简介：摘要目的本研究旨在探讨微小RNA(miR)-376b-3p和miR-654-5p在大肠癌中的表达水平及其临床意义。方法荧光定量PCR检测34组来自2018年6月至2019年1月淮安市肿瘤医院大肠癌及癌旁组织中miR-376b-3p和miR-654-5p的表达。利用肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析miR-376b-3p和miR-654-5p的表达与大肠癌患者临床病理因素以及生存预后的关系。应用SPSS 17.0软件对所有结果进行统计分析。结果相对于癌旁组织，大肠癌组织中miR-376b-3p表达下调，miR-654-5p表达上调，差异有统计学意义(P<0.001)。miR-376b-3p表达的降低和miR-654-5p表达的升高与肿瘤的转移和临床分期密切相关。此外，单因素分析结果显示miR-376b-3p的低表达或miR-654-5p的高表达的大肠癌患者总体生存率较低，差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析发现miR-376b-3p低表达和miR-654-5p高表达是大肠癌患者预后差的独立预测因子。结论miR-376b-3p的低表达和miR-654-5p的高表达可能与大肠癌的发生、发展明显相关。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-330-3p对小鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的影响，并分析可能的机制。方法雄性C57BL/6小鼠80只，鼠龄7～8周，体重23～25 g，无特殊病原体，采用随机数字表法分为8组，再灌注2 h组、6 h组、12 h组、24 h组以及假手术组，miR-330-3p agomir组(术前注射miR-330-3p激动剂)、miR-330-3p antagomir组(术前注射miR-330-3p抑制剂)和阴性对照组(术前注射miRNA阴性对照)，每组10只。除假手术组外均制备肝脏IRI模型，聚合酶链反应、Western印迹、免疫组化检测miR-330-3p、磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(cleave caspase-1)及gasdermin D(GSDMD)等的表达。双荧光素酶报告验证miR-330-3p的靶基因。采用miR-330-3p模拟物或抑制序列、miRNA阴性对照、PGAM5干扰RNA(siRNA)和干扰序列的阴性对照转染AML12细胞，然后检测PGAM5、Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、cleave caspase-1、GSDMD的表达。结果小鼠肝脏缺血再灌注过程中，miR-330-3p相对表达量降低，而PGAM5相对表达量增高。miR-330-3p agomir组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)均低于阴性对照组，而miR-330-3p antagomir组ALT、AST高于阴性对照组，差异均有统计学意义(均P<0.05)。与阴性对照组比较，miR-330-3p agomir组小鼠肝组织中cleave caspase-1表达降低，而miR-330-3p antagomir组表达增加。双荧光素酶报告证实PGAM5是miR-330-3p靶基因。AML12细胞转染PGAM5 siRNA后PGAM5、NLRP3、cleave caspase-1、GSDMD蛋白相对表达为(0.24±0.09)、(0.12±0.07)、(0.15±0.07)、(1.08±0.08)，均低于干扰序列阴性对照组(1.17±0.14)、(0.36±0.09)、(0.68±0.09)、(1.36±0.08)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-330-3p可减轻小鼠肝脏IRI，其机制可能与miR-330-3p靶向抑制PGAM5介导的细胞焦亡有关。

简介：摘要目的观察叶青素对缺氧和复氧的人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡的影响并确定其下游靶点。方法将人肾皮质近曲小管上皮细胞HK-2分为7组，分别为对照组、缺氧和复氧模组(HR)组、HR+5 mg/L组、HR+10 mg/L组、HR+20 mg/L组、HR+NC组、HR+Mimics组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)实验、流式细胞术和原位缺口末端标记法(TUNEL)实验检测HK-2细胞增殖和凋亡。通过数据库预测微小RNA(miR)-22-3p转录因子，然后通过蛋白质印迹法(Western blot)实验和qRT-PCR实验分别检测CCCTC结合因子(CTCF)和miR-22-3p水平。通过单因素方差分析对相关结果进行统计分析。结果与HR组比较，叶青素显著提高缺氧和复氧处理的HK-2细胞的细胞活力(叶青素5 mg/L：61.72±4.93比43.94±4.42，P<0.01；叶青素10 mg/L：76.14±4.48比43.94±4.42，P<0.01；叶青素20 mg/L：85.62±4.97比43.94±4.42，F＝53.794，P<0.01)。此外，和HR组比较，叶青素显著抑制缺氧和复氧处理的HK-2细胞的凋亡率(叶青素5 mg/L：30.62±2.41比40.08±4.41，F＝63.998，P<0.05；叶青素10 mg/L：22.32±2.85比40.08±4.41，P<0.01；叶青素20 mg/L：13.88±2.09比40.08±4.41，P<0.01)以及TUNEL阳性细胞比(叶青素5 mg/L：21.19±1.86比27.62±3.10，P<0.05；叶青素10 mg/L：14.78±1.89比27.62±3.10，P<0.01；叶青素20 mg/L：10.11±2.19比27.62±3.10，F＝53.112，P<0.01)。进一步检测发现叶青素减轻缺氧和复氧导致的miR-22-3p(对照组：1±0.05，H/R组：0.27±0.06，叶青素5 mg/L：0.46±0.05，叶青素10 mg/L：0.63±0.05，叶青素20 mg/L：0.80±0.06，均P<0.01)和CTCF降低(对照组：1.00±0.04，H/R组：0.19±0.05，叶青素5 mg/L：0.39±0.07，叶青素10 mg/L：0.56±0.04，叶青素20 mg/L：0.72±0.06，F＝102.400，均P<0.01)。HR+Mimics组HK-2细胞细胞活力显著高于HR组(79±3.85比42.78±4.45，F＝117.224，P<0.01)，同时细胞凋亡率显著低于HR组(18.2±2.28比41.26±3.59，F＝104.770，P<0.01)，TUNEL阳性细胞比显著低于HR组(16.38±2.46比29.28±3.14，F＝54.042，P<0.01)。结论叶青素通过CTCF介导的miR-22-3p上调减轻缺氧和复氧诱导的人肾皮质近曲小管上皮细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)胸腺生成素反义RNA 1(TMPO-AS1)对食管癌细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法2016年6月至2019年12月，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测20例食管癌组织和癌旁组织中lncRNA TMPO-AS1和微小RNA(miR)-501-3p的水平，食管癌Eca109细胞分为lncRNA TMPO-AS1干扰组(转染si-NC和si-TMPO-AS1)；miR-501-3p过表达组(转染miR-NC和miR-501-3p)；lncRNA TMPO-AS1过表达组(转染pcDNA和pcDNA-TMPO-AS1)；lncRNA TMPO-AS1和miR-501-3p共抑制组(转染si-TMPO-AS1＋anti-miR-NC和si-TMPO-AS1＋anti-miR-501-3p)。噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术和Transwell实验分别检测食管癌Eca109细胞增殖、凋亡率、细胞迁移和侵袭能力，蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白水平，双荧光素酶报告系统验证lncRNA TMPO-AS1与miR-501-3p的调控关系。两组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差进行分析。结果食管癌组织组中的lncRNA TMPO-AS1水平(2.64±0.26)高于癌旁组织(1.00±0.09，t＝26.657，P<0.05)，miR-501-3p水平(0.44±0.04)低于癌旁组织(1.00±0.07，t＝31.063，P<0.05)；干扰lncRNA TMPO-AS1的Eca109细胞24 h增殖(0.36±0.03)低于si-NC组(0.39±0.03，t＝2.121，P<0.05)，48 h增殖(0.45±0.04)低于si-NC组(0.75±0.07，t＝11.163，P<0.05)，72 h增殖(0.57±0.05)低于si-NC组(1.16±0.09，t＝17.191，P<0.05)，迁移细胞数[(54.14±5.65)个]低于si-NC组[(113.02±9.87)个，t＝15.531，P<0.05]，侵袭细胞数[(47.69±5.01)个]低于si-NC组[(96.32±9.88)个，t＝13.169，P<0.05]，细胞凋亡率[(22.15±2.22)%高于si-NC组[(6.98±0.69)%，t＝19.576，P<0.05]；过表达miR-501-3p的Eca109细胞48 h增殖(0.51±0.05)低于miR-NC组(0.77±0.07，t＝9.067，P<0.05)，72 h增殖(0.65±0.06)低于miR-NC组(1.15±0.09，t＝13.867，P<0.05)，迁移细胞数[(61.23±6.33)个]低于miR-NC组[(115.25±9.25)个，t＝14.458，P<0.05]，侵袭细胞数[(53.14±5.33)]低于miR-NC组[(98.32±8.47)个，t＝13.543，P<0.05]，细胞凋亡[(19.58±1.74)%]高于miR-NC组[(7.23±0.77)%，t＝19.471，P<0.05]，差异均有统计学意义。结论lncRNA TMPO-AS1通过靶向miR-501-3p促进食管癌细胞的恶性生物学行为，可被视为食管癌患者的潜在治疗靶标。

简介：摘要目的观察心肌梗死(MI)大鼠心肌微小RNA(miR)-130a-3p的表达及其对心肌炎症的影响。方法使用随机数字法将雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、MI组、miR-130a-3p组(心肌注射miR-130a-3p mimics)和阴性对照组(心肌注射miR-130a-3p mimics阴性对照)，每组15只。心脏彩超测定左心室收缩末期内径(LVDs)、左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室长轴缩短分数(FS)、左心室射血分数(LVEF)；原位缺口末端标记法(TUNEL)法测定心肌凋亡指数；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肌钙蛋白T(TnT)、肌钙蛋白I(TnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β水平；反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定心肌组织miR-130a-3p、NOD样受体家族3炎症小体(NLRP3)的表达；蛋白质印迹法(Western blot)测定心肌组织B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和NLRP3的表达水平。各组间比较采用方差分析。结果MI组miR-130a-3p水平明显低于Sham组(t＝4.365，P<0.05)。miR-130a-3p组大鼠LVDs和LVDd低于MI组(t＝4.475、5.172、P<0.05)，FS和LVEF高于MI组(t＝3.679、5.442，P<0.05)。miR-130a-3p组血清TnT、TnI、CK-MB、NT-proBNP、TNF-α、IL-1β水平明显低于MI组(t＝4.265、5.382、3.976、4.436、7.246、4.854，P<0.05)。Sham、MI、阴性对照组和miR-130a-3p组凋亡指数依次为(5.14±0.62)%、(34.54±4.37)%、(35.27±4.55)%和(18.76±2.48)%，miR-130a-3p组凋亡指数低于MI组(t＝4.356，P<0.05)。miR-130a-3p组NLRP3 mRNA和bax蛋白、NLRP3蛋白相对表达量均低于MI组(t＝6.296、11.356、8.235，P<0.05)，bcl-2蛋白水平相对表达量高于MI组(t＝8.876，P<0.05)。结论miR-130a-3p在MI大鼠心肌组织中呈低表达，上调miR-130a-3p表达可以减轻MI大鼠心肌炎症和细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨血浆微小核糖核酸-101-3p(miR-101-3p)及微小核糖核酸-141-3p(miR-141-3p)在脓毒症患儿中的表达及其临床意义。方法选择2016年1月至2019年10月三亚市人民医院收治的153例脓毒症患儿，根据其病情严重程度分为脓毒症非休克组(94例)和脓毒症休克组(59例)；根据脓毒症患儿28 d的生存情况，将其分为存活组(107例)和死亡组(46例)，另选取60例健康儿童作为健康对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测所有研究对象血浆miR-101-3p及miR-141-3p表达水平。应用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆miR-101-3p、miR-141-3p及降钙素原(PCT)水平对脓毒症诊断及预后评估的价值。采用Pearson相关分析脓毒症患儿血浆miR-101-3p及miR-141-3p表达水平与PCT、急性生理和慢性健康Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分、序贯器官衰竭评分(SOFA评分)、白细胞计数及C反应蛋白水平的相关性。结果脓毒症休克组和脓毒症非休克组血浆miR-101-3p、miR-141-3p及PCT水平均高于健康对照组，差异均有统计学意义(均P<0.001)，且脓毒症休克组血浆miR-101-3p(4.25±1.46比1.86±0.75)、miR-141-3p(3.17±1.08比1.20±0.52)及PCT[(20.75±9.36) μg/L比(5.80±2.40) μg/L]水平均明显高于脓毒症非休克组，差异均有统计学意义(均P<0.001)。死亡组和存活组血浆miR-101-3p、miR-141-3p及PCT水平均明显高于健康对照组，差异均有统计学意义(均P<0.001)，且死亡组血浆miR-101-3p(4.83±1.62比1.40±0.58)、miR-141-3p(3.50±1.13比0.96±0.47)及PCT[(26.30±11.72) μg/L比(3.25±2.16) μg/L]水平均明显高于存活组，差异均有统计学意义(均P<0.001)。ROC曲线分析显示，miR-101-3p、miR-141-3p及PCT联合诊断脓毒症的曲线下面积(AUC)和95%可信区间(95%CI)明显高于miR-101-3p、miR-141-3p或PCT单独指标[0.908(0.850~0.970)比0.810(0.748~0.873)、0.784(0.723~0.844)、0.825(0.764~0.883)，Z1＝4.682、Z2＝5.380、Z3＝4.417，均P<0.05]，其敏感度为92.5%，特异度为84.0%。miR-101-3p、miR-141-3p及PCT联合预测脓毒症患儿死亡的AUC和95%CI明显高于miR-101-3p、miR-141-3p或PCT单独指标[0.930(0.872~0.986)比0.848(0.786~0.907)、0.792(0.730~0.853)、0.820(0.762~0.878)，Z1＝4.537、Z2＝5.728、Z3＝5.106，均P<0.05]，其敏感度为94.6%，特异度为87.0%。相关性分析显示，脓毒症患儿血浆miR-101-3p及miR-141-3p表达水平与PCT(r＝0.804、0.773，均P<0.001)、APACHE Ⅱ评分(r＝0.738、0.695，均P<0.001)及SOFA评分(r＝0.752、0.764，均P<0.001)均呈正相关。结论脓毒症患儿血浆miR-101-3p及miR-141-3p表达水平明显升高，与脓毒症患儿的严重程度相关，miR-101-3p及miR-141-3p联合PCT对儿童脓毒症诊断及预后评估具有较高价值。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达，观察其靶向调控线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)表达的能力及对卵巢癌细胞迁移和增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-4699-3p在卵巢癌细胞株(OVCAR-3、SKOV-3、HO-8910、OC3、A2780)和正常卵巢上皮细胞(IOSE80)中的表达。采用脂质体转染法分别将miR-4699-3p模拟物或阴性对照miR-NC转染至miR-4699-3p表达最低的细胞株，定义为实验组和对照组。qRT-PCR验证转染效率。生物信息学技术预测miR-4699-3p的候选靶基因，双荧光素酶报告基因实验鉴定其对靶基因的调控能力。qRT-PCR和Western blot检测MRPS23在mRNA和蛋白水平的表达变化。细胞计数法(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测miR-4699-3p对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达明显低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05)，在OVCAR-3细胞中的表达最低(P<0.01)。转染miR-4699-3p后，实验组OVCAR-3细胞中miR-4699-3p表达量显著升高(P<0.01)，证明转染成功。生物信息学软件预测，miR-4699-3p的候选靶基因可能是线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)，双荧光素酶报告基因实验证实miR-4699-3p可直接靶定MRPS23基因mRNA的3′-非翻译区(UTR)(P<0.01)。与对照组OVCAR-3细胞相比，实验组过表达miR-4699-3p后，MRPS23基因在mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)，细胞转移和细胞周期调控蛋白Twist、Slug、CDK6、Cyclin D3表达均降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞的增殖能力降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞迁移能力降低(P<0.01)。结论miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中低表达，上调OVCAR-3细胞中的miR-4699-3p表达可通过干扰MRPS23基因表达，抑制卵巢癌细胞增殖和迁移能力。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达，观察其靶向调控线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)表达的能力及对卵巢癌细胞迁移和增殖的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-4699-3p在卵巢癌细胞株(OVCAR-3、SKOV-3、HO-8910、OC3、A2780)和正常卵巢上皮细胞(IOSE80)中的表达。采用脂质体转染法分别将miR-4699-3p模拟物或阴性对照miR-NC转染至miR-4699-3p表达最低的细胞株，定义为实验组和对照组。qRT-PCR验证转染效率。生物信息学技术预测miR-4699-3p的候选靶基因，双荧光素酶报告基因实验鉴定其对靶基因的调控能力。qRT-PCR和Western blot检测MRPS23在mRNA和蛋白水平的表达变化。细胞计数法(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测miR-4699-3p对卵巢癌细胞增殖和迁移能力的影响。结果miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中的表达明显低于正常卵巢上皮细胞(P<0.05)，在OVCAR-3细胞中的表达最低(P<0.01)。转染miR-4699-3p后，实验组OVCAR-3细胞中miR-4699-3p表达量显著升高(P<0.01)，证明转染成功。生物信息学软件预测，miR-4699-3p的候选靶基因可能是线粒体核糖体蛋白S23(MRPS23)，双荧光素酶报告基因实验证实miR-4699-3p可直接靶定MRPS23基因mRNA的3′-非翻译区(UTR)(P<0.01)。与对照组OVCAR-3细胞相比，实验组过表达miR-4699-3p后，MRPS23基因在mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.01)，细胞转移和细胞周期调控蛋白Twist、Slug、CDK6、Cyclin D3表达均降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞的增殖能力降低(P<0.05)，OVCAR-3细胞迁移能力降低(P<0.01)。结论miR-4699-3p在卵巢癌细胞株中低表达，上调OVCAR-3细胞中的miR-4699-3p表达可通过干扰MRPS23基因表达，抑制卵巢癌细胞增殖和迁移能力。

简介：摘要目的观察微小RNA(miR)-142-3p靶向CD133对肝癌细胞增殖、侵袭和干细胞特性的影响。方法选取郑州大学第二附属医院2017年6月至2019年12月手术切除的肝癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁组织和肿瘤组织miR-142-3p表达水平。采用慢病毒在MHCC97H肝癌细胞建立miR-142-3p过表达和对照细胞系(miR-142-3p组和对照组)，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色分析两组细胞增殖；采用Transwell分析两组细胞侵袭；采用软琼脂克隆形成实验分析两组细胞干细胞特性；生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-142-3p靶基因；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析两组增殖、侵袭和干细胞标志物细胞核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、CD133和Nanog蛋白表达水平，组间比较采用t检验。结果miR-142-3p组细胞miR-142-3p表达水平(0.41±0.12)显著低于癌旁组织miR-142-3p表达水平(1.06±0.25)，差异有统计学意义(t＝3.081，P<0.05)。miR-142-3p组细胞吸光度(A)值(1.63±0.20)低于对照组细胞A值(2.13±0.22)，差异有统计学意义(t＝2.918，P<0.05)。miR-142-3p组细胞EdU染色阳性率[(30.48±5.12)%]低于对照组细胞EdU染色阳性率[(87.89±7.28)%]，差异有统计学意义(t＝3.409，P<0.05)。miR-142-3p组细胞Ki-67蛋白表达水平(0.50±0.13)低于对照组细胞Ki-67表达水平(1.15±0.14)，差异有统计学意义(t＝2.319，P<0.05)。miR-142-3p组细胞侵袭数量[(67.59±6.01)个]低于对照组细胞侵袭数量[(121.35±6.12)个]，差异有统计学意义(t＝3.409，P<0.05)。miR-142-3p组细胞MMP-9蛋白表达水平(0.48±0.18)低于对照组细胞MMP-9蛋白表达水平(1.57±0.15)，差异有统计学意义(t＝2.917，P<0.05)。miR-142-3p组细胞克隆形成率[(31.44±4.51)%]低于对照组细胞克隆形成率[(57.68±7.19)%]，差异有统计学意义(t＝5.103，P<0.05)。miR-142-3p组细胞Nanog蛋白表达水平(0.51±0.14)低于对照组细胞Nanog蛋白表达水平(1.36±0.17)，差异有统计学意义(t＝2.514，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因显示CD133是miR-142-3p的靶基因。miR-142-3p组细胞CD133蛋白表达水平(0.43±0.11)低于对照组细胞CD133蛋白表达水平(1.15±0.13)，差异有统计学意义(t＝2.514，P<0.05)。结论miR-142-3p通过靶向调控CD133表达水平调节着肝癌细胞增殖、迁移和干细胞特性。

简介：摘要目的探讨ST8SIA6-AS1靶向结合微小RNA(microRNA，miR)-142-3p，影响肝细胞癌的增殖和侵袭能力。方法用基因表达谱数据动态分析(GEPIA)验证ST8SIA6-AS1在肝细胞肝癌(HCC)和邻近正常组织中的差异表达。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ST8SIA6-AS1和miR-142-3p在组织水平和细胞水平的表达量。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验检测人肝癌细胞Hep3B的增殖情况；采用迁移侵袭实验(Transwell法)检测肝癌Hep3B细胞迁移和侵袭情况。生物信息学、双荧光素酶报告实验验证ST8SIA6-AS1与miR-142-3P的靶向关系。组间采用t检验，多组间采用单因素方差分析进行比较，相关性分析采用Spearman秩检验。结果GEPIA结果显示ST8SIA6-AS1在肝癌组织中的表达明显高于正常组织。RT-qPCR结果显示ST8SIA6-AS1在HCC中的表达明显高于癌旁组织(0.778±0.363比1.951±0.575，t＝11.370，P<0.05)，差异有统计学意义。miR-142-3p在肝癌组织的表达量显著低于癌旁组织(0.881±0.374比0.371±0.164，t＝9.395，P<0.05)，差异有统计学意义。ST8SIA6-AS1在4种人HCC细胞株(HepG2、SMMC-7721、HCCLM3和Hep3B)的表达(3.84±0.27、5.81±0.60、4.47±0.55、5.94±0.69)明显高于正常肝细胞株L02(1.00±0.09，t＝17.280，t＝13.730，t＝10.780，t＝12.300，P<0.05)，差异有统计学意义，ST8SIA6-AS1在敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞中的相对表达量低于对照组(0.26±0.04比1.00±0.01，t＝9.423，P<0.05)，差异有统计学意义。集落形成实验结果显示，敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞集落个数显著低于对照组[(32.60±6.70)个比(100.00±10.00)个，t＝10.040，P<0.05]，差异有统计学意义；CCK-8实验中敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞72 h吸光度(A)值低于对照组[(0.71±0.06)%比(1.14±0.09)%，t＝6.886，P<0.05]，差异有统计学意义。Transwell实验结果显示敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞垂直迁移率明显低于对照组[(53.38±6.49)%比(100.00±13.00)%，t＝5.641，P<0.05]，差异有统计学意义。敲低ST8SIA6-AS1的Hep3B细胞的侵袭率低于对照组[(44.98±8.42)%比(100.00±10.00)%，t＝7.485，P<0.05]，差异有统计学意义。双荧光素酶报告实验证实miR-142-3p过表达组明显低于对照组ST8SIA6-AS1-野生型(WT)细胞的荧光活性，ST8SIA6-AS1负向调控miR-142-3p的表达(0.42±0.05比1.00±0.09，t＝9.757，P<0.05)。干扰ST8SIA6-AS1的表达可对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭产生抑制作用，这种作用可通过沉默miR-142-3p发生逆转。结论ST8SIA6-AS1可通过竞争性结合miR-142-3p在肝癌中发挥致癌作用。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miR)-454-3p在结直肠癌细胞增殖和侵袭中的作用及其可能分子学机制。方法选取2019年6月1日至2019年8月31日于郑州大学第一附属医院原发性结直肠癌的患者19例肿瘤组织及其对应的癌旁组织标本。应用应用荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测样本中miR-454-3p的表达水平。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell实验评估结直肠癌细胞系CW-2、SW620细胞增殖和迁移侵袭能力。双荧光素酶报告基因验证miR-454-3p对下游靶基因BUB1蛋白的调控作用。组间采用配对样本t检验。结果与邻近正常组织比较，肿瘤组织中miR-454-3p表达上调(P<0.01)，通过CCK-8测定miR-454-3p-inhibitor细胞的增殖，发现其显著低于miR-454-3p-NC组细胞(P<0.05)。transwell实验表明，与对照细胞比较，转染miR-454-3p-inhibitor的CW-2、SW620细胞迁移更慢，侵袭性更小。双荧光素酶报告分析。结果显示，miR-454-3p模拟和BUB1-wt共转染组的荧光素酶活性相对低于BUB1-wt和NC共转染组，而BUB1-mut组没有观察到显著变化(P<0.01)。此外，RIP分析表明，与RIPIgG比较，转染miR-454-3p模拟物导致RIP-BUB1中BUB1的显著上调(P<0.01)。qRT-PCR实验表明结直肠组织中BUB1和miR-454-3p表达呈正相关(P<0.01)。结论miR-454-3p可通过靶向抑制BUB1基因的表达促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA核仁小RNA宿主基因8(lncRNA SNHG8)对肾癌细胞增殖、侵袭、迁移和顺铂敏感性的影响及其分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SNHG8和微小RNA(miR)-224-3p表达水平；蛋白质印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、细胞增殖核抗原Ki-67(Ki-67)、裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)和多药耐药基因1(MDR1)蛋白表达；四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率和顺铂半数抑制浓度(IC50)；Transwell检测细胞迁移和侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡；荧光素酶报告实验检测SNHG8和miR-224-3p的靶向关系。两组比较采用t检验。结果肾癌细胞系ACHN、786-O和A498中SNHG8高表达(1.05±0.09比4.58±0.47、6.19±0.52、5.37±0.48，t＝22.130、29.219、26.538，P<0.05)，miR-224-3p低表达(1.02±0.08比0.53±0.07、0.41±0.06、0.47±0.08，t＝13.829、18.300、14.584，P<0.05)。与si-con组相比，si-SNHG8组，肾癌细胞786-O中MMP-2、Ki-67、MDR1表达降低，cleaved Caspase-3表达升高，细胞存活率降低[(69.86±6.37)%比(96.42±9.26)%，t＝7.089，P<0.05]，迁移和侵袭数[(175.64±12.20)个比(292.70±20.45)个、(92.81±8.38)个比(147.24±15.93)个，t＝14.748、9.072，P<0.05]降低，凋亡率升高[(19.48±2.28)%比(4.28±0.64)%，t＝19.256，P<0.05]，顺铂IC50值降低(1.47±0.14比7.81±0.22，t＝19.454，P<0.05)。过表达miR-224-3p后，肾癌细胞786-O中MMP-2、Ki-67、MDR1表达降低，cleaved Caspase-3表达升高，细胞存活率降低[(67.36±8.65)%比(98.24±9.53)%，t＝7.198，P<0.05]，迁移和侵袭数[(155.81±16.67)个比(274.73±28.61)个、(72.96±8.35)个比(156.61±14.28)个，t＝10.774、15.170，P<0.05]降低，凋亡率升高[(18.49±2.28)%比(4.67±0.63)%，t＝17.527，P<0.05]，顺铂IC50值降低(1.79±0.15比6.72±0.26，t＝49.273，P<0.05)。结论沉默SNHG8可抑制肾癌细胞786-O增殖、迁移、侵袭，促进细胞凋亡，增强其对顺铂的敏感性；其机制可能与miR-224-3p有关。

简介：无

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)靶向微小RNA(miR)-130a-3p基因对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖及炎性因子分泌的影响。方法将中南大学湘雅医学院附属海口医院从2018年1月至2020年1月收治的OA患者30例纳入研究。分别采集OA以及正常软骨细胞，通过实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同软骨细胞中的lncRNA同源基因转录反义RNA(HOTAIR)以及miR-130a-3p表达水平。此外，于OA软骨细胞中转染siRNA-lncRNA HOTAIR或LV-lncRNA HOTAIR，采用细胞增殖实验(CCK-8)法完成细胞增殖情况的检测，并以RT-PCR法检测炎性因子分泌情况。计数资料以%表示，采用χ2检验。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示，采用t检验。结果OA软骨细胞中的lncRNA HOTAIR mRNA相对表达量为3.01±0.42，明显高于正常软骨细胞(1.08±0.23)，而miR-130a-3p mRNA相对表达量为0.48±0.11，明显低于正常软骨细胞(1.00±0.01)，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。转染si-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的增殖能力相较于转染si-NC组明显增加，而转染LV-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的增殖能力相较于转染LV-NC组显著下降，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。转染si-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的miR-130a-3p表达水平显著升高，而转染LV-lncRNA HOTAIR组OA软骨细胞的miR-130a-3p表达水平显著下降，且经Pearson相关分析显示，在OA软骨细胞中，lncRNA HOTAIR和miR-130a-3p表达水平呈明显负相关关系，差异有统计学意义(r＝-0.912，P<0.05)。转染si-lncRNA HOTAIR后的OA软骨细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ) mRNA相对表达量分别为0.47±0.10、0.52±0.13，均明显低于转染LV-lncRNA HOTAIR后(0.88±0.19、0.93±0.15)，差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论lncRNA HOTAIR通过靶向调控miR-130a-3p基因，继而影响OA软骨细胞的增殖，并具有一定的炎性反应调控作用。

简介：摘要目的探讨微小RNA-21-5p（miR-21-5p）是否具有抗人Ⅱ型肺泡上皮细胞（ATⅡ）凋亡的作用。方法体外培养人ATⅡ细胞，待细胞生长至光镜下可见层状体和微绒毛时用于实验。将细胞分为空白对照组（直接培养，不予任何处理）、过氧化氢（H2O2）损伤组（加入0.5 mmol/L H2O2）、miR-21-5p过表达组〔加入感染复数（MOI）为100的miR-21-5p慢病毒过表达载体与0.5 mmol/L H2O2共培养〕和空病毒对照组（加入miR-21-5p慢病毒空白载体与0.5 mmol/L H2O2共培养）。各组分别于细胞培养0、12、24、36、48 h采用细胞增殖及毒性检测试剂盒（CCK-8）检测细胞增殖情况；于培养24 h采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果①细胞增殖活性检测结果：随着细胞培养时间的延长，空白对照组细胞增殖活性逐渐增强，而加入0.5 mmol/L H2O2处理后细胞增殖活性则逐渐下降；但miR-21-5p过表达组细胞增殖活性较H2O2损伤组和空病毒对照组下降缓慢，48 h时细胞增殖活性明显高于H2O2损伤组和miR-21-5p空病毒对照组〔吸光度（A）值：0.295±0.005比0.184±0.005、0.169±0.002，均P<0.05〕。说明H2O2及慢病毒均加快了细胞损伤，而miR-21-5p可抑制细胞凋亡。②细胞凋亡检测结果：与空白对照组比较，加入0.5 mmol/L H2O2处理后细胞凋亡率明显升高；而miR-21-5p过表达组细胞凋亡率较H2O2损伤组和空病毒对照组均明显降低〔早期细胞凋亡率：（14.31±0.12）%比（24.50±0.12）%、（23.41±0.13）%，晚期细胞凋亡率：（8.12±0.13）%比（9.71±0.11）%、（10.41±0.15）%，总体细胞凋亡率：（22.33±0.12）%比（34.21±0.10）%、（33.82±0.14）%，均P<0.05〕，进一步证明miR-21-5p具有抗细胞凋亡作用。结论miR-21-5p具有抗人ATⅡ凋亡的作用。

简介：摘要目的研究微小RNA-296-3p对舌鳞状细胞癌（简称舌鳞癌）细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制。方法以正常口腔上皮黏膜角质细胞HOK为对照，实时定量聚合酶链反应法检测舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p和核蛋白1（NUPR1） mRNA的表达，蛋白印迹法检测NUPR1蛋白表达水平。CAL27细胞分为对照组（NC组）、miR-con组、miR-296-3p组、si-con组、si-NUPR1组、miR-296-3p+pcDNA组和miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组，细胞计数试剂盒8（CCK8）法检测细胞活性，Transwell检测细胞迁移和侵袭，蛋白印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证CAL27细胞中miR-296-3p与NUPR1的调控关系。结果与HOK细胞相比，在舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p的含量显著降低（0.54 ± 0.08、0.38 ± 0.05、0.59 ± 0.07比1.04 ± 0.12，t = 10.401、15.231、9.718，P均<0.05），NUPR1 mRNA （5.94 ± 0.40、4.48 ± 0.45、5.19 ± 0.48比0.94 ± 0.12，t = 35.918、22.803、25.769）和NUPR1蛋白（0.79 ± 0.09、0.54 ± 0.05、0.62 ± 0.08比0.28 ± 0.04，t = 15.535、12.182、11.404）表达量均显著升高（P均<0.05）。与NC组、miR-con组相比，miR-296-3p组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。与NC组、si-con组相比，si-NUPR1组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。miR-296-3p在CAL27细胞负调控NUPR1表达。与miR-296-3p+pcDNA组相比，miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组CAL27细胞活性（138.34 ± 5.73比98.54 ± 5.89，t = 14.530）、迁移数（95.28 ± 7.56比67.92 ± 5.23，t = 8.929）、侵袭数（184.53 ± 17.57比101.26 ± 10.64，t = 12.162）及PCNA （0.68 ± 0.07比0.35 ± 0.06，t = 10.738）、MMP-2（0.43 ± 0.05比0.29 ± 0.04，t = 6.559）和MMP-9（0.58 ± 0.06比0.33 ± 0.08，t = 7.500）的蛋白表达均升高（P均<0.05）。结论miR-296-3p通过靶向负调控NUPR1表达抑制舌鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的研究微小RNA-296-3p对舌鳞状细胞癌（简称舌鳞癌）细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在机制。方法以正常口腔上皮黏膜角质细胞HOK为对照，实时定量聚合酶链反应法检测舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p和核蛋白1（NUPR1） mRNA的表达，蛋白印迹法检测NUPR1蛋白表达水平。CAL27细胞分为对照组（NC组）、miR-con组、miR-296-3p组、si-con组、si-NUPR1组、miR-296-3p+pcDNA组和miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组，细胞计数试剂盒8（CCK8）法检测细胞活性，Transwell检测细胞迁移和侵袭，蛋白印迹法检测增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证CAL27细胞中miR-296-3p与NUPR1的调控关系。结果与HOK细胞相比，在舌鳞癌细胞系CAL27、SCC15和SCC9中miR-296-3p的含量显著降低（0.54 ± 0.08、0.38 ± 0.05、0.59 ± 0.07比1.04 ± 0.12，t = 10.401、15.231、9.718，P均<0.05），NUPR1 mRNA （5.94 ± 0.40、4.48 ± 0.45、5.19 ± 0.48比0.94 ± 0.12，t = 35.918、22.803、25.769）和NUPR1蛋白（0.79 ± 0.09、0.54 ± 0.05、0.62 ± 0.08比0.28 ± 0.04，t = 15.535、12.182、11.404）表达量均显著升高（P均<0.05）。与NC组、miR-con组相比，miR-296-3p组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。与NC组、si-con组相比，si-NUPR1组CAL27细胞活性、迁移数、侵袭数及PCNA、MMP-2和MMP-9的蛋白表达均降低（P均<0.05）。miR-296-3p在CAL27细胞负调控NUPR1表达。与miR-296-3p+pcDNA组相比，miR-296-3p+pcDNA-NUPR1组CAL27细胞活性（138.34 ± 5.73比98.54 ± 5.89，t = 14.530）、迁移数（95.28 ± 7.56比67.92 ± 5.23，t = 8.929）、侵袭数（184.53 ± 17.57比101.26 ± 10.64，t = 12.162）及PCNA （0.68 ± 0.07比0.35 ± 0.06，t = 10.738）、MMP-2（0.43 ± 0.05比0.29 ± 0.04，t = 6.559）和MMP-9（0.58 ± 0.06比0.33 ± 0.08，t = 7.500）的蛋白表达均升高（P均<0.05）。结论miR-296-3p通过靶向负调控NUPR1表达抑制舌鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

简介：摘要目的研究微小RNA（miR）-513a-3p调控己糖激酶2（HK2）对结直肠癌细胞增殖和糖代谢的影响。方法2019年5月至2020年2月分别用miR-513a-3p模拟物、miR-513a-3p抑制物和miR对照物转染结直肠癌SW480细胞，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-513a-3p在结直肠癌SW480细胞、正常结直肠细胞及各结直肠癌SW480细胞转染后的表达水平；CCK-8法检测miR-513a-3p对细胞增殖的影响；Brd/PI掺入实验检测miR-513a-3p对糖代谢的影响；蛋白质印迹法检测HK2表达水平。结果结直肠癌SW480细胞miR-513a-3p表达水平明显低于正常结直肠细胞（0.43 ± 0.06比1.00 ± 0.02），差异有统计学意义（t = 7.024，P = 0.003）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR对照物和转染miR-513a-3p抑制物（1.18 ± 0.24比0.45 ± 0.04和0.22 ± 0.03），转染miR对照物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR-513a-3p抑制物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显低于转染miR对照物，转染miR-513a-3p抑制物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显高于转染miR对照物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后葡萄糖摄取量及乳酸和硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）表达水平明显低于转染miR对照物（1.02 ± 0.04比1.90 ± 0.06、0.88 ± 0.03比1.45 ± 0.04和0.16 ± 0.02比0.86 ± 0.06），转染miR-513a-3p抑制物后葡萄糖摄取量及乳酸和TXNIP表达水平明显高于转染miR对照物（2.35 ± 0.09比1.90 ± 0.06、1.67 ± 0.08比1.45 ± 0.04和2.01 ± 0.15比0.86 ± 0.06），差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后HK2表达水平明显低于转染miR对照物（0.20 ± 0.01比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 8.367，P<0.05）；转染miR-513a-3p抑制物后HK2表达水平明显高于转染miR对照物（1.91 ± 0.07比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 4.279，P<0.05）。结论miR-513a-3p对于结直肠癌细胞的增殖和糖代谢有明显的抑制作用，并且其调控机制与miR-513a-3p抑制细胞中HK2蛋白的表达有关。

简介：摘要目的研究微小RNA（miR）-513a-3p调控己糖激酶2（HK2）对结直肠癌细胞增殖和糖代谢的影响。方法2019年5月至2020年2月分别用miR-513a-3p模拟物、miR-513a-3p抑制物和miR对照物转染结直肠癌SW480细胞，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-513a-3p在结直肠癌SW480细胞、正常结直肠细胞及各结直肠癌SW480细胞转染后的表达水平；CCK-8法检测miR-513a-3p对细胞增殖的影响；Brd/PI掺入实验检测miR-513a-3p对糖代谢的影响；蛋白质印迹法检测HK2表达水平。结果结直肠癌SW480细胞miR-513a-3p表达水平明显低于正常结直肠细胞（0.43 ± 0.06比1.00 ± 0.02），差异有统计学意义（t = 7.024，P = 0.003）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR对照物和转染miR-513a-3p抑制物（1.18 ± 0.24比0.45 ± 0.04和0.22 ± 0.03），转染miR对照物后miR-513a-3p表达水平明显高于转染miR-513a-3p抑制物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显低于转染miR对照物，转染miR-513a-3p抑制物24、48、72和96 h细胞增殖能力明显高于转染miR对照物，差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后葡萄糖摄取量及乳酸和硫氧还蛋白互作蛋白（TXNIP）表达水平明显低于转染miR对照物（1.02 ± 0.04比1.90 ± 0.06、0.88 ± 0.03比1.45 ± 0.04和0.16 ± 0.02比0.86 ± 0.06），转染miR-513a-3p抑制物后葡萄糖摄取量及乳酸和TXNIP表达水平明显高于转染miR对照物（2.35 ± 0.09比1.90 ± 0.06、1.67 ± 0.08比1.45 ± 0.04和2.01 ± 0.15比0.86 ± 0.06），差异均有统计学意义（P<0.05）。结直肠癌SW480细胞转染miR-513a-3p模拟物后HK2表达水平明显低于转染miR对照物（0.20 ± 0.01比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 8.367，P<0.05）；转染miR-513a-3p抑制物后HK2表达水平明显高于转染miR对照物（1.91 ± 0.07比1.02 ± 0.04），差异有统计学意义（t = 4.279，P<0.05）。结论miR-513a-3p对于结直肠癌细胞的增殖和糖代谢有明显的抑制作用，并且其调控机制与miR-513a-3p抑制细胞中HK2蛋白的表达有关。

简介：摘要微小RNA(microRNA)在角膜损伤修复过程中具有重要调控作用，角膜伤口愈合涉及复杂的级联反应，伴随着细胞死亡、增生、迁移、分化以及细胞外基质的重塑。分布在角膜不同层次的microRNA异常表达调节细胞/生长因子及下游通路，多种microRNA同时调控多条信号通路形成复杂而精确的微调基因调控网络参与角膜损伤愈合的各个级联过程，同时，因为其表达的改变导致细胞外基质的沉积以及血管生成，也提示microRNA对角膜病理性修复的重要作用。(国际眼科纵览，2021, 45: 246-250)