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  • 简介:摘要目的探究微小RNA(miR)-103a-3p/壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在卵巢癌细胞增殖和血管拟生中的作用机制及对转化生长因子-β(TGF-β)通路的影响。方法通过生物信息学分析miR-103a-3p的表达水平与卵巢癌患者总生存率间的关系。将人卵巢腺癌细胞株SKOV3细胞分为4组:对照组、miR-103a-3p mimic组、miR-103a-3p mimic+CHI3L1组和CHI3L1组。采用定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blotting分别检测miR-103a-3p、CHI3L1 mRNA和CHI3L1蛋白的表达水平。采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中YKL-40的表达水平。采用CCK-8法、克隆形成实验和血管生成实验检测4组细胞活力、增殖能力和血管生成能力。通过双荧光素酶报告验证miR-130a-3p靶向CHI3L1。结果miR-103a-3p高表达组卵巢癌患者总体生存率高于miR-103a-3p低表达组(χ2=6.187,P=0.048)。对照组、miR-103a-3p mimic组、miR-103a-3p mimic+CHI3L1组和CHI3L1组4组之间miR-103a-3p和CHI3L1 mRNA的水平差异均具有统计学意义(F=198.254,P<0.001;F=60.214,P<0.001),miR-103a-3p mimic组和miR-103a-3p mimic+CHI3L1组的miR-103a-3p水平高于对照组(均P<0.001),CHI3L1组的CHI3L1 mRNA水平显著高于对照组(P<0.001)。4组CHI3L1蛋白的表达水平分别为2.25±0.23、1.19±0.12、2.29±0.28、4.31±0.37,差异具有统计学意义(F=18.675,P<0.001)。4组细胞培养液中YKL-40的表达水平分别为(1.84±0.20)ng/ml、(0.95±0.08)ng/ml、(2.64±0.25)ng/ml、(6.27±0.79)ng/ml,差异具有统计学意义(F=35.297,P<0.001),CHI3L1组的YKL-40水平显著高于对照组(P<0.001),miR-103a-3p mimic组的YKL-40水平低于对照组(P<0.001),miR-103a-3p mimic+CHI3L1组的YKL-40水平高于miR-103a-3p mimic组(P<0.001)。4组的细胞活力分别为100%±2.54%、76.23%±2.13%、104.89%±3.56%、137.42%±2.80%,差异具有统计学意义(F=23.584,P<0.001),miR-103a-3p mimic组的细胞活力显著低于对照组(P<0.001),CHI3L1组显著高于对照组(P<0.001),miR-103a-3p mimic+CHI3L1组显著高于miR-103a-3p mimic组(P<0.001)。4组细胞的克隆形成数分别为(76.85±4.67)个、(21.56±2.85)个、(72.06±5.07)个、(169.63±9.21)个,差异具有统计学意义(F=31.541,P<0.001),miR-103a-3p mimic组细胞的增殖能力显著低于对照组(P<0.001),CHI3L1组显著高于对照组(P<0.001),miR-103a-3p mimic+CHI3L1组显著高于miR-103a-3p mimic组(P<0.001)。4组细胞的相对管长度和管分支差异均具有统计学意义(F=24.254,P<0.001; F=27.564, P<0.001)。4组细胞的TGF-β和Smad水平比较差异均具有统计学意义(F=30.254,P<0.001;F=34.187,P<0.001)。双荧光素酶实验结果显示,与转染NC组相比较,共转染miR-103a-3p与CHI3L1-wt后细胞中荧光素酶活性显著降低。分别使用NC和miR-103a-3p与CHI3L1-mut共转染后细胞中荧光素酶活性变化不大。结论miR-103a-3p通过直接靶向抑制CHI3L1的表达,从而抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖和血管生成能力,抑制卵巢癌淋巴转移和远端转移,这可能与TGF-β通路有关。

  • 标签: 卵巢肿瘤 壳多糖酶3样蛋白质1 微RNAs 转化生长因子β 细胞增殖
  • 简介:摘要探讨合并2型糖尿病(T2DM)的下肢动脉硬化闭塞症(LASO)患者血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、热休克蛋白60(HSP60)与血管介入术后再狭窄的关系。采用酶联免疫吸附法检测113例T2DM合并LASO患者血清CHI3L1、HSP60水平,研究发现高水平CHI3L1、高水平HSP60均是血管介入术后再狭窄的相关因素之一(P<0.05)。T2DM合并LASO患者血清CHI3L1、HSP60升高与血管介入术后发生再狭窄有关,二者能够作为预测术后再狭窄的实验室指标。

  • 标签: 2型糖尿病 下肢动脉硬化闭塞症 壳多糖酶3样蛋白1 热休克蛋白60 再狭窄
  • 简介:摘要目的探讨辽宁地区汉族人群中几丁质酶-3样蛋白-1(chitinase 3-like 1, CHI3L1)基因rs4950928以及血小板膜糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)基因rs1671153和rs1654419多态性与大动脉粥样硬化性卒中(large artery atherosclerotic stroke, LAA)的相关性。方法采用病例对照研究方法,病例组选取自2017年1月至2017年6月在中国医科大学附属盛京医院神经内科连续就诊的LAA患者,对照组选取自盛京医院体检中心同期年龄和性别相匹配的健康体检者。采用聚合酶链反应进行目的基因片段扩增,然后采用改良多重连接酶反应技术对rs4950928以及rs1671153和rs1654419进行基因分型。采用多变量logistic回归模型分析基因多态性与LAA发病的相关性。结果共纳入214例LAA患者和198例健康对照者。病例组CHI3L1基因rs4950928以及GPⅥ基因rs1671153和rs1654419基因型和等位基因分布频率与对照组差异均无统计学意义,显性模型和隐性模型分析差异亦无统计学意义。结论CHI3L1基因rs4950928以及GPⅥ基因rs1671153和rs1654419多态性与辽宁地区汉族人群LAA易感性无显著相关性,各等位基因的存在均无法构成LAA发病的危险因素。

  • 标签: 卒中 脑缺血 颅内动脉硬化 壳多糖酶3样蛋白1 血小板膜糖蛋白类 多态现象,遗传学