简介：目的构建CathepsinK(CTSK)基因慢病毒表达质粒,为进一步研究CathepsinK在人软骨细胞体外老化过程中的作用奠定基础。方法采用RT-PCR技术扩增CathepsinK基因的蛋白翻译区,通过连接、转化等分子生物学技术,将该基因克隆至慢病毒pLenti6-V5载体上,经BamHI、XhoI双酶切电泳筛选、鉴定并测序。结果从软骨细胞中成功地克隆出990bp的CathepsinK基因,并经酶切分析得到6．964Kb和1．005Kb大小的两片断,测序结果显示接头两端序列正确。结论通过基因克隆方法成功构建了CathepsinK基因表达质粒,可用于进一步的病毒包装,为深入研究该基因对软骨细胞老化的影响奠定了基础。

简介：<正>通过心导管术采用接触电极引导MAP过程中,由于仪器设备等诸多因素,可造成对受试者的微电击,发生心室纤颤等严重后果。本文叙述了在实验条件下测试三种不同规格放大器通过接触电极对地产生漏泄电流以及对实验动物影响。在此基础上提出了一般

简介：应用全自动血球分析仪做血常规时，一般采用EDTA-K2作为抗凝剂，对于EDTA-K2抗凝剂引起血小板假性减少的病例甚少。最近，我院发现1例血小板假性减少的患者，我们采用了烘干和真空（液体）抗凝剂，并用手工计数与直接涂片进行比较，获得如下报告。

简介：Objective:Tounderstandwhetherverapamil(VER)resistancedevelopmentinthemultidrug-resistantcelllineanditsmechanism.Methods:K562/ADM/VERcellsublineresistanttoverapamilwasestablishedthroughagradualincreaseofVERconcentrationinthemedia.MTTmethodwasusedtoassayresistancetoVER,crossresistancetodipyriamole(DPM),cyclosporinA(CsA)inthecells,andHPLCandspectrofluorometertodetectintracellularaccumulationofVERorADMrespectively,aswellasS-Pimmunocytochemicaltechniquefordetectionofgenesexpression.Results:Itwereobservedthat7.9-foldincreaseinVERresistance,significantlyreducedintracellularaccumulationofVERorADMandalsodevelopacrossresistancetoDPMandCsAinK562/ADM/VERcells,comparedwithitsparentcell,K562/ADM.High-levelofp-glycoprotein(pgp),middle-levelofp53,p16,waspresentintwocelllineswithoutexpressionofGSTPI,C-myc,C-myc,C-fosandC-erbB-2.Bc1-2proteinexpressionwasfoundonlyinK562/ADMcells.Conclusion:K562/ADMcellswerecapableofbeinginducedtodevelopresistancetoVER.

简介：维生素K缺乏在婴儿期常称为迟发性维生素K缺乏症.临床上最常见是颅内出血,起病突然,病情来势凶猛,病死率高,存活者多有明显后遗症.故早期合理治疗,以提高治愈率,减少病死率与后遗症,已成为儿科临床的重要课题.我科1995～2000年共收治婴儿维生素K缺乏症35例,现将资料完整的20例(其中99年前15例,99年后5例),总结如下:

简介：鼻出血为小儿常见疾病,有多方面的病因.1996年10月～1999年11月我院共收治41例以鼻出血首诊的维生素K缺乏症患儿,其中资料完整者32例,现就诊治体会报告如下:

简介：

简介：维生素K缺乏是由于维生素K的摄入和吸收不足或因肝脏疾病不能利用维生素K合成凝血酶原所致.晚发性维生素K缺乏指发生于生后1～4个月婴儿的维生素K缺乏症,其发病率较高,并发颅内出血者,预后不良.我院自199l～2000年收治该病41例,现综合分析如下.

简介：

简介：Objective:TostudythedifferencesandsimilaritiesoftheantisensedrugswithdifferentstructuresonthebiologicalfunctionsofK562cells.Methods:Cytotoxiceffectsweremeasuredbyuseofacellviabilityassay.FlowcytometricanalysisandagarosegelelectrophoresisofDNAfragmentationwerealsoperformed.Theexpressionlevelofproteinwasassayedbyimmunofluorescenceusingfluoresceisothiocyanatelabel.Results:PNAtargetingthecodingregionoftheBcl-2messengerRNAcouldeffectivelyinhibitK562cellviability,down-regulatethesynthesisoftheBcl-2proteinandincreasecellapoptosis.By72haftertheBcl-2antisensePNAtreatment,K562cellsshowedmorereductioninthelevelofBcl-2proteincomparedwithcellstreatedwiththeantisenseODN.Aftertreatmentwith10μmol/LofBcl-2antisensePNAorantisenseODNfor72h,apoptoticratesofK562cellswere13.15±1.13and11.72±1.12,respectively.Furthermore,therewassignificantdifferenceinthepercentageofapoptoticcellsbetweenantisensePNAgroupandantisenseODNgroup.Conclusion:TheresultssuggestthatantisensePNAtargetingthecodingregionofBcl-2mRNAhasbetterantisenseeffectsthantheantisenseoligonucleotidesoninducingapoptosisofK562cells.

简介：Outerbridge-Kashiwagi肱尺关节成形术[1,2](O-K关节成形术)治疗创伤后肘关节僵直,1985年由Kashiwagi设计,通过肘后入路创造性地将鹰嘴窝开窗贯通前后关节腔,清理、松解关节并解除鹰嘴及冠状突的骨赘阻挡,达到清除阻挡、减轻疼痛、增加活动度的目的.我院自1998年应用改良O-K关节成形术治疗创伤后肘关节僵直9例,效果良好.

简介：输尿管痉挛性疼痛绝大部分为输尿管结石、输尿管炎症等所致，疼痛剧烈，呈放射性，常以急症就诊。在明确诊断后，解除患者的剧烈疼痛应为首先采取的治疗措施。自1995—08／1998—10用维生素K3加阿托品治疗输尿管痉挛性疼痛85例，镇痛效果良好，现分析如下。

简介：目的　观察葡萄糖对豚鼠心室肌细胞膜APD,IK1,IK,ICaL的影响。方法　采用全细胞膜片技术记录单个豚鼠心室肌细胞膜的动作电位时程和离子电流。比较0、10和20mmol·L1葡萄糖对心室肌细胞跨膜离子电流的作用。结果　(1)与10mmol·L-1葡萄糖相比,0和20mmol·L-1均可使豚鼠心室肌细胞的APD缩短(P<005);(2)在细胞外葡萄糖浓度为10mmol·L-1时,内向整流钾电流IK1的电流密度最大,标准化I-V曲线显示0和20mmol·L-1葡萄糖均可抑制IK1,并使I-V曲线左移,其翻转电位从-724移至-646mV;(3)与mmol·L-1葡萄糖相比,0和20mmol·L-1葡萄糖均可增加ICaL的电流幅度和电流密度。当钳制电位为10mV,细胞外葡萄糖浓度为0mmol·L-1时,ICaL的电流密度为(-803±082)pApF(n=8),而10mmol·L-1和20mmol·L-1葡萄糖分别使电流密度增加为(-545±067)pApF和(-650±056)pApF;(4)当钳制电压为+70mV,细胞外葡萄糖浓度为0、10和20mmol·L-1时,IK的电流密度分别为(1896±286)pApF,(866±187)pApF,(1532±312)pApF。结论　细胞外不同浓度的葡萄糖可使豚鼠心室肌细胞APD,IK1,IK,ICaL发生改变。细?更多还原

简介：目的研究大鼠心室肌细胞瞬间外向钾电流(Ito1)的特性及奎尼丁对其的影响，从而从细胞离子的方面去探讨奎尼丁作为治疗Brugada综合征的候选药物的机制。方法用酶解法分离大鼠单个左心室细胞，应用膜片钳全细胞方法记录Ito1，观察不同浓度的奎尼丁(n=12)对心室肌细胞Ito1的作用。结果(1)大鼠心室肌细胞具有强大的Ito1，在0．2Hz，+70MV和32℃条件下，其平均峰值Ito强度和密度分别为(1940±440)pA、(12．9±2．6)pA／pF。(2)在奎尼丁1μm、2．5μm、5μm、7．5μm、10μm不同的浓度下，奎尼丁抑制Ito1程度越明显，其作用呈浓度依赖性。结论奎尼丁可以通过抑制Ito1，延长动作电位的复极时程，这很有可能是他作为治疗Brugada综合征的候选药物的机制之一。

简介：ＣＨＡＮＧＥＳＯＦ６－Ｋ－ＰＧＦ１ａＲＥＬＥＡＳＥＦＲＯＭＴＨＥＬＵＭＩＮＡＬＳＵＲＦＡＣＥＯＦＤＡＣＲＯＮＳＥＥＤＥＤＷＩＴＨＡＵＴＯＬＯＯＵＳＶＥＮＯＵＳＴＩＳＳＵＥＦＲＡＧＭＥＮＴＳＣＨＡＮＧＥＳＯＦ６－Ｋ－ＰＧＦ１ａＲＥＬＥＡＳＥＦＲＯＭＴＨ...

简介：我们应用赛庚啶和维生素K1治疗咳嗽变异性哮喘35例，疗效满意，现报告如下：

简介：目的:观察外源性一氧化氮(NO)供体硝普钠对K562细胞增殖抑制及诱导细胞凋亡作用.方法:将不同浓度的硝普钠与K562细胞在体外培养,观察其作用时间效应和剂量效应;用活细胞计数、MTT法观察硝普钠对K562细胞增殖的抑制作用;用DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin-V/PI双标记和DNA片段原位末端标记法等分析细胞凋亡.同时设高铁氰化钾(PFC)对照组和空白对照组.结果:NO能抑制K562细胞生长,并在一定的剂量范围内呈现作用时间和剂量的量效关系,大部分细胞阻滞于G0/G1期;K562细胞与硝普钠作用后出现典型的细胞形态改变,DNA片断化,亚G1峰检出并显著增加,AnnexinV/PI和DNA片段原位末端标记表达增加等均证实NO能诱导K562细胞凋亡.而对照组并无此类变化.结论:NO通过阻滞G0/G1期细胞显著抑制K562细胞的增殖,并有很强的致凋亡作用.

简介：为了探索CML的治疗新思路研究了siRNA(smallinterferingRNA)对K562细胞株bcr-abl融合基因表达的抑制作用.制备特异性对应bcr-abl融合基因的siRNA,转染K562细胞株,采用RT-PCR法测定bcr-abl融合基因mRNA的表达.结果表明:siRNA对bcr-abl基因表达的抑制作用随浓度的增加而增强,0.2μgsiRNA能使bcr-abl融合基因mRNA的表达在24和48小时分别降低至对照组的19.9%和26.6%,但72小时时恢复到原水平,同时转染siRNA后细胞生长受到抑制.结论:siRNA可以有效的抑制K562细胞株中bcr-abl融合基因的表达.

简介：目的研究PVPK30对葛根黄豆苷元水溶解性和溶出性质的影响.方法测量葛根黄豆苷元及其固体分散体、物理混合物的水溶解度和溶出速度,并用X-射线衍射、IR表征药物与PVP在固态条件下的相互作用.结果Gibbs自由能和转移焓均小于零,表明葛根黄豆苷元从磷酸盐缓冲溶液中转移到PVP的磷酸盐缓冲溶液中是一自发的过程;X-射线衍射结果表明葛根黄豆苷元在PVP固体分散体(药物∶PVP<1∶5)中以无定形形式存在;IR结果表明葛根黄豆苷元的羟基与PVP分子中的C=O之间存在相互作用.结论葛根黄豆苷元的PVP分散体可大大提高药物溶解度和溶出速度.

简介：