简介:本研究报道了以紫外诱变结合化学诱变方法选育一株高产色素低产桔霉素的红曲菌种.通过平板分离的方法从红曲米中分离红曲菌种,挑选出一株产色价较高,产桔霉素较低的菌种CG009;以CG009为出发菌种进行紫外诱变,使用紫外线照射孢子悬液90s,而后进行分离筛选得到一株突变株CG009-UV-1,其产桔霉素比出发菌株降低了87.7%,而色价基本没有太大的变化;以CG009-UV-1为出发菌株进一步使用硫酸二乙酯诱变,采用5%浓度的硫酸二乙酯处理CG009-UV-1的孢子悬液,经分离筛选得到一株突变株CG009-UV-D-9,与出发菌株CG009相比桔霉素降低93.3%,与CG009-UV-1相比桔霉素降低45.2%,产色素能力未降低.对筛选到的菌种CG009-UV-D-9进行遗传稳定性试验,检测其产色素和桔霉素情况.结果显示:经过10次传代实验,所产红曲米色价基本稳定在5000u左右,桔霉素含量均低于1mg/kg,与原始菌种相比较桔霉素含量降低了90%以上.
简介:目的建立椰毒假单胞菌酵米面亚种荧光标记扩增片段长度多态性(FAFLP)分型方法,并对4株模式菌株和19株分离菌株进行分型。方法选用4种低频限制性内切酶(ApaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ和PstⅠ)和2种高频限制性内切酶(MseⅠ和TaqⅠ)进行组合,对FAFLP预扩增和选择性扩增体系进行优化,用BioNumerics软件对分离株的指纹图谱进行聚类分析,并与VITEK2GN生化结果和16SrDNA序列分析进行比较。结果ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为7个群,菌株间最低相似度为80.85%,最高相似度为98.77%。PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合将19株椰毒假单胞菌酵米面亚种分为10个群,菌株间最低相似度为48.68%,最高相似度为99.67%。两种FAFLP组合均能将菌株进行完全区分,而VITEK2GN和16SrDNA序列分析无法将菌株进行完全区分。结论ApaⅠ-G/TaqⅠ-G组合与PstⅠ-T/TaqⅠ-G组合FAFLP对椰毒假单胞菌酵米面亚种具有足够的分辨率,本研究建立的FAFLP分型方法可应用于椰毒假单胞菌酵米面亚种的分子分型和溯源。