简介:目的:从海参体壁组织中分离提取蛋白酶体,研究其酶学性质。方法:新鲜海参组织经匀浆、Tris-HCl缓冲液浸提后得到粗提物,再经(NH4)2SO4盐析、二乙氨乙基葡聚糖纤维素和丙烯葡聚糖凝胶S-300分离纯化后得到海参蛋白酶体。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其分子质量200ku。结果:海参蛋白酶体特异性最强的检测底物Boc-GAA-MCA,最适pH8.0,最适反应温度45℃。40℃时蛋白酶体活性稳定,在1h的孵育过程中呈现一定的热激活效应。在50~60℃,酶活力随孵育时间的延长迅速下降。K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+均可明显抑制其活性。抗痛素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮及E-64均可显著抑制该蛋白酶体活性。结论:海参体壁蛋白酶体具有典型的蛋白酶体的复合型活性,其中胰蛋白酶样活性较强,之后是糜蛋白酶样活性,而肽基谷氨酰肽水解酶样活性最弱。
简介:在电子商务领域“火”了若干年的“双十一”,终于在2013年火到了传统的白酒行业。11月11日当天,以洒仙网为代表的酒类电子商务网站单日销售额达到221亿元就是证明——一年前的11月11日,洒仙网单日销售额不过6000余万元——虽然这一数字天猫商城350亿元的销售总额相比还相去甚远,但在酒仙网董事长郝鸿峰看来,更大的变化在于酒类企业和经销商对电子商务态度的转变,“去年参与‘双十一’的酒类企业(供应商)只有七八家,但是今年已经有上百家企业(供应商)参与到我们的活动里,这才是让我们惊喜的。”正因如此,郝鸿峰更愿意将2013年的“双十一”看作“中国酒类电商元年”。