构，粒径范围为100~1000 nm。流式细胞术检测显示，吞噬BDMVs的脐静脉内皮细胞比例随培养时间的延长呈时间依赖性升高(0.5 h：22.7%±1.2%；1 h：52.3%±1.3%；2 h：71.6%±1.9%)，各时间点间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦显微镜观察显示，与对照组相比，BDMVs组中纤维型肌动蛋白的荧光强度明显升高且应力纤维数目明显增多增粗；而与BDMVs组相比，尼莫地平组中纤维型肌动蛋白的荧光强度明显降低且应力纤维数目明显减少变细。结论脐静脉内皮细胞吞噬BDMVs的作用随时间延长而增强，且吞噬BDMVs后可导致细胞骨架重构，而尼莫地平可部分阻断该作用。

简介：摘要糖尿病是一种慢性代谢性疾病，其发病率在世界范围内呈上升趋势。糖尿病足溃疡（DFU）是糖尿病的一种常见的严重并发症，约25%的糖尿病患者会发生足部溃疡，其中70%以上的患者需要下肢截肢，对患者的生活质量造成严重影响。随着三维打印技术的不断发展与应用，三维打印生物支架在DFU治疗中的作用愈发明显。该文概述了DFU的诱因及其发病机制，详细介绍了三维打印支架在DFU的伤口愈合中发挥的作用以及未来的发展方向，为DFU的治疗以及三维打印支架的发展提供参考。

简介：摘要目的硫酸吲哚酚(IS)是一种公认的结合蛋白质的肠源性尿毒症毒素，在慢性肾脏病患者体内蓄积可导致和促进慢性肾脏病的发生和发展。本实验探索了IS是否能引起人肾小球足细胞骨架的损伤及其可能的机理。方法以体外培养的人肾小球足细胞系作为研究对象。采用台盼蓝拒染法、MTT法检测足细胞活力；采用免疫荧光法检测足细胞骨架纤维状肌动蛋白(F－actin)、骨架蛋白Synaptopodin改变；Western印迹法分析骨架蛋白Synaptopodin蛋白水平；RT－qPCR法检测Synaptopodin mRNA表达；琼脂糖凝胶电泳法分析足细胞内蛋白激酶A(PKA)活性。结果IS使足细胞F－actin、Synaptopodin蛋白荧光减弱；IS还下调Synaptopodin的mRNA (P<0.01)。IS刺激使PKA磷酸化增多；PKA通路阻断剂H89可以上调Synaptopodin的蛋白及mRNA表达(P＝0.002)。结论IS可下调足细胞骨架F－actin、Synaptopodin表达，PKA信号通路可能部分参与了Synaptopodin表达的调节，本研究结果为防治和干预CKD发生发展提供了新的思路和潜在的治疗靶点。

简介：摘要目的通过实验研究探讨细胞骨架调节剂（lncRNA cytoskeleton regulator，CYTOR）对脊索瘤CM-319和U-CH1细胞生物学行为，包括增殖、迁移和侵袭，及放射敏感性的影响及潜在的分子机制。方法脊索瘤组织和髓核组织中CYTOR和miR-24-3p的表达采用qRT-PCR检测。将人脊索瘤细胞株CM-319和U-CH1分为si-NC组（转染si-NC）、si-CYTOR组（转染si-CYTOR）、miR-NC组（转染miR-NC）、miR-24-3p组（转染miR-24-3p）、si-CYTOR+anti-miR-NC组（共转染si-CY-TOR和anti-miR-NC）、si-CYTOR+anti-miR-24-3p组（共转染si-CYTOR和anti-miR-24-3p）。Western blot检测增殖、迁移侵袭蛋白表达水平，MTT法测定CM-319和U-CH1细胞增殖活性，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力，克隆形成实验检测不同剂量放射处理后细胞存活分数，双荧光素酶报告系统验证CYTOR和miR-24-3p的调控关系。结果检测20个脊索瘤组织和20个髓核组织样本，结果发现，lncRNA CYTOR在脊索瘤组织中表达量显著高于髓核组织（t=19.837，P<0.05），miR-24-3p在脊索瘤组织中表达量显著低于髓核组织（t=22.061，P<0.05）；抑制CYTOR表达和过表达miR-24-3p均可抑制CM-319和U-CH1细胞增殖、迁移、侵袭，增强细胞放射敏感性；双荧光素酶报告实验结果表明，lncRNACYTOR靶向负调控miR-24-3p的表达；抑制miR-24-3p逆转了抑制lncRNA CYTOR对CM-319和U-CH1细胞增殖、迁移、侵袭和放射敏感性的作用。结论lncRNA CYTOR通过靶向调控miR-24-3p表达抑制CM-319和U-CH1细胞的增殖、迁移和侵袭，增强细胞放射敏感性。lncRNA CYTOR是脊索瘤潜在的分子治疗靶点。

简介：摘要目的探讨转运RNA来源的小分子片段770（tRF-770）调控细胞骨架相关蛋白2（CKAP2）对乳腺癌细胞增殖的影响。方法使用MINTbase数据库v2.0序列与基因组中成熟的tRNA进行比对，确认tRF-770的染色体定位；TA克隆实验鉴定tRF-770；利用TargetScan和miRBase数据库分析预测tRF-770的靶基因；利用癌症基因组图谱（TCGA）数据库数据分析CKAP2在乳腺癌中的表达情况。选择乳腺癌细胞株MDB-MA-231和MCF7，分别分为空白对照组（不予任何处理）、tRF-770过表达组（转染tRF-770过表达序列）及阴性对照组（转染阴性对照序列）；另外设立tRF-770过表达+CKAP2-HA组（共转染tRF-770过表达序列与CKAP2过表达序列）。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测乳腺癌细胞中tRF-770的相对表达量；CCK-8法检测乳腺癌细胞增殖能力并进行挽救实验；双荧光素酶报告基因实验验证tRF-770的靶基因；蛋白印迹法检测CKAP2-ERK2信号通路相关蛋白的表达情况。结果tRF-770与9类tRNA剪切修饰的5'端完全匹配，TA克隆测序验证结果表明产物大小以及碱基与预期tRF-770序列一致。基于TCGA数据库数据分析发现CKAP2在乳腺癌组织中高表达（t=7.21，P<0.05）。qRT-PCR检测结果显示，在MDA-MB-231细胞中，空白对照组、阴性对照组、tRF-770过表达组tRF-770相对表达量分别为1.00±0.00、2.42±0.11、3.75±0.01，差异有统计学意义（F=1 395.00，P<0.001）；在MCF7细胞中，3组tRF-770相对表达量分别为1.00±0.00、2.45±0.21、3.26±0.16，差异有统计学意义（F=169.30，P<0.001）；两种细胞中，与空白对照组及阴性对照组比较，tRF-770过表达组中tRF-770相对表达量均升高（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验结果表明，tRF-770与CKAP2 mRNA 3'UTR结合。CCK-8法检测结果显示，在MDA-MB-231、MCF7细胞中，第3天和第4天tRF-770过表达组细胞增殖能力均低于空白对照组和阴性对照组（均P<0.05）；第3天和第4天阴性对照组与tRF-770过表达组细胞增殖能力比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）。CCK-8法挽救实验结果显示，在两株乳腺癌细胞中，tRF-770过表达+CKAP2-HA组自转染第2天起，细胞增殖能力均高于tRF-770过表达组（均P<0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，两种乳腺癌细胞中，tRF-770过表达组与阴性对照组比较，CKAP2、p-ERK2、PCNA蛋白表达均下降（均P<0.05）；ERK2蛋白在MDA-MB-231细胞中表达量变化较小，而在MCF7细胞中tRF-770过表达组蛋白表达下降。结论tRF-770可能通过CKAP2-ERK2信号通路抑制乳腺癌细胞增殖。

简介：摘要细胞骨架相关蛋白4（cytoskeleton-associated protein 4，CKAP4）定位于内质网，是一种Ⅱ型跨膜蛋白。CAKP4作为各种配体的膜受体，是诊断和治疗疾病的新型分子靶标。本文综述了CKAP4的生物学功能及其在慢性肾脏病（chronic kidney disease，CKD）血管钙化中的作用，探讨CAKP4作为CKD治疗靶向分子的可能性。

简介：摘要目的评估Nd：YAG钬激光下经尿道膀胱肿瘤整块切除术(ERBT)合红色诺卡菌细胞壁骨架注射液(N-CWS)膀胱灌注治疗非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)的临床疗效。方法回顾性分析2015年2月至2019年3月于本院行Nd：YAG钬激光ERBT联合N-CWS膀胱灌注治疗的48例NMIBC患者的临床资料。结果所有患者均顺利完成手术，手术时间为(17.0±9.5)min，留置导尿管时间为(6.7±1.7)d，病理报告显示肌层检出率为81.3%(39/48)，随访时间为9~58个月，失访3例，1例因其他疾病死亡。术后行N-CWS膀胱灌注治疗，灌注次数为(16±5)次。7例复发，总复发率为15.9%；术后无严重并发症。结论应用Nd：YAG钬激光ERBT联合N-CWS膀胱灌注治疗NMIBC具有切割精确、创伤小、出血少、术后恢复快，术后复发率不高于常规疗法。