简介:摘要目的构建雌激素受体α配体结合域(ERα-LBD)表达载体,优化表达条件得到可溶性ERα-LBD蛋白。方法在Addgene网站检索关键词ESR(雌激素受体,estrogen receptor),选择符合条件的质粒载体pcDNA-HA-ER WT(Addgene plasmid # 49498; http://n2t.net/addgene:49498; RRID:Addgene_49498),设计引物并扩增得到目的片段ERα-LBD,分别构建蛋白表达载体pET-28a-LBD和pGEX-4T1-LBD,改变诱导温度、异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)浓度以及诱导时间对表达条件优化。待细菌裂解并提取蛋白后进行凝胶电泳,可在细菌上清的泳道中观察到明显的紫色蛋白表达条带,即为可溶性ERα-LBD蛋白。结果pET-28a-LBD重组质粒未能表达重组蛋白ERα-LBD,重组质粒pGEX-4T1-LBD在Rosetta和BL21(DE3)感受态中以1 mmol/L IPTG诱导仅能得到包涵体;以0.2 mmol/L IPTG 16 ℃过夜诱导培养,则可得到可溶性ERα-LBD蛋白。结论成功构建ERα-LBD表达载体并优化诱导表达条件,获得可溶性ERα-LBD蛋白。
简介:摘要:目的 探讨干细胞培养所需饲养层的制备方法。 方法 采用胰蛋白酶消化法,将小鼠胚胎制成细胞悬液接种培养。用丝裂霉素 C处理 MEF细胞制备饲养层,观察处理后的细胞活力及有无再增殖现象。结果 采用 0.0625% 胰蛋白酶消化小鼠胚胎组织获得高活力的 MEF细胞,用丝裂霉素 C处理前后 MEF细胞无明显增值,细胞活力在 90%以上。结论:该方法可获得高活力的 MEF细胞。丝裂霉素 C处理后的 MEF细胞种植到明胶包被的 6孔板中,在 1周内可用于干细胞的培养。
简介:摘要目的探讨Simodont虚拟仿真系统中虚拟涡轮机机头的辅助光照对实际操作的影响,为口腔临床技能训练提供指导。方法选取四川大学华西口腔医学院口腔医学专业本科生56人为研究对象,按随机数表法随机分为两组,实验组(虚拟仿真牙科训练机的涡轮机头的辅助灯处于打开状态)和对照组(虚拟仿真牙科训练机的涡轮机头的辅助灯处于关闭状态)的学生分别使用Simodont虚拟仿真系统在不同辅助光照情况下进行练习和考核,并在临床冷光灯条件下使用玻璃板模拟临床操作,采用t检验对比分析两组的得分。并通过问卷调查了解学生的使用体验。结果不同辅助光照条件下,Simodont虚拟训练机操作总分(t = 1.342,P = 0.181)和临床冷光灯条件下玻璃板的操作结果(t = -0.585,P = 0.561)差异均无统计学意义;但Simodont总分构成项中"Leeway sides(洞缘偏差)"项有光组学生分数为5.38 ± 4.69,大于无光组分数(4.32 ± 2.92),差异有统计学意义(t = 2.252,P = 0.025)。结论尚不能认为Simodont系统在有辅助灯的条件下可以影响医学生的培训效果,但在有辅助照明的情况下操作可能更容易误碰到规定区域边界的侧方。问卷结果显示,Simodont虚拟仿真系统是一种值得推广的教学模式。
简介:摘要目的考察不同的培养基、培养温度、培养时间对透析液和透析用水细菌菌落数监测结果的影响。方法每月采集一次两家三甲医院血液透析液和透析用水,分别接种胰化蛋白胨葡萄糖(TGEA)培养基、胰酪大豆胨琼脂(TSA)培养基、R2A琼脂(R2A)培养基,置于20℃和35℃分别培养3、5和7 d,统计细菌菌落生长情况并计数。结果培养时间、培养基种类对透析液细菌菌落数有显著影响(P<0.05),培养温度对透析液细菌菌落数无显著影响(P>0.05),培养时间、培养基、培养温度对透析用水细菌菌落数均无显著影响(P>0.05)。结论透析液的最优培养条件是R2A培养基置于20℃培养7 d,透析用水的最优培养条件是TGEA培养基置于20℃培养7 d,TGEA培养基与R2A培养基之间无显著差异。考虑实验的实操性,建议透析液和透析用水的培养条件统一为R2A培养基置于20℃培养7 d。
简介:摘要目的探讨积极与消极情绪状态对条件化恐惧反应及恐惧相关线索记忆的影响。方法招募48名在读本科生作为本研究被试。第1天(Day1),在无情绪诱导的情况下,以强噪音作为无条件刺激,以动物或果蔬图片作为条件化刺激,对48名被试进行条件化恐惧习得训练;第2天(Day2),所有被试按男女比例匹配的原则分为三组:中性组(n=16)、积极组(n=16)、消极组(n=16)。先利用中性、积极与消极情绪视频诱导三组被试分别产生不同的情绪状态,再进行与第1天相同的条件化恐惧习得训练。第3天(Day3),随机呈现动物或果蔬图片,考察被试对条件化恐惧线索的皮肤电反应及再认率。结果积极组被试对条件化恐惧线索的皮肤电反应在情绪诱发后[(0.091±0.026)μs]低于情绪诱发前水平[(0.148±0.027)μs],差异有统计学意义(P<0.05)。积极情绪诱发后(0.49±0.03),被试对条件化恐惧线索的再认正确率低于中性组(0.61±0.04),差异有统计学意义(P<0.05)。在消极情绪状态下,被试对恐惧线索的再认反应时高于积极主组和中性组[中性组、积极组与消极组在Day 2的再认反应时分别为(914.17±43.66)ms,(953.72±37.76)ms,(1 483.49±157.64)ms,P<0.01]。结论积极情绪状态不但显著降低了对恐惧线索的皮肤电反应,还降低了对恐惧线索的再认水平;而消极情绪状态只增加了再认时的记忆提取时间,对恐惧相关线索的生理唤醒反应与再认率无明显作用。
简介:【摘要】目的:分析不同条件保存 24小时尿液对生化检测的影响 。方法:一共收集我院接受患者尿液 20 份,将其分成平均 4 组,每组 5 份,分别给予四种不同的条件保存方式进行处理,其中主要包括冷藏、常温、常温添加浓盐酸以及常温添加硼酸。主要检测的指标包括 肌酐( CR )、尿酸( UA )、钾( K+ ) 。 结果:冷藏的检测结果为 7532.34±2.48、 2489.15±2.41、 36.08±0.13,常温的检测结果为 7531.24±2.19、 2491.16±2.51、 36.04±0.11,常温添加浓盐酸的检测结果为 7315.24±2.47、 1283.48±2.34、 35.84±0.11,常温添加硼酸的检测结果为 7301.12±2.53、 2583.31±2.15、 35.71±0.31,对比发现冷藏与常温之间差异不显著, P>0.05 。冷藏与常温添加浓盐酸以及常温添加硼酸相比差异均较大, P<0.05 。 结论:不同条件保存 24小时尿液对生化检测的影响作用不同,
简介:摘要目的调查急诊科护士情绪劳动现状,分析急诊科护士情绪劳动对工作投入的影响。方法采用便利抽样法,2018年5—8月,选取6所北京市三级综合医院448名急诊科护士为研究对象。采用一般资料调查表、护士情绪劳动量表(Emotional Labor Scale,ELS)、工作投入量表(Utrecht Work Engagement Scale,UWES)对其进行调查。采用SPSS 22.0统计软件进行数据录入与分析,采用t检验、方差分析、Pearson相关分析进行单因素分析,采用多因素分层回归分析进行影响因素分析。结果448名急诊科护士ELS总均分为(3.94±0.75)分,UWES总均分为(3.43±0.69)分。不同性别、职务的急诊科护士工作投入量表得分差异有统计学意义(t值分别为-2.048、-4.553;P<0.05)。Pearson相关分析显示,急诊科护士ELS中的表层扮演、情绪表达要求维度与UWES的各维度呈负相关(r值为-0.108~-0.330,P<0.05),ELS中的深层表达维度与UWES的各维度呈正相关(r值为0.220~0.256,P<0.01)。分层回归分析显示,深层表达对工作投入有正向预测作用,表层扮演对工作投入有负向预测作用,两者共解释工作投入总变异的17.9%。结论三级综合医院急诊科护士情绪劳动处于中等水平,护理管理者需重视护士情绪劳动状况,通过改善情绪劳动状态,可提升护士工作投入水平,改善护理服务质量。
简介:摘要目的利用条件性重编程细胞(CRC)技术培养人源性前列腺癌细胞,为前列腺癌体外实验研究建立个体化原代细胞库。方法2019年1—4月共获取3例新鲜的前列腺癌病理组织标本,将标本分为2份,一份经术中快速冰冻病理检查确定为癌组织;另一份用0.25% EDTA酶消化为分散的悬浮单个的癌细胞,利用CRC技术对癌细胞进行培养。培养方法:将原代细胞与经30 Gy照射的3T3-J2小鼠成纤维细胞共培养于条件性培养基中,观察癌细胞克隆团生长情况。使用差异性消化对原代细胞进行传代:先用0.25% EDTA胰酶消化1 min去除饲养层细胞,PBS清洗后再用0.25% EDTA胰酶消化原代细胞。待癌细胞稳定后,通过免疫荧光、免疫组化染色、免疫印迹和荧光原位杂交技术等实验,验证所培养的癌细胞性质。结果体外利用CRC技术建立3例前列腺癌原代细胞株,细胞培养约15 d建系成功,并可持续稳定传代。细胞鉴定结果显示,所培养的细胞均表达AR、CK5、CK18和P504s,同时也弱表达PSA。荧光原位杂交技术显示细胞出现≥1.6%的TMPRSS2/ERG基因融合,这些现象符合前列腺癌的细胞特征。结论利用CRC技术能稳定地体外持续培养前列腺癌原代细胞。
简介:摘要目的探讨情绪劳动在ICU护士职业价值观与工作倦怠间的中介作用,为减轻ICU护士工作倦怠、调动其工作积极性提供参考。方法采用便利抽样法,2017年6—7月选取南昌市3所综合性三级甲等医院的276名ICU护士为研究对象,使用一般资料调查问卷、护士情绪劳动量表、职业价值观量表及工作倦怠量表对其进行调查,采用结构方程模型探讨情绪劳动在职业价值观与工作倦怠间的中介效应。结果共发放问卷276份,有效问卷249份。249名ICU护士情绪劳动条目均分为(3.55±0.45)分,职业价值观条目均分为(3.63±0.41)分,工作倦怠3个维度条目均分分别为情感耗竭(2.77±1.07)分、去人格化(1.54±1.26)分、个人成就感(3.78±1.16)分。结构方程拟合指数χ2/df=1.155,拟合优度指数(GFI)=0.976,调整拟合优度指数(AGFI)=0.942,近似误差均方根(RMSEA)=0.027。ICU护士的职业价值观、情绪劳动均对其工作倦怠具有直接预测作用,职业价值观还以其情绪劳动为中介变量,间接影响工作倦怠。结论护理管理者可从个体自身因素层面通过提升ICU护士的职业价值观水平、优化其情绪劳动策略选择来减轻护士的工作倦怠。