简介:目的测定不同产地土牛膝中蜕皮甾酮的含量差异,建立高效液相测定土牛膝中蜕皮甾酮的方法。方法采用AgilentC18液相色谱柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇水(3961)为流动相进行梯度洗脱,流速1ml/min,检测波长250nm,柱温35℃。结果蜕皮甾酮进样量在0.117~5.85μg范围内与峰面积之间呈良好的线性关系,蜕皮甾酮的线性方程为A=1367.7C(r=0.9998);加样回收率的范围在96.41%~103.95%之间,RSD值为2.45%(n=9);含量测定结果表明蜕皮甾酮含量最高的为广西金秀自然保护区样品(0.1306%),蜕皮甾酮含量最低的为南宁市罗村样品(0.0104%)。结论该方法准确可靠,操作简便,可以为土牛膝药材的质量控制与标准制定提供参考依据。
简介:目的:探讨四君子加川牛膝方促进大鼠下肢难愈性创面愈合可能的作用机制,以及引经药川牛膝的作用。方法:建立SD大鼠右下肢难愈性创面模型,随机分为生理盐水组、四君子加川牛膝方组、四君子汤组、川牛膝方组,各组分别给予生理盐水及相应中药灌胃处理。在创面愈合过程中(造模后的第7天、第14天),取创面新生肉芽组织及血液,检测血清碱性成纤维生长因子(bFGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平的变化,并应用流式细胞仪检测成纤维细胞的S期细胞比例。结果:(1)造模后第7天,四君子汤组及四君子加川牛膝方组TGF-β1、bFGF浓度明显高于生理盐水组(P〈0.05),而川牛膝方组与生理盐水组无明显变化(P〉0.05),其中四君子汤组与四君子加川牛膝方组间比较无明显差异(P〉0.05);造模后第14天,各组间TGF-β1、bFGF浓度比较均无明显差异(P〉0.05)。(2)造模后第7天,各药物组成纤维细胞G0/G1期细胞比例的表达均明显低于生理盐水组(P〈0.01或P〈0.05)、S期细胞比例的表达均明显高于生理盐水组(P〈0.01),而各组间G2/M期细胞比例的表达均无显著性差异(P〉0.05),其中四君子加川牛膝方组G0/G1期细胞比例明显低于四君子汤组(P〈0.05),S期细胞比例明显高于四君子汤组(P〈0.05);在造模后第14天,各组间G0/G1期及G2/M细胞比例的表达均无显著性差异(P〉0.05),而四君子加川牛膝方组S期细胞比例明显高于四君子汤组与川牛膝方组(P〈0.01)。结论:四君子加川牛膝方可上调TGF-β1、bFGF的合成和分泌,加速成纤维细胞由G0/G1期进入S期,促进成纤维细胞的增殖,这可能为其促进肉芽组织增生及创面愈合的作用机制,其中引经药川牛膝有提高成纤维细胞S期细胞比例的协同作用。