简介:目的构建人survivin基因shRNA重组腺病毒载体,为缺氧性肺动脉高压(Hypoxicpulmonaryhypertension,HPH)的基因治疗研究提供实验基础。方法构建survivin-siRNA表达质粒,测序鉴定正确后,将survivin-siRNA表达质粒与含有腺病毒右臂的骨架质粒pBHGE3共转染至人293A细胞,包装成腺病毒Ad-survivin并扩增,TCID50法测定病毒滴度。将人肺动脉平滑肌细胞缺氧培养24h,并将细胞分为空白对照组(Con组),阴性对照组(Ad-LacZ组),不同Adsurvivin序列的干扰组(sh1组、sh2组、sh3组)。Ad-survivin感染缺氧人肺动脉平滑肌细胞,Westernblot检测survivin蛋白,验证重组腺病毒干扰效果。结果(1)将shRNA片段与pAd-U6-CMV连接后的质粒进行测序,结果提示目的基因片段插入成功;(2)TCID50法测定病毒Ad-survivin-shRNA1、Ad-survivin-shRNA2和Ad-survivin-shRNA3的滴度分别是1×1010,1.2×1010,1×1010;(3)sh2组缺氧人肺动脉平滑肌细胞内survivin蛋白表达明显低于其他4组(P〈0.05)。结论本研究成功构建人survivin腺病毒载体,为研究survivin基因在缺氧性肺动脉高压中的作用提供了实验基础。
简介:目的探讨抗病毒软胶囊辅助阿昔洛韦治疗单纯疱疹病毒性角膜炎的临床疗效及安全性。方法选取2013年1月至2015年2月于重庆市丰都县人民医院接受治疗的107例单纯疱疹病毒性角膜炎患者为研究对象,按照治疗方案分为对照组52例62眼和观察组55例70眼。对照组给予阿昔洛韦滴眼液治疗,观察组在对照组基础上给予抗病毒软胶囊辅助治疗。疗效结束后,比较对照组和观察组患者临床疗效、视力情况、血清细胞因子水平、复发率及不良反应发生情况。结果观察组患者治疗总有效率明显高于对照组(94.3%vs.82.2%,P〈0.05)。治疗后,观察组患者中视力≥0.8的眼数比例明显多于对照组,差异有统计学差异(P〈0.05),而两组患者治疗后视力≤0.4、〉0.4-〈0.8的眼数比例比较差异无统计学意义(P〉0.05)。与对照组相比,观察组患者治疗后血清白细胞介素(IL)-2水平明显升高,IL-6、干扰素(IFN)-γ水平明显降低,组间比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。随访6个月,观察组患者复发率明显低于对照组(7.1%vs.19.4%,P〈0.05)。治疗期间,两组患者均未出现严重不良反应,且对照组和观察组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(11.5%vs.16.4%,P〉0.05)。结论抗病毒软胶囊辅助阿昔洛韦治疗单纯疱疹病毒性角膜炎疗效可靠,能够明显提高临床疗效,改善视力,调节血清IL-2、IL-6、IFN-γ等细胞因子水平,降低复发率,且不良反应轻微,临床上值得应用。