简介：目的构建含有人E2F2基因和绿色荧光蛋白基因（pEGFP）的腺病毒载体,为聋病的基因治疗奠定实验基础。方法根据已知的E2F2基因序列设计并合成相应的双链DNA,将其与酶切线性化的pDC315-EGFP载体片段连接,构建穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2,并将其与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre共转染HEK293细胞,同源重组产生重组腺病毒。对重组腺病毒进行扩增、纯化及滴度测定,用聚合酶链反应和测序方法验证穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2穿梭质粒的构建;通过荧光显微镜和Westernblot（蛋白质印迹）方法,分别检测质粒pDC315-GFP-E2F2和重组腺病毒表达E2F2蛋白情况。结果经聚合酶链反应鉴定和测序分析,证实穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2与设计一致;经荧光显微镜检测,分别由穿梭质粒pDC315-GFP-E2F2、重组腺病毒转染的HEK293细胞均可观察到GFP表达;经WesternBlot检测出在72kDa～95kDa处有条特征带,其大小和E2F2-GFP融合蛋白（～76kDa）相吻合;滴度测定为1×1011PFU/ml（PFU,plaqueformingunit,空斑形成单位）。结论成功构建了人E2F2基因重组腺病毒载体,并能在HEK293细胞中表达。

简介：摘要目的探讨放射性皮炎的治疗及护理措施方法选择2013年6月至2015年6月在我科行调强放疗的40例出现3度及以上放射性皮炎的患者，随机分为2组，观察组使用美皮康联合维生素B12外用，对照组采取常规换药，予以自然愈合，比较两组患者皮肤的愈合情况结果对照组愈合的时间明显短于观察组，患者满意结论美皮康联合维生素B12对放射性皮炎的治疗效果较好。

简介：摘要目的研究番茄红素（LP）对2型糖尿病大鼠肾功能的保护作用。方法采用高脂高糖饮食加腹腔注射链脲佐菌素（STZ）的方法制备糖尿病大鼠模型，取60只模型大鼠根据血糖水平随机分为模型对照组，番茄红素（5、10、20mg/kg）治疗组和盐酸二甲双胍（200mg/kg）治疗组，并另取12只同龄大鼠作为正常对照组；每天灌胃给药1次，治疗4周。分别于给药前和给药后第14、28天测定各组大鼠空腹血糖水平；4周后，观察各组大鼠一般状况，并通过HE染色观察肾脏组织病理形态学变化。结果较模型对照组，番茄红素治疗组“三多一少”症状明显减轻；空腹血糖水平显著降低；体重显著升高，肾指数显著降低；尿量显著减少、UPro显著降低，血清中BUN、SCr、UA含量显著降低，肾脏组织病理变明显改善，差异均具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。结论番茄红素对2型糖尿病大鼠肾功能具有剂量依赖性的保护作用。

简介：目的探讨白细胞介素18（interleukin-18，IL-18）对分泌性中耳炎（otitismediawitheffusion，OME）大鼠中耳微环境中核转录因子nucleartranscriptionfactorskappaB，NF-κB）及T辅助细胞（Thelpercell，Thelpercell）Th2-11hl细胞免疫平衡的影响。方法18只SD大鼠，随机分为OME模型组（A组）、IL-18干预组（B组）和正常对照组（c组）每组各6只（12耳）。A组和B组以卵清蛋白（ovalbumin，ovA）腹腔注射致敏后以OVA耳内激发制成OME模型，c组耳内激发以磷酸盐缓冲液（phosphateBufferedSaline，PBS）替代OVA。IL-18干预组大鼠，于OVA全身致敏及耳内激发的同时，在第1、2、7、8、15、16d给予重组大鼠IL-181μg加生理盐水0．2ml腹腔注射，对照组和OME模型组在相同时间点腹腔注射生理盐水0．2ml替代IL-18。采用HE染色切片观察各组大鼠中耳炎症细胞的变化，免疫组化染色检测中耳黏膜和骨髓腔中IL-4、IFN-γ、NF—KBp65的表达。结果B组中耳Thl型细胞因子IFN-γ含量较A组明显增高（P〈0．05），Th2型细胞因子IL-4含量较A组稍有增高（P，0．05），A组和B组IL一4含量均明显高于c组（P〈0．05）；Th2fFhl比值A与B组比较差异无统计学意义（P，0．05），但A组比值明显高于C组（Pc0．05）；NF-κBp65蛋白在中耳黏膜和骨髓腔中表达三组间存在显著差异（Pc0．05），B组NF-κBp65阳性细胞比率明显多于A组（Pc0．05），而A组明显多于C组（P〈0．05）。IL-18干预后OME大鼠中耳微环境中编码炎症介质基因表达的转录因子NF-κB活性明显增强，Th细胞过度活化，细胞因子过度分泌，其中IFN-γ合成显著增高，而IL-4合成也出现一定程度的增高，虽然一定程度上纠正了OME大鼠中耳微环境中的Th2／Thl免疫偏移，但是中耳变应性炎症并未得到根本缓解。结论IL-18对Th1和Th2细胞存在双向调节作用参与OME大鼠中耳变应性炎症反应：一方面，刺激Thl细胞�

简介：目的：对1名存在音位构音异常的人工耳蜗植入儿童进行音位/b/诱导训练，探讨其训练方法的科学性、有效性。方法结合音位诱导原则，分别采用捏鼻法、设备辅助与镜面起雾法、张嘴法、重读训练等方法进行音位诱导训练。结果患者成功诱导出音位/b/，且能正确说出含有/b/的词语和简单句子。结论在规范评估的基础上，运用科学的诱导方法是保证患儿康复效果的关键。

简介：NuclearfactorkappaB(NF-κB)isoneofthebest-characterizedtranscriptionfactorsplayingimportantrolesinmanycellularresponsestoalargevarietyofstimuli,includinginflammatorycytokines,phorbolesters,growthfactors,andbacterialandviralproducts.TheaimofthisstudyistodemonstrateNF-κBexpressioninthemousecochleaanditsenhancementinresponsetolipopolysaccharides(LPS)andkanamycin(KA)treatment.MethodsKAtreatmentconsistedofsubcutaneousKAinjectionsat700mg/kgtwiceadaywithaneight-hourintervalbetweenthetwoinjectionsfor3or7days.ForanimalsintheLPStreatmentgroup,asingledoseof0.3mgLPSdissolvedin0.2mlsterilesalinewereinjectedintobothbullaethroughthetympanicmembraneandkepttherefor3hours.Animalsinthecontrolgroupreceivedsubcutaneoussalineinjectionfor7days.Followingimmmunohistochemichalprocessingwithrabbitpolyclonalanti-NF-κBp65antibodies,cryosectionsofthecochleawereexaminedforexpressionofNF-κBp65invariousstructuresinthecochlea.ResultsNF-κBp65expression,identifiedbypresenceofbrownreactionproductscharacteristicofDABimmunohistochemistry,wasvisibleinthespiralligament,spiralprominence,tectorialmembrane(TM),spiralganglionandnervefibers.RelativelyweakNF-κBp65expressionwasalsovisualizedintheorganofCorti.WithintheorganofCorti,theinnerhaircells(IHC),outerhaircells(OHC),innerpillarcells(IP),outerpillarcells(OP),Deiter'scells(DC),andBoettcher'scellsexhibitedstrongerstainingthantheinnersulcuscells,Hensen'scells(HC)andClaudius'cells.NoNF-κBp65expressionwasseeninthenucleusoftheIHCandOHC.NF-κBp65expressionwasincreasedinanimalsexposedtoLPSorKA,demonstratingsignificantdifferencesinthestainingbetweencontrolanimalsandLPS/KA-treatedanimals.NF-κBp65expressionwasnotsignificantlydifferentbetweenLPStreatedandKAtreatedanimalsorbetween3and7daysinKA-treatedanimals.Conclusio

简介：目的探讨将小干扰RNA经鼓室注射导入小鼠内耳的可行性。方法选取三月龄健康小鼠，经鼓室注射荧光标记的小干扰RNA探针以及热休克蛋白70（HSP70）小干扰RNA，三日后经耳蜗冰冻切片及基底膜铺片，检测小干扰RNA进入内耳情况及外毛细胞中HSP70蛋白表达。结果鼓室注射荧光标记的小干扰RNA探针三Et即可被成功导入耳蜗组织，鼓室注射HSP70siRNA可抑制毛细胞内HSP70表达，与对照组相比有显著差异（p〈0．01）。结论小鼠鼓室注射小干扰RNA是一种有效的将小干扰RNA导人内耳尤其是毛细胞的方法，在毛细胞损伤机制研究中有一定应用价值。

简介：目的评价通过B超测量面肌厚度的方法诊断面肌萎缩的可行性，并测量青年人面肌厚度的正常值，分析面肌厚度正常值的相关因素。方法选取34名健康青年志愿者，记录所有志愿者的年龄、性别、身高、体重及头围5种相关因素，用B超按设定方法测量每位志愿者双侧的额肌、降口角肌和降口唇肌，对测量结果及5种相关因素进行统计学分析。并从34名志愿者中随机选取5名，在1周后和2周后分别重复测量3组面肌，比较3次测量结果有无差异。结果①34名志愿者经B超测量3组面肌厚度，双侧额肌、降嗣角肌和降口唇肌厚度无显著差异（P〉0．05）。面肌厚度平均值为：额肌左侧（1．60±0．21）mm，右侧（1．62±0．22）mm；降口角肌左侧（2．60±0．50）mm，右侧（2．62±0．51）mm；降口唇肌左侧（1．51±0．23）mm，右侧（1．52±0．23）mm。②随机选取的五5名志愿者重复测量3次，3次面肌厚度测量结果相近，无统计学差异（P〉0．05）。③按性别分组，女性18例，男性16例，组间比较：男性3组面肌厚度大于女性，差异有统计学意（P〈0．05）。④体重指数与所测量的3块面肌厚度呈正相关性（P〈0．05），额肌、降日角肌、降口屠肌与体重指数的相关系数分别为0．391、0．459及0．447；头围与面肌厚度无明显相关性。⑤选定的年龄段内（20-30岁）3组面肌厚度与年龄无相关性（P〉0．05）。证明20-30岁年龄段的青年人，面肌厚度不受年龄影响，该年龄段人群面肌厚度具有相对稳定性。结论①B超测量面肌厚度具有可重复性和很好的稳定性；②正常青年人（20-30岁）双侧额肌、降口角肌和降口唇肌厚度无明显差异：③不同性别的正常青年人（20-30岁）面肌厚度有明显差异，男性的额肌、降口角肌、降口唇肌均较女性厚；④正常青年人（20-30岁）面肌厚度跟体重指数呈正�

简介：《喉科手术学》2000年出版，2002年第2次印刷。近十年间随着医学技术飞跃发展，喉科手术也在不断更新及创新。为了适应新的形式，人民卫生出版社于2007年出版了《喉科手术学》第2版。此版主要围绕有关保留、改菩喉功能的理论，特别是新发展的手术为主要增修内容，增加了与保留和改善喉功能研究发展相关的喉及喉咽的解剖及生理：增补了保留或改善喉功能的手术、喉显微手术、喉咽癌激光手术、喉返神经单、双侧麻痹及喉手术后喉功能不良新发展的喉功能整复术、喉误吸手术、喉蹼切除术、喉肉芽肿切除术、杓状软骨脱位、骨折和固定的整复术：补充了喉气管狭窄，喉、喉咽和颈食管癌等新的手术方法；充实了甲状腺肿瘤手术，颈淋巴结清扫术内容，

简介：目的了解局部应用人重组表皮生长因子(rhEGF)对中耳创伤修复的影响和组织愈合特点.方法鼓膜创伤实验组中,30只豚鼠的鼓膜创伤面积为2mm×2mm,局部分别滴注rhEGF、生理盐水及空白对照;中耳黏膜创伤实验组中,将10只豚鼠的鼓膜紧张部切开,用小号中耳粘膜剥离子搔剥鼓室内侧壁粘膜,造成一个范围约为2×3mm的粘膜缺损区,中耳局部分别放置rhEGF明胶海绵粒和生理盐水明胶海绵粒.对两组豚鼠均进行预防性抗感染处理,并在不同时期用电耳镜、光镜及透射电镜对创面的愈合速度及鼓膜形态学的变化进行观察.结果鼓膜创伤实验组中,局部滴注rhEGF20耳的平均愈合时间为(8.5±3.0)d,局部滴注生理盐水20耳的平均愈合时间为(11.8±2.6)d,空白对照20耳的平均愈合时间为(12.8±2.3)d,局部滴注rhEGF的鼓膜创伤愈合速度明显快于生理盐水滴注耳及空白对照耳(P＜0.001);滴注rhEGF的鼓膜在创伤后2周时外层的鳞状上皮已增生覆盖创面,内层的扁平上皮增生,两层上皮间未见明显组织结构;滴注生理盐水的鼓膜在创伤后2周时创面见少量鳞状上皮及肉芽疤痕组织;滴注rhEGF耳和滴注生理盐水耳的鼓室黏膜结构均正常.中耳黏膜创伤实验组中,rhEGF滴注耳中有5耳的鼓室粘膜的上皮增生,覆盖部分创伤区表面,创伤区内见纤维组织增生;而滴注生理盐水耳中创伤区胶原纤维组织增生,其表面未见上皮被覆.结论rhEGF能促进创伤鼓膜的组织恢复,对鼓室黏膜的组织形态未造成不良的影响,且中耳局部应用rhEGF后,在短期内不会引起组织钙化及疤痕增生.

简介：TheGJB2gene(connexin26)hasbeenshowntoberesponsibleforDFNB1andDFNA3.WescreenedtheGJB2genein488patientswithprelingualdeafness(Group1),124withpostlingualdeafness(Group2),and117normalhearingsubjects(Group3).Wefoundthat,inGroup1,65patients(13.32%)werehomozygotesorcompoundheterozygotesand51patients(10.45%)carriedasinglepathogenicmutation.The235delCmutationwasthemostfrequentmutation,accountingfor73.22%oftheknownpathogenicallelesinGroup1.NohomozygotesorcompoundheterozygotesweredetectedinGroup2orGroup3.Somepostlingualdeafpatients(2.42%)andnormalhearingsubjects(4.27%)were235delCcarriers.Ourpreliminarydataindicatethat235delC,themostfrequentmutationidentifiedinthisstudy,isamajorcauseforprelingualdeafness.

简介：1氨基甙类药物及其耳毒性以庆大霉素为主的氨基甙类药物为广谱抗生素，于临床应用已有六十余年。这类抗生素可用于多种细菌感染性疾病，包括术前术后用药和肺结核的治疗”，在国内多用于治疗由革兰氏阴性杆菌引起的脑膜炎以及中或重度肠道感染，而在欧美国家则用于防止早产新生儿败血症。

简介：Thedevelopmentandplasticityofcentralauditorysystemcanbeinfluencedbythechangeofperipheralneuronalactivity.However,themolecularmechanismparticipatingintheprocessremainselusive.Brain-derivedneurotrophicfactor(BDNF)bindingwithitsfunctionalreceptortropomyosinreceptorkinaseB(TrkB)hasmultipleeffectsonneurons.Hereweusedaratmodelofauditorydeprivationbybilateralcochlearablation,toinvestigatethechangesinexpressionofBDNFandTrkBintheauditorycortexafterauditorydeprivationthatoccurredduringthecriticalperiodforthedevelopmentofcentralauditorysystem.Reversetranscription-quantitativepolymerasechainreaction(RTqPCR)andimmunohistochemistrymethodswereadoptedtodetectthemRNAandproteinexpressionlevelsofBDNFandTrkBintheauditorycortexat2,4,6and8weeksaftersurgery,respectively.ThechangeintheexpressionofBDNFandTrkBmRNAsandproteinsfollowedsimilartrend.Inthebilateralcochlearablationgroups,theBDNF-TrkBexpressionlevelinitiallydecreasedat2weeksbutincreasedat4weeksfollowedbythereductionat6and8weeksaftercochlearremoval,ascomparedtotheage-matchedshamcontrolgroups.Inconclusion,theBDNF-TrkBsignalingisinvolvedintheplasticityofauditorycortexinanactivity-dependentmanner.

简介：目的氨基糖苷类抗生素的分离和鉴定距今已70多年，对治疗严重革兰阴性菌感染，如肠球菌和结核杆菌感染有着强大的功效。然而，随着氨基糖苷类抗生素用药疗程的延长或（和）剂量的增加往往导致。肾毒性和耳毒性，阻碍了其在临床上的广泛应用。由于非耳毒性抗生素也具有较广的抗菌谱，用于许多系统感染性疾病的治疗，使得曾经作为优先选择使用的氨基糖苷类抗生素逐渐被取代。然而现在，氨基糖苷类抗生素处于一个潜伏的复兴时期，正逐渐用于治疗对大多数一线抗生素耐受生物所引起的严重性感染，如多重耐药结核、复杂性院内获得性急性尿路感染等。氨基糖苷类抗生素使用的增加，再次向科学家和医生提出了挑战，即。肾毒性和耳毒性的问题，尤其该类抗生素导致的耳聋对于具有遗传易感性的患者往往是极重度且不可逆转的。基于这个原因，在过去二十年里，科学家提出了很多种分子治疗策略与氨基糖苷类抗生素导致的耳毒性副作用相抗衡。本文主要概述了：①氨基糖苷类药物杀菌的分子机制，②氨基糖苷类抗生素如何导致具有遗传易感倾向的患者发生耳毒性，③到目前为止，在临床实验和，或临床上已被证明的能阻止和调节氨基糖苷类耳毒性的药物和化合物，④减少氨基糖苷类抗生素剂量来减少耳毒性的发生率。

简介：遗传性耳聋包括非综合征型耳聋non—syndromichearingimpairment，NSHI）和综合征型耳聋（syndromichearingimpairment，SHI），其中NSHI占70％，，遗传缺陷是以感音神经性聋为主，基本无其他异常；SHI占30％，临床表现除听力障碍以外还伴有其他症状和体征。迄今为止，发现400多个遗传性综合征与耳聋有关，140多个基因位点与NSHI有关，确定60多个耳聋基因。

简介：摘要目的探讨肋骨隐匿性不全骨折分布特点与MSCT容积扫描及后处理重组技术对隐匿性不全骨折的诊断价值。方法随机选择40例胸部外伤患者，经多层螺旋CT扫描后，运用工作站多种后处理重组技术，总结肋骨隐匿性不全骨折的分布特点，探讨多层螺旋CT对肋骨隐匿性不全骨折的诊断价值。结果40例胸部外伤患者发现隐匿性不全骨折25处，其中22处分布于肋骨前段或腋前段，1处分别于后段，2处位于腋段。结论肋骨隐匿性不全骨折主要分别于肋骨前段或腋前段，MSCT容积扫描并后重组技术能有效提高肋骨隐匿性不全骨折诊断符合率。

简介：WehavedeliveredviralvectorscontainingeitherChop2fusedwithGFP,Channelrhodopsin-2(ChR2),orHalorhodopsin(HaloR)fusedwithmCherry(toformlightgatedcationchannelsorchloridepumps,respectively),intothedorsalcochlearnucleus(DCN).OnetoeighteenmonthslaterweexaminedtheCNandinferiorcolliculus(IC)forevidenceofvirallytransfectedcellsandprocesses.ProductionofChR2andHaloRwasobservedthroughouttheDCN.Rhodopsinlocalizationwithinneuronswasdetermined,withelongate,fusiformandgiantcellsidentifiedbasedonmorphologyandlocationwithintheDCN.ProductionofChR2andHaloRwasfoundatboththeinjectionsiteaswellasinregionsprojectingtoandfromtheDCN.LightdrivenneuronalactivityintheDCNwasdependentuponthewavelengthandintensityofthelight,withonlytheappropriatewavelengthresultinginactivationandhigherintensitylightresultinginmoreneuronalactivity.Transfectingcellsviaviraldeliveryofrhodopsinscanbeusefulasatracttracerandasaneuronalmarkertodelineatepathways.Inthefuturerhodopsindeliveryandactivationmaybedevelopedasanalternativetoelectricalstimulationofneurons.

简介：1耳科常用激光激光是继原子能、计算机以及半导体之后,人类的又一重大发明。因其前所未有的高能量、高精确性等特点,激光自发明伊始即被广泛应用于包括临床医学在内的各个领域。在耳科学领域,空间狭小、组织功能脆弱等特征使得耳科手术始终充满了挑战。近年来,随着显微设备、激光设备及手术技术的不断进步,激光技术在耳科学的应用日趋普及并取得了巨大的成功。

简介：摘要目的观察钛颗粒刺激人血单个核细胞(peripheralbloodmonocytes,PBMC)表达HMGB1、MIF的情况，为临床防治膝关节置换术后无菌松动提供新的思路和方法。方法培养人血单个核细胞，用培养液、钛颗粒及LPS刺激，通过ELISA方法检测HMGB1、NF-?B和MIF表达。结果将分离得到的人血单个核细胞培养后分为3组，分别为空白对照组(PBMC+培养液)、钛颗粒组(0.1%钛颗粒+PBMC+培养液)、阳性对照组(LPS+PBMC+培养液)，观察24h后，采用ELISA方法测定HMGB1、NF-?B和MIF表达情况。采用SPSS13.0进行统计学分析，检验水准为?=0.05。结果HMGB1在钛颗粒刺激下表达6.73±0.19ng/ml，空白组表达为1.86±0.24ng/ml，两组对比差异有统计学意义（p=0.000<0.01），阳性组表达为7.51±0.32ng/ml，与钛颗粒组比较差异无统计学意义（p>0.05）；MIF在钛颗粒刺激下表达7.74±0.19ng/ml，空白组表达为3.93±0.11ng/ml，两组对比差异有统计学意义（p=0.000<0.01），阳性组表达为9.16±0.55ng/ml，与钛颗粒组比较差异无统计学意义（p>0.05）；NF-?B在钛颗粒刺激下表达18.76±1.15，空白组表达为9.57±1.38ng/ml，两组对比差异有统计学意义（p=0.02<0.05），阳性组表达为20.31±1.02ng/ml，与钛颗粒组比较差异无统计学意义（p>0.05）；结论钛颗粒刺激人血单个核细胞激活NF-?B通路，且HMGB1、MIF作为免疫炎性因子合成释放增多，参与膝关节置换术后关节无菌松动的发生发展。

简介：MutationsinGJB2genearethemostfrequentlyfoundmutationsinpatientswithnonsyndromichearingimpairment.However,thespectrumandprevalenceofmutationsinthisgenevaryamongdifferentethnicgroups.InChina,30,000infantsarebornwithcongenitalhearingimpairmentannually.Inordertoprovideappropriategenetictestingandcounselingtothefamilies,weinvestigatedthemolecularetiologyofnonsyndromicdeafnessin103unrelatedschoolchildrenattendingNantongSchoolfortheDeafandMuteinJiangsuProvince,China.ThecodingexonoftheGJB2genewasPCRamplifiedandsequenced.SixtytwoGJB2mutantalleleswereidentifiedin35.9%(37/103)ofthepatients.Twentyfivepatientscarriedtwopathogenicmutationsand12patientscarriedonemutantallele.The235delCwasthemostcommonmutationaccountingfor69.4%(43/62)ofGJB2mutantalleles.TheGJB2mutantallelesaccountedfor30.1%(62/206)ofallchromosomesresponsiblefornonsyndromichearingimpairment.Testingofthe3mostprevalentdeleteriousframeshiftmutationsinthiscohortdetected100%ofallGJB2mutantalleles.TheseresultsdemonstratethataneffectivegenetictestingofGJB2geneforpatientsandfamilieswithnonsyndromichearingimpairmentispossible.