简介：

简介：Aim:Toidentifythegenesspecificallyexpressedinhumanadultandfetaltestesandspermatozoa.Methods:AhumantestiscDNAmicroarraywasestablished.ThenmRNAsofhumanadultandfetaltestisandspermatozoawerepurifiedandprobeswerepreparedbyareversetranscriptionreactionwithmRNAasthetemplate.Themicroarraywashybridizedwithprobesofadultandfetaltestesandspermatozoa.ThenucleicacidsequencesofdifferentiallyexpressedgenesweredeterminedandhomologiesweresearchedinthedatabasesofGenBank.Results:Anovelhumantestis-specificgene,PKH-T,wasidentifiedbyhybridizingadultandfetaltestisandspermatozoaprobeswithahumantestiscDNAmicroarray.ThecDNAofPKH-Twas1069bpinlength.ThecDNAsequenceofthisclonewasdepositedintheGenbank(AY303972)andPKH-TwasalsodeterminedasInterimGenSymbol(Unigene,HS.38041).PKH-TcontainedmostPKHconservedmotif.The239aminoacidsequencesdeducedfromthe719bpopenreadingframe(ORF)hadahomologywiththegenePKH(U89606).PKH-Twasspecificallyandstronglyexpressedinthetestis.ComparisonofthedifferentialexpressionsofPKHandPKH-Tintestesofdifferentdevelop-mentalstagesindicatedthatPKH-Twasexpressedintheadulttestisandspermatozoa,whilePKH,intheadult,fetalandagedtestes.PKH-ThadnoexpressioninthetestisofSertolicellonlyandpartiallyspermatogenicarrestpatients.Conclusion:PKH-Tisagenehighlyexpressedinadulthumantestisandspermatozoa.Itmayplayanimportantroleinspermatogenesisandcouldberelatedtomaleinfertility.

简介：目的探讨肾癌相关蛋白CAIX／MN／G250mRNA在肾细胞癌（renalcellcarcinoma，RCC）手术前后的表达水平及临床意义。方法应用RT—PCR技术检测57例RCC患者癌组织及术前外周血中CAIX／MN／G250mRNA的表达情况，并选择15例癌旁肾组织、15例正常肾组织及40例健康人外周血作对照，对术前外周血CAIX／MN／G250mRNA阳性RCC患者术后随访4周，并对其外周血CAIX／MN／G250mRNA水平进行半定量检测。结果57例RCC患者，其CAIX／MN／G250mRNA阳性率在外周血中为59．6％（34／57），癌组织中为78．9％（45／57），显著高于对照组（P〈0．01）。在肾透明细胞癌患者的外周血及癌组织中，CAIX／MN／G250mRNA的阳性率分别为76．2％（32／42）和95．2％（40／42），均显著高于相应对照组（P〈0．01）。RCC患者外周血及癌组织中CAIX／MN／G250mRNA阳性率均随临床分期的增加而增加（P〈0．01）。34例外周血阳性患者CAIX／MN／G250mRNA水平术前2h、术后7、14、21和28d分别为0．54±0．13、0．56±0．15、0．34±0．13、0．29±0．18和0．22±0．11。RCC患者外周血CAIX／MN／G250mRNA水平在肾癌根治术后随时间的推移呈下降趋势（P均〈0．05）。结论使用RT—PCR技术检测CAIX／MN／G250mRNA对肾癌尤其是透明细胞癌有较好的特异性和敏感性。外周血CAIX／MN／G250mRNA检测可作为肾癌微转移的检测指标用于RCC的诊断、疗效评价及预后判断。

简介：目的糖尿病肾病是一种进展性的肾脏疾病,也是导致终末期肾病的主要病因。目前的研究表明,miRNA在糖尿病肾病的发生及进展过程中起重要的作用。本实验通过研究miR-18a、miR-19a、miR-194及TSP-1在高糖与TGF-β1刺激的肾小管上皮细胞中的表达情况,进一步探索miRNA在糖尿病肾病发病机制中的作用。方法用半定量RT-PCR监测人肾小管上皮细胞在低糖组（终浓度5mmol/L）、高糖组（终浓度30mmol/L）及高糖组＋TGF-β1组不同时期TSP1mRNA、miR-18a、miR-19a及miR-194的表达水平。结果TSP1mRNA的表达水平随血糖浓度的升高及培养时间的延长逐渐升高,而miR-194成逐渐下降的趋势,但miR-18a和miR-19a的表达水平并未随血糖浓度改变有明显变化。通过TGF-β1处理的体外培养的肾小管上皮细胞48h,研究结果显示,与未经TGF-β1处理的高糖组相比,TGF-β1＋高糖组能进一步升高肾小管上皮细胞TSP1mRNA的表达水平,使肾小管上皮细胞miR-194的表达进一步下降,并具有统计学差异。结论通过研究结果显示,TGF-β1对TSP1的表达水平起正性调节作用,对miR-194的表达水平呈负性调节作用,而针对TSP1是否为miR-194靶向调节基因,还需后续试验进一步验证。

简介：目的：观察益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织Nephrin、PodocinmRNA表达的影响,为临床治疗膜性肾病（MN）提供依据。方法：将SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、中药组,各组按相应剂量灌胃,于第4周末观察24h尿蛋白定量（UTP）、血清总蛋白（TP）、血白蛋白（Alb）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）,留取肾脏组织,用免疫荧光、光镜、电镜来观察大鼠肾组织病理变化,Real-timePCR法测Nephrin、PodocinmRNA在肾脏中的表达情况。结果：与正常组相比,其余三组TP、Alb均明显降低而TC、TG、UTP均明显升高,肾脏病理出现损害,肾组织中Nephrin、PodocinmRNA表达明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;与模型组相比,治疗组UTP、TC、TG均明显降低,TP、Alb均明显升高,肾脏病理损害较轻,肾组织Nephrin、PodocinmRNA表达有所升高（P〈0.05）。贝那普利组与中药组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：益肾通络方可明显降低膜性肾病大鼠的尿蛋白、升高血白蛋白水平、改善血脂代谢,对膜性肾病大鼠肾小球基底膜免疫复合物的沉积及基底膜的增厚有抑制作用,可减少肾脏病理损伤,能够上调膜性肾病大鼠肾组织Nephrin、PodocinmRNA的表达,延缓膜性肾病进一步发展。

简介：目的观察全雄激素阻断（CAA）治疗前后前列腺干细胞抗原（PSCA）mRNA表达水平的变化,并进一步评估PSCA在人前列腺癌的临床预后价值。方法对42例男性患者的前列腺活检组织或经尿道前列腺切除组织（包括去势前局限性前列腺癌组织和前列腺癌根治术前接受比卡鲁胺和醋酸戈舍瑞林去势治疗3个月后的癌组织）进行原位杂交。PSCAmRNA的肿瘤细胞质染色结果由两位病理学专家独立评估,t检验分析CAA前后PSCAmRNA表达水平的差异。前列腺癌根治术后进行36~40个月的随访,旨在评估PSCAmRNA表达水平与癌症局部复发或转移的相关性。结果原位杂交标记PSCAmRNA阳性的细胞由CAA前的67.3%（0~89%）±9.4%下降到CAA后33.8%（0~92%）±7.7%（P〈0.001）。CAA前95.2%（40/42）的患者PSCAmRNA表达阳性,而去势后阳性率降到67.5%（27/40）,且随访未发现有局部复发或远处转移。PSCAmRNA阳性表达的减少取决于原始肿瘤的Gleason评分,Gleason≤6：19.3%±4.7%；Gleason=7：38.8%±7.2%；Gleason≥8：73.4%±13.8%（P〈0.05）。其余13例,CAA后PSCAmRNA阳性表达水平增加,且随访发现3例有局限复发,4例有远处转移。结论前列腺癌CAA可抑制PSCAmRNA的表达；去势治疗后PSCAmRNA表达的增加可成为肿瘤复发或远处转移的一个不利预测指标。

简介：目的以实时荧光定量RT-PCR技术研究良性前列腺增生（BPH）与前列腺癌（PCa）组织标本Ki-67蛋白和组织核增殖抗原（PCNA）mRNA的比值，探讨此比值在PCa诊断中的特异性意义。方法通过实时荧光定量RT-PCR检测63例PCa和37例BPH前列腺组织Ki-67／PCNAmRNA的表达，比较其在PCa与BPH组织中定量的差异。结果BPH与PCa组织Ki-67／PC—NAmRNA的定量表达值分别为2．264±0．460与5．905±0．780，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论实时荧光定量RT-PCR检测Ki-67／PCNAmRNA为PCa的诊断提供了可靠的辅助指标。

简介：gp96广泛存在于细胞内质网中，是热休克蛋白（heatshockprotein，HSP）家族中被研究和应用最广泛的一员。对HSP的研究揭示，肿瘤源性的gp96-抗原肽复合物可引起抗相应肿瘤的特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxicTlymphocyte，CTL）反应，并引起记忆性免疫应答。深入研究gp96-抗原肽复合物的免疫学机理对开发新型肿瘤疫苗具有重要意义。目前gp96-抗原肽复合物很有希望成为新一代抗肿瘤疫苗，本文就此作一综述。

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