简介:摘要目的通过检测先心病伴肺动脉高压患者血清ET-1、VEGF、eNOS表达,探讨先心病肺动脉高压发生的可能机制。方法患先天性心脏病患者,经心脏彩超评估PASP,据PASP水平将患者分为正常组(n=12)、轻度PAH组(n=12)、中度PAH组(n=12)、重度PAH组(n=12)。应用ELISA法进行血清ET-1、VEGF、eNOS检测,统计、分析血清ET-1、VEGF、eNOS与肺动脉压改变关系。结果各组血清ET-1、VEGF、eNOS比较,轻度、中度、重度PAH组各指标均呈逐渐增高,中度、重度PAH组各指标较正常组均增高,血清VEGF轻度PAH组较正常组增高,差异均具有统计学意义。中度、重度PAH组RA、RV较正常组和轻度PAH组增大。结论先心病伴肺动脉高压患者随着PASP增高,血清ET-1、VEGF、eNOS表达增加,且与PASP存在正相关;ET-1、VEGF、eNOS参与PAH的形成,三者可能存在相互促进作用。
简介:目的分析高表达组蛋白去乙酰化酶(sirtuin1,SIRTl)对高糖高脂培养胰岛微血管内皮细胞(isletendothelialcells,IEC)内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及活性的影响。方法合成含绿色荧光蛋白报告基因的小鼠SIRTl基因重组质粒,以Lipofectamine2000转染IEC后以高脂或高糖高脂处理48h。高脂组以0.5mmol/L棕榈酸处理;高脂高糖组以33.3mmol/L葡萄糖+0.5mmol/L棕榈酸处理。应用Westem印迹法检测SIRrll基因转染效果;应用实时荧光定量PCR及Western印迹法检测eNOS的基因及蛋白水平;应用硝酸还原酶法检测培养细胞上清中NO的水平。结果相对于正常对照组,高脂培养IECeNOS基因及蛋白水平无明显变化;但高脂高糖环境下,eNOS的基因及蛋白水平明显下降。高表达SIRT1不仅可升高高脂培养内皮细胞eNOS蛋白表达,且可升高高脂高糖培养内皮细胞eNOSmRNA及蛋白表达。相对于正常对照组,高脂培养使内皮细胞分泌NO水平明显下降,高糖高脂培养使内皮细胞NO水平进一步下降,高表达SIRT1不仅可升高基础状态下内皮细胞的NO水平,且可升高高脂、高脂高糖培养内皮细胞的NO水平,差异具有统计学意义。结论SIRT1可改善高糖高脂培养胰岛微血管内皮细胞的eNOS表达及活性,使内皮源性NO分泌增加,因而可能有助于改善胰岛B细胞功能,在糖尿病的药物开发、基因治疗及胰岛移植治疗中具有广阔的前景。