简介：目的：建立SYBRGreenⅠ实时荧光PCR定量检测人POT1基因的方法。方法：依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物，以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成的cDNA为模版，以TBP基因为参照基因，应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测POT1基因的表达。结果：POT1和TBP基因熔解曲线为单峰，无杂峰及二聚体。POT1基因及参照基因TBP基因扩增效率相同（直线斜率0．0171〈0．1）。POT1基因批内变异与批间变异分别为1.3％和2.1％；TBP基因批内变异与批间变异分别为1．2％和2．6％。结论：建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测人类POT1基因的方法，该方法简单快速，经济，灵敏度高，特异性和重复性好，可用于人类POT1基因的定量分析。

简介：目的：探讨甲氧基聚乙二醇（mPEG）遮蔽修饰的红细胞RhD血型抗原的有效性和稳定性以及被修饰红细胞结构和功能的变化。方法：用mPEG-SPA修饰RhD血型阳性人红细胞，观测修饰和未修饰红细胞的抗-D凝集反应性、mPEG结合产物稳定性、电镜下细胞形态、变形指数、渗透脆性、自身溶血率、2，3-二磷酸甘油酸含量、膜Na^＋,K^＋ATP酶、乙酰胆碱酯酶活性和胆固醇含量。结果：0．5mmol／L、1．0mmol／L、2．Ommol／L、2．5mmol／L和5．0mmol／L的mPEG-SPA修饰红细胞与抗D的凝集反应情况依次为50％凝集、可见凝集、无凝集、无凝集、无凝集，在4℃保存14d和在37℃保存2d的修饰红细胞与抗D均无凝集反应，而末修饰红细胞则全凝集。电镜下修饰和未修饰红细胞均为双凹圆盘状形态．细胞大小均一。修饰和未修饰红细胞的各观测指标分别为：2，3-二磷酸甘油酸含量（71．00±12．88）mmol／L和（65．13±13．98）mmol／L，红细胞沉降率（2．75±2．05）mmjh和（8．00±3．82）mm／h，细胞变形指数（0．98土0．18）和（0．98士0．29），自身溶血率（2．27±0．28）％和（1．32±0．32）％，渗透脆性（0．44±0．06）％和（0．44±0．03）％，膜胆同醇含量（0．10±0．03）g／i．和（0．10±0．06）g／L，Na^-，K^-ATP酶活性（4．834±1．27）U／mg和（5．41±1．32）U／mg，乙酰胆碱酯酶活性（27．88±5．09）U／mg和（29．68±4．165U／mg。修饰红细胞的沉降速率低于未修饰红细胞，自身溶血率高于未修饰红细胞（P＜0．05），但是修饰红细胞沉降速率和自身溶血率都在参考值范围。结论：2．0mmol／L的mPEG-SPA能够有效并且稳定地遮蔽红细胞RhD血型抗原。修饰红细胞具有未修饰红细胞的双凹圆盘状形态、细胞膜结构、变形性和运送氧气能力．

简介：目的:探讨微柱凝胶抗人球蛋白法(MGT-AGT)替代Coombs试验检测IgG抗体的敏感性和对临床患者血液标本直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性检出率。方法:采用MGT-AGT法对不同浓度的DAT阳性标本或IgG抗D致敏红细胞及IgG游离抗D抗体进行实验比较,并用MGT-AGT法、凝聚胺试验(MPT)和Coombs试验,对81例临床患者的血液标本DAT阳性检出率进行了比较。结果:对于DAT阳性标本或IgG抗D致敏的红细胞的检测,MGT-AGT法在1:128稀释时可以检出,MPT法在1:32稀释时可以检出,Coombs试验在1:32稀释时可以检出。对于IgG游离抗D抗体的检测,MGT-AGT法在1:32稀释时可以检出,MPT法在1:16稀释时可以检出,Coombs试验在1:16稀释时可以检出。对于81例临床患者血液标本DAT阳性的检出率,MGT-AGT法为:免疫性溶血性贫血患者87.8%,新生儿溶血病患者68.2%,系统性红斑狼疮患者55.5%;MPT法分别为75.6%、54.5%和33.3%;Coombs试验分别为78.1%、54.5%和11.1%,MGT-AGT法的敏感性高于MPT法和Coombs试验(P<0.01)。结论:MGT-AGT法检测DAT阳性标本、IgG抗D致敏的红细胞、IgG游离抗D抗体的敏感性和对临床患者血液标本DAT阳性的检出率均高于MPT法和传统的Coombs试验。

简介：医院输血科行政管理上多半隶属于医院检验科，两者工作性质既有区别又有联系。输血科是医院储存血源，检测血型、交叉配型、分离急用血细胞和成分输血供血、为亟待营救生命的患者提供血源的重要学科，该学科已占有越来越高的地位，由于输血每个环节的生物安全至关重要，关系到国民的血液健康，因此医院输血科的生物安全管理工作已提到议事日程上来。经输血方式感染的传染性病毒主要有乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒等，除了受血者可能由于输入了携带某种病毒的血源引起感染之外，实验操作中密切接触血源的输血科人员也面临极大的感染风险[1]。据报道，由于输血感染的HIV和HBV都来自于“感染窗口期”的供血人群的血液[1]；张雪花等[2]报道，某市无偿献血人群中梅毒抗体阳性率为0．6％。因此，输血科员工和医院受血患者都面临着血源病毒感染的严重威胁[3]。为了达到安全输血的目标，笔者对医院输血科亟待改进的工作环节和存在的生物安全隐患进行了调查与归纳。

简介：医院评审是深化医药卫生体制改革，不断提高医疗质量，保证医疗安全的重要措施。输血质量管理和持续改进是医疗机构质量管理的重要组成部分，是确保临床输血安全的重要前提。输血安全除了考虑血液的安全外，还要严密监管实施输血的各个环节和步骤，包括制度的建立、输血前评估、输血申请、输血相容性检测、血液的妒夺与发放、输注过程监护及输血后疗效评估等，任何环节出现差错都可能导致严重后果。本文就医院评审中输血管理存在的问题及解决方案进行探讨。

简介：目的：比较高效价抗人球（效价≥1：512）蛋白、抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）（低效价）与微柱凝胶法在自身免疫性溶血性贫血（AIHA）实验室检测中的优势。方法：首先以微柱凝胶法直抗试验筛选阳性血液标本，然后对上述标本分别用高效价抗人球蛋白（效价≥1：512）、抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）做直抗半定量试验，γ中和试验。结果：微柱凝胶法易出现假阳性，抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）易出现假阴性。高效价抗人球（效价≥1：512）未发现假阳性，而且凝集梯度明显，易于结果判断分析。结论：高效价抗人球（效价≥1：512）在AIHA直抗试验中，较抗人球蛋白试剂（效价≥1：4）与微柱凝胶法具有结果更加准确的明显优势。