简介:摘要目的探讨穗花杉双黄酮(AF)在体外和体内对肺腺癌细胞的影响及其作用机制。方法细胞实验选用人肺腺癌细胞株H1299(购自美国典型菌种保藏中心),设立对照组、AF 5 μmol/L组和AF 10 μmol/L组,采用克隆平板、细胞周期分析、赫斯特染色(Hoechst)、蛋白质印迹法(Western blot)等检测AF对肺腺癌细胞的影响。动物实验选用BALB/c雄性8周龄小鼠(江苏集萃药康生物科技有限公司),皮下注射H1299,设立对照组、AF 20 mg/(kg·d)组和AF 40 mg/(kg·d)组,通过比较肿瘤组织体积、重量及原位末端标记法检测AF对肺腺癌细胞的影响。同位素定量分析发现差异蛋白是磷酸酶2A抑制因子(CIP2A),在上述实验的同时用Western blot检测CIP2A蛋白表达;经过转染构建CIP2A低表达和CIP2A过度表达细胞,分别设立AF 10 μmol/L组、CIP2A过度表达+AF 10 μmol/L组和CIP2A低表达+AF 10 μmol/L组,用赫斯特染色(Hoechst)+流式细胞仪检测各组的细胞增殖和凋亡。两样本均数间的比较采用t检验。结果细胞实验中肺腺癌细胞增殖百分比AF 5 μmol/L组[(75.12±3.11)%,t=9.638,P<0.01]、AF 10 μmol/L组[(58.01±4.02)%,t=11.382,P<0.01]低于对照组[(100.02±8.11)%];细胞G0/G1期百分比AF 5 μmol/L组[(55.23±2.21)%,t=6.928,P<0.01]、AF 10 μmol/L组[(65.33±3.23)%,t=10.132,P<0.01]高于对照组[(47.12±3.32)%];肺腺癌细胞凋亡百分比AF 5 μmol/L组[(12.38±0.51)%,t=26.583,P<0.01]、AF 10 μmol/L组[(21.88±0.95)%,t=43.709,P<0.01]低于对照组[(2.29±0.13)%];CIP2A蛋白表达AF 5 μmol/L组(0.72±0.02,t=9.782,P<0.01)、AF 10 μmol/L组(0.49±0.03,t=19.816,P<0.01)低于对照组(1.00±0.02)。动物实验中肿瘤体积实验组低于对照组(P<0.05);肿瘤重量AF 20 mg/(kg·d)组[(438.33±30.40) mg,t=19.036,P<0.01]、AF 40 mg/(kg·d)组[(255.83±24.58) mg,t=60.782,P<0.01]低于对照组[(810.83±30.40) mg];肿瘤组织中CIP2A蛋白表达AF 20 mg/(kg·d)组(0.60±0.03,t=31.529,P<0.01)、AF 40 mg/(kg·d)组(0.43±0.03,t=40.613,P<0.01)低于对照组(1.00±0.01);原位末端标记法显示AF明显增加肿瘤细胞的凋亡。CIP2A低表达+AF 10 μmol/L组(0.49±0.03,t=8.012,P<0.01)抗增殖活性强于AF 10 μmol/L组(0.60±0.03);CIP2A低表达+AF 10 μmol/L组(28.06±0.89,t=17.663,P<0.01)促凋亡活性强于AF 10 μmol/L组(22.02±0.73);CIP2A过度表达+AF 10 μmol/L组(0.80±0.05,t=10.484,P<0.01)抗增殖活性弱于AF 10 μmol/L组(0.58±0.04);CIP2A过度表达+AF 10 μmol/L组(8.13±0.68,t=37.165,P<0.01)促凋亡活性弱于AF 10 μmol/L组(22.02±0.73)。结论AF对肺腺癌细胞有抑制生长、促进凋亡作用,AF可能通过CIP2A来发挥作用。
简介:摘要:高中语文学习阶段是非常重要的,对学生而言是承前启后的阶段,是在初中语文学习阶段的基础上进一步融入语文知识,加深学生对于语文学科的认知、培养学生的语文核心素养。在高中语文学习中作文则是语文重要的一部分,通过写作可以培养学生的写作能力,拓展思维和想象思维,让学生掌握写作技能,丰富情感意识,增强理解和阅读能力。然而在目前高中语文作文教学中,部分学生写作吃力,不具备写作的能力和写作素养,这与教师的写作教学和学生的日常学习有关,本文将通过高中语文作文教学中“三读三写三评”的教学模式应用于高中写作教学中,探究和分析应用策略,帮助学生提高写作能力和语文核心素养。
简介:摘要:本文诠释了“三学三思三练三结”课堂教学模式的操作理念、原则、方法、步骤,对教师在课堂教学中培养学生语文核心素养有一定启发和借鉴作用。