简介:丝氨酸乙酰转移酶(SAT,EC2.3.1.30)是硫同化中非常重要的一个酶,是半胱氨酸合成的关键酶,催化丝氨酸转化为氧乙酰丝氨酸的反应,后者再生成半胱氨酸。本研究从红藻门杉藻科角叉菜(Chondruscrispus)cDNA文库中克隆了角叉菜丝氨酸乙酰转移酶基因(cysE)全长序列(GenBank序列号KT963952)。序列分析表明,其ORF区长1143bp,编码由380个氨基酸组成的蛋白,理论分子量为40.60kDa,理论等电点为6.26。生物信息学分析表明角叉菜SAT与其他物种的SAT的氨基酸序列具有较高的同源性。本研究为探讨SAT在角叉菜硫代谢中的作用提供了实验基础。
简介:以6-甲基-2-(α-羟甲基)-IH-苯并咪唑(MHMBM)作为荧光探针,利用蛋白质对MHMBM荧光增敏作用,建立了测定人血清总蛋白的新方法。结果表明,在中性水溶液中,MHMBM的荧光强度与牛蛋白(BSA)的浓度呈良好的线性关系,相关系数(r)为0.9995,检出限2.3μg/mL,线性范围4.6—60.0μg/mL。本方法用于测定两种样品溶液中的总蛋白,RSD(n=6)分别为1.7%和1.3%,回收率95.5%和98.6%。
简介:Linkerswereassembledonaglasssurfacebasedonthehydrolysisandcondensationof3-glycidoxy-propyltrimethoxysilane(GPS).AftertheassemblyofGPS,fourapproachesweretriedtoopentheendingepoxidegroupofGPSortofurtherelongatethelinkers.TheeffectoftheseapproachesonDNAinsitusynthesisandhybridizationwasinvestigated.Forthespacingofthesynthesisinitiationsites,thewettabilityofthesupportandthelengthofthelinkinggroupthatattachestheinitiationsitetothesurfacehavedirectinfluencesontheyieldofcouplingreactionsandthesubsequenthybridizationevents.X-rayphotoelectronspectroscopy(XPS)andmeancontactanglesofdeionizedwateroftheaboveslidesweremeasuredtoassessthelinker'scharacteristicsineachprocedure.Itwasprovedthattheglassslidesweresuccessfullymodifiedandbecameexcellentsupportsfortheoligonucleotidessynthesis.Inaddition,itprovedbestfortheinsituoligonueleotidessynthesisthataglassslidewasinturntreatedwithethylenediamine,glutaradehyde,ethanolamineandsodiumborohydridesolutionatambienttemperatureaftersilanizedwithGPS.
简介:该实验通过SDS高盐法(常规法)、SDS高盐法(改良法)和SoilgDNAKit法提取土壤微生物基因组DNA,用DNANanophotometer仪测定样本DNA的纯度和浓度,以确定最佳提取方法.结果表明,用SDS高盐法(常规法)、SDS高盐法(改良法)和SoilgDNAKit法和土壤微生物基因组DNA的浓度分别为41.45ng/μl、96.48ng/μl和58.40ng/μl,纯度(OD260/OD280)分别1.45、1.57和1.82.由结果可知,改良法提取DNA的浓度最高,而SoilgDNAKit法的纯度最高,但其成本较高,因此,SDS高盐法(改良法)是节省成本且适合提取大批量土壤微生物基因组DNA的方法,今后在提取DNA过程中进一步优化,以提高其纯度.