简介：体外组织块培养成年、老年哺乳动物室管膜下区(SVZ)神经干细胞的研究甚少.本研究的目的是探索体外培养神经干细胞的实用方法及扩充神经干细胞作为移植或基因转移的供体细胞来源.取8、14及24月龄SD大鼠(雌雄不拘)SVZ组织块作体外培养,在DMEM/F12+B27培养液中加入bFGF(20ng/ml),促进其组织块形成神经小球,刺激神经干细胞增殖,并用Nestin免疫组化鉴定.结果显示,培养7～10d产生的神经小球数量多,细胞生长状态佳,绝大多数细胞为Nestin阳性的神经干细胞,此期的神经干细胞较适宜于作细胞移植或基因转移.此法尚有取材方便、组织细胞损伤小、细胞易存活及经济等优点,不失为一种具有实用价值的通过体外培养扩增神经干细胞的方法.

简介：过去常用经典的Nadi反应显示细胞色素氧化酶以定位线立体的存在部位,现在广泛使用DAB法.我们对这两种方法进行了比较.方法如下:取Wistar大鼠的心、肝、肾组织,用液氮骤冷,恒冷箱切片(厚7μm),进行以下实验:Nadi反应:切片入孵育液(N-苯基-对-苯二胺3mg、1-羟基-2-萘酸3mg溶于二甲基亚砜0.1ml,0.05M的磷酸缓冲液pH7.210ml,混匀后过滤)室温30min.入Lugol碘液2min,入5%硫代硫酸钠4min,入1%醋酸钴60min,蒸馏水洗,甘油明胶封固.DAB法:切片入孵育液(0.05M磷酸缓冲液pH7.210ml,3,3′-二氨基联苯胺四盐酸盐(DAB)9mg,细胞色素C15mg,混匀后过滤)室温5min.切片用缓冲液清洗,入蒸馏水,甘油明胶封固.HE染色:切片先用10%Formalin固定10min,再做常规HE染色.对照:Nadi反应和DAB法都用迭氮钠预孵育5min(10ml缓冲液中含6mM迭氮钠),再入含6mM迭氮钠的孵育液中孵育,以下的步骤与上述步骤相同.DAB法还用不含细胞色素C的孵育液做对照.实验结果:HE染色的切片显示组织结构正常.Nadi反应的阳性产物为黑绿色的颗粒,可见弥散的现象.DAB染色的阳性产物为棕色颗粒,很少见有弥散现象.对照切片的结果:用迭氮钠制酶活性的Nadi反应有弱阳性产物,而用迭氮钠的DAB法细胞色素C的切片均呈阴性反应.我们认为显示细胞色素氧化酶的经典方法Nadi反应存在反应产物弥散的现象,用迭氮钠抑制酶的活性后仍有阳性产物出现,因而该法只能表明线粒体的存在,而其定位不够准确.DAB法的方法简便,反应产物不易扩散,可较准确地定位线粒体的存在部位.另外,DAB的沉淀物能与四氧化锇反应形成锇黑,可用于电镜观察.经以上的实验观察和比较,我们认为无论从反应的特异性、定位的准确性,还是电镜应用性等方面看,显示细胞色素氧化酶的DAB法都优于Nadi反应.

简介：一氧化氮合酶(NOS)为一含铁的单氧化酶,可催化左旋精氨酸转化为瓜氨酸和NO.而阿霉素(ADR)是一种有效的广谱抗肿瘤药物,由于其心脏毒性作用,使临床应用受到限制.我们在探讨阿霉素对心脏损伤病理机制的实验研究中,用双重组化法同时显示心室肌NOS与糖元获得成功,现报道如下:1.材料和方法:1.1动物模型新西兰纯种白兔于耳缘静脉注射ADR,每次2mg/kg,ADR以生理盐水稀释成1mg/ml,每周一次,共八周,做心室肌损伤模型.取心室肌组织做冰冻切片,厚12μm.1.2主要试剂(1)还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d);(2)四唑仑硝基兰(NBT);(3)0.5%过碘酸氧化液;(4)Schiff液:先将200ml双蒸水煮沸,微火,加入1g碱性复红,再煮沸1min.冷却至50℃加入20ml1N盐酸,待35℃时加入1g偏重亚硫酸钠.室温中静置5小时,变为无色液体后装入棕色瓶内并封口,放入冰箱避光保存待用.1.3双重组化法.(1)将冰冻切片置入丙酮固定1min;(2)经pH7.4PBS液清洗三次,每次5min;(3)入NADPH-d与NBT配制的孵育液,37℃恒温孵育1h;(4)经pH7.4PBS液清洗三次,每次3min;(5)入0.5%过碘酸氧化10～20min;(6)经pH7.4PBS液充分清洗;(7)入Schiff液10min液10min;(8)流水冲洗10min;(9)无水乙醇脱水;(10)二甲苯透明,中性树胶封片.1.4单一组化法显示NOS.(步骤参照双重组化法1～4步)1.5单一组化法显示糖元.(步骤参照双重组化法5～8步).2.实验结果:2.1双重组化法显示心室肌中NOS呈蓝色、糖元呈红色.2.2单一组化法显示心室肌中NOS呈蓝色.2.3单一组化法显示心室肌中糖元呈红色.结论:通过三组切片的比较,发现使用两种方法所显示NOS与糖元的颜色及其深浅无明显变化.3.意义3.1用双重组化法可以同时显示心室肌NOS和糖元.此法与单一显示NOS组化法和单一显示糖元组化法进行比较,结果显示NOS与糖元的颜色均无明显改变.此结果说明两组试剂的染色过程不产生交叉影

简介：海马和穹窿位于大脑半球内，完全被高度发展的大脑皮质所覆盖，所以要完全暴露海马和穹窿以及海马旁结构有一定难度。笔者在实践中摸索出一套实用简便的制作方法，现介绍如下：

简介：长期以来,Guguen等[1]的两步胶原酶灌注法分离获得肝细胞的方法,几乎成了肝细胞分离的经典方法;在此基础上又发展了多种不同的培养方法,如在培养瓶内加纤连蛋白(febronectin)以促进肝细胞附壁[2],添加生长因子于培养基促其生长等.但上述方法步骤繁琐,成本较高,且两步胶原酶灌注法主用于大鼠肝细胞的分离,不适于新生鼠肝细胞的分离,甚至分离成年小鼠肝细胞,都因为血管的纤细,在实际应用中也很困难.

简介：

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简介：对山东地区50套成人椎骨的第3颈椎到1胸椎进行观察和测量，主要结果为：颈椎横突与脊柱水平面间的角度从上到下依次递增，其横突下倾角C3为10．82±2．18°，C7为134．12±12．43°。中位椎间孔的垂直轴线与脊柱正中矢状面之间的角度较小，而上下位角度较大，本文结合临床及颈椎X线摄片方法进行了讨论。

简介：改革教材教法对能力培养和提高教学质量的关联段相林，孙中玉河北师范大学生物系石家庄０５００１６随着知识更新日趋加快，为了适应新时代的需要并赢得未来，根据教育规律和师范院校培养教师的目标及“人体组织解剖学”是形态科学的特点，我们把培养能够掌握和运用现代科...

简介：围绕如何培养学员的学习能力、思维能力、动手能力和运用专业外语的能力方面，我们除注重理论课和实习课外，还特别注重第二课堂的活动。目的是在有限的教学时程内，使学员既能掌握本门课程的基本知识与技能，又能使上述能力得到明显提高。第二课堂活动的内容有讲座，组织学制作技术，组胚知识竞赛和翻译英文论著。知识竞赛由学员组队参加，最后评出集体和个人1，2，3等奖。知识竞赛的题目涉及到组胚学各个知识点，专业英语等，甚至包括教员从本讲过的知识，具有一定的深度和难度。通过组胚知识竞赛，帮助学员扩大了知识面，提高了对组胚学习的兴趣，对全面深入的掌握组胚知识有很大帮助。第二课堂的翻译论文活动，提高了学员的专业英语水平，在教员指导下已发表论文摘译10余篇。通过组织学制片技术，培训了学员的动手能力。在第二课堂活动中，发现了一些掌握组胚知识坚实的学员，他们中一些人因此而选择了终身从事组胚专业的道路。调查显示，最受学生欢迎的第二课堂活动是知识竞赛，其次是组织学制片技术。在丰富多采的第三课堂活动中，学员的科研能力得到提高，而且丰富了知识，拓宽了眼界，提高了专业英语水平，达到培养人才的预期目的。

简介：探索内皮细胞对小鼠骨髓造血细胞的刺激和诱导分化作用.人脐静脉内皮细胞取自剖腹产后12hr以内的脐带.按Jaffe法进行培养,建立内皮细胞体外培养模型,收集原代培养的内皮细胞上清液(HECS).按本室常规方法制备骨髓有核细胞.在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同组合的重组造血因子,分为三组:①粒系培养组加GM-CSF(德国BM公司),终浓度为20ng/ml.②红系培养组加入IL-3(美国SIGMA公司)与EPO(德国BM公司),终浓度分别为20ng/ml和2u/ml.③实验组加入内皮细胞培养上清液,以RPMI-1640为对照组.将上述体系接种于24孔板中,每孔1ml,培养7d,收集细胞,作细胞计数,台盼蓝拒染活力检测.细胞表面标记分析:选用抗红系或粒系的单克隆抗体CD71和CD13(美国Coulter公司)作细胞表面标记检测.培养后细胞经PBS洗涤,取细胞悬液2～5×105细胞),加抗体1μl,4℃孵育30min,用PBS洗去没有标记上的抗体和FITC,重新悬浮细胞,用流式细胞仪(CoulterEliteEsp,美国Coulter公司)进行分析.用T检验分析实验数据以x±SD表示.结果:HECS对小鼠骨髓细胞形成各类造血祖细胞集落具有明显的刺激作用,能够提高BFU-E,CFU-E,CFU-GM集落产率,分别为43.04±5.80,148.75±32.20,104.67±9.92(P＜0.05);HECS诱导细胞7d后,细胞表面表达CD13为93.75±5.38,CD71为59.95±7.10(P＜0.05).实验组与阳性对照组基本一致,阴性对照组无集落形成和抗体表达.内皮细胞不但能够促进造血干祖细胞的增殖并且能够诱导其定向分析.以往对骨髓细胞的体外培养均采用琼脂或甲基纤维素半固体培养的方法,在用流式细胞仪进行分析时,由于难以去除琼脂或甲基纤维素对实验的干扰,造成对细胞表面抗原标记的困难,影响了实验的准确性.本实验将小鼠骨髓细胞进行体外液体培养,同时加入不同组合的重组造血生长因子,诱导造血干祖细胞向红系和粒系分析,为流式细胞仪分

简介：过去二十多年的研究表明,神经营养因子对神经发育和成年神经系统的疾病过程都有重要的影响.在神经退行性变动物模型中,发现神经系统的生长因子能阻止或减少神经元的退变,因此已经开始了有关的临床试验.其中的关键问题是生长因子的给药方法:在靶部位必须有足够高的浓度才能有效地发挥作用,但是药物必须局限于特定的脑区以避免疼痛、体重下降等副作用.近年来分子药物研究进展使得给与特定的生长因子的治疗方案逐渐变成现实,基因治疗的几种选择方法已经或即将开始试验.本文就神经营养因子基因治疗神经退行性变的研究作一综述,重点放在目前已经进入Ⅰ期临床试验的神经生长因子基因治疗阿尔茨海默氏病方面.

简介：专科第三版教材就以前相比,有了很大的改进,并且具有自己的一些特色,这一点在杭州医学院的王祖武的文章中也有说明,这里不再赘述,文中也就教材中的一些错误指出了部分,但我们在教材的使用过程中发现有些地方虽没有指出来,但存在一些问题值得商榷,故在本文中作一些说明.

简介：骨组织内各种间充质细胞,如成骨细胞,软骨细胞,成肌细胞和骨髓基质细胞都来源于共同的祖细胞即多潜能间充质细胞[1].

简介：护理中专生的年龄多在15－18岁，思维活跃，接受能力强，对刚接触的医学也有强烈的新鲜感和求知欲，但往往不能从死记硬背、由老师抱着走的学习模式中走出来。对此，我室采用了参与制和目标教学法相结合的教学方法。这种教学法改变了传统的老师教、学生学的模式，由教师引导学生参与教学活动，促使她们主动自觉地获取知识。大班课上采用纵向联系启发式教学，结合生理、病理、临床知识提问。每次课后留出二十分钟，结合当堂课的组织学幻灯片，采取提问的方式总结全课。小班深的教学更灵活，课前由教师结合本堂课的重点、难点提出问题，学生带着问题看标本和切片，然后由学生根据自己所看总结回答，学生也可提问供大家回答。教师对学生的提问和回答予以适当引导，对回答正确和提出问题较好的同学予以表扬，加强学生的参与意识和竞争感。在这种教学法的实施中，教师的另一职责是把握好教学目标。课前由简单到复杂精心设计安排好全部组织学及各分段教学目标，上课时先讲明本堂课的大致内容及重点。在学生提问和回答问题时，予以恰当引导，使活跃的课堂时时紧靠教学目标进行。实践证明，这一教学方法不仅让学生对组织学产生的浓厚的兴趣，达到了预期的教学效果，在结业考试中，所有学生及格，优良率达84％。?

简介：解剖学是一门形态科学,适宜用多媒体形式表达,图、文、声、像并茂的多媒体课件使得教师好教,学生好学,但在实际应用过程中,其教学效果受很多方面的影响,现分析如下.

简介：解剖学教材是解剖学教学的重要组成部分,将多媒体应用于解剖学教材将促进电教教材向新颖、灵活、互动方向转变.

简介：从人基因组DNA获取神经营养素－4（neurotrophin-4,NT-4)基因，并对该目的基因进行序列测定，本实验直接从人脑组织中提取基因组DNA，根据人神经营养素－4的cDNA序列，设计一对寡核苷酸引物，采用PCR，获得人NT－4基因，用DNA序列分析NT－4基因，结果，我们获取的人NT－4基因与文献报道有五个碱基不同，我们认为：直接采用PCR来获取目的基因，出现碱基错配的可能性较大；测序仪器和实验条件对结果有一定影响关系。

简介：本文对阆中市及广元地区1998年医科类考生成人高考成绩进行了分组统计和比较分析，结果表明考生的人体解剖学成绩和成人高考总成绩可以通过短期集中辅导加以提高。