学科分类
/ 25
500 个结果
  • 简介:调控血小板生成的血小板生成素(Thrombopoi-erin,TPO)基因序列最近被阐明,这为人们了解血小板的发育调节打开了缺口,同时也为临床治疗血小板贫血提供了一种极有潜力的候选蛋白因子。为了研究TPO的结构与功能的关系,探索其体外高效表达的途径,同比较不同人种TPOcDNA序列的多态性,我们参照文献发表的西方人TPOcDNA序列,用聚合酶

  • 标签: 人血小板 血小板生成素 CDNA序列 DNA序列分析 结构与功能的关系 聚合酶链式反应
  • 简介:摘要目的基于全基因组测序数据,通过内源性激活期间菌株基因组突变分析,开展结核分枝杆菌(MTB)分子钟研究。方法筛选MTB内源性激活全基因组研究文献,下载全基因组测序数据,提取初治-复发配对样本单核苷酸多态性(SNP)差异和菌株分离时间,运用Poisson回归模型拟合初治-复发时间间隔与差异SNP的关系,计算MTB分子钟,估算突变率。结果若MTB传代时间为18 h,0~2年短期内源性激活突变率为6.47×10-10(95%CI:5.59×10-10~7.44×10-10),明显高于2~14年长期内源性激活突变率(3.27×10-10,95%CI:2.88×10-10~3.69×10-10)。0~、1~、2~、3~、5~、7~14年突变率分别为7.10×10-10、6.06×10-10、4.24×10-10、5.34×10-10、2.59×10-10、1.26×10-10。结论内源性激活复发期间,MTB突变率随初治-复发时间间隔增加而下降,本研究从微观层面验证了临床实践观察到的初治结核病2年内易复发现象。

  • 标签: 结核病 分子钟 突变率 全基因组测序
  • 简介:目的探讨Uncv无毛小鼠的无毛性状与无毛基因(hairlessgene,hr)的相关性。方法参照Gen-Bank上公布的小鼠的hr序列,设计5对引物,用RT-PCR方法对本单位培育的Uncv无毛小鼠hr的编码区序列进行了克隆与分析。结果获得了Uncv无毛小鼠及野生型hr的全部编码区序列(3546bp)。Uncv无毛小鼠hr基因与野生型小鼠hr基因的长度及序列完全一致,同源性为100%。与GenBank上发表的国外小鼠hr基因序列(Z32675)相比,同源性为99.7%,共10个碱基发生了突变,其中2个碱基突变导致了相应的氨基酸突变;和昆明小鼠的hr(AY547391)相比,同源性为99.6%,共12个碱基发生了突变,其中3个碱基突变导致了相应的氨基酸突变;但这些突变是由种属差异造成的。结论Uncv无毛小鼠的无毛性状产生与hr基因无关。

  • 标签: Uncv小鼠 无毛基因 分子克隆 序列分析
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:摘要目的应用cDNA分子克隆测序方法,鉴定中国南方汉族1个KIR3DL3新等位基因。方法采集1例KIR3DL3基因测序结果异常的无偿志愿捐血者的外周血样,提取mRNA并逆转录为cDNA。设计1对具有KIR3DL3基因特异性的PCR引物对cDNA进行扩增,扩增产物纯化后进行分子克隆测序。结果经分子克隆测序,检出1个正常的KIR3DL3*00802等位基因和1个KIR3DL3*064新变异等位基因。KIR3DL3*064与KIR3DL3*00601等位基因的序列最为接近,仅有编码区存在nt1184 C>T错义变异,导致第9外显子中的第374密码子由ACT变为ATT,所编码的苏氨酸(Thr)变为异亮氨酸(Ile)。该等位基因被世界卫生组织HLA因子命名委员会KIR分委会正式命名为KIR3DL3*064。结论cDNA分子克隆测序法能够鉴别常规测序分型中的异常结果,可用于鉴定KIR3DL3新等位基因。

  • 标签: KIR3DL3基因 cDNA 分子克隆测序 新等位基因
  • 简介:幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)是上消化道疾病的主要致病菌,它的感染不但与B型胃炎和消化性溃疡的发生有密切关系,而且与非溃疡性消化不良,MALT淋巴瘤和胃癌也有重要关系,并已被世界卫生组织列为胃癌等肿瘤的相关致病菌[1,2,3].Hp在我国普通人群的感染率较为高50%~80%[4].随着分子生物学技术的发展,幽门螺杆菌致病机理研究的进一步深入,有效抗原的筛选,以及基因工程菌株构建的运用,将预防和根治Hp的感染成为了可能.因此,本实验以Hp特快特异性基因--18kDa外膜蛋白基因,经PCR扩增,构建重组载体,为在原核生物表达创造条件,同时为疫苗的研究以及快速诊断试剂盒的开发奠定基础.

  • 标签: 幽门螺杆菌 胃癌 重组载体 致病菌 肿瘤 外膜蛋白
  • 简介:丝氨酸乙酰转移酶(SAT,EC2.3.1.30)是硫同化中非常重要的一个酶,是半胱氨酸合成的关键酶,催化丝氨酸转化为氧乙酰丝氨酸的反应,后者再生成半胱氨酸。本研究从红藻门杉藻科角叉菜(Chondruscrispus)cDNA文库中克隆了角叉菜丝氨酸乙酰转移酶基因(cysE)全长序列(GenBank序列号KT963952)。序列分析表明,其ORF区长1143bp,编码由380个氨基酸组成的蛋白,理论分子量为40.60kDa,理论等电点为6.26。生物信息学分析表明角叉菜SAT与其他物种的SAT的氨基酸序列具有较高的同源性。本研究为探讨SAT在角叉菜硫代谢中的作用提供了实验基础。

  • 标签: 角叉菜 丝氨酸乙酰转移酶 分子克隆 硫同化
  • 简介:摘要目的用高通量方法筛选口腔鳞癌放疗抵抗相关的激酶基因,为口腔鳞癌的临床治疗决策提供理论基础。方法以慢病毒构建的短发夹核糖核酸(shRNA)激酶文库(含4 675个不同shRNA序列,覆盖709个人激酶基因)感染舌鳞癌Cal-27细胞,嘌呤霉素筛选去除未成功感染的细胞后,以光子射线进行照射(0、10和15 cGy),然后继续培养3 d,以增加不同射线抗性细胞的丰度差异。提取细胞基因组DNA,利用PCR获得完整shRNA序列,同时每组引入不同标签序列,利用illumina平台进行二代测序,找出丰度发生显著变化的shRNA,其对应基因即为影响射线抗性的基因。结果本次实验共筛选到5个影响口腔鳞癌放射线抗性的激酶基因,其中,PKLR和IPMK敲减后会增加射线抵抗,AURKB、ITPKB和DLG2敲减后会导致放射敏感,其高表达会导致患者对放疗耐受。结论本研究利用shRNA慢病毒文库结合二代测序方法筛选到3个口腔鳞癌放射抵抗基因,但具体作用机制尚需进一步探究。

  • 标签: 慢病毒 短发夹核糖核酸 口腔鳞癌 放疗 二代测序
  • 简介:1997年4月,英国科学家宣布用克隆技术培育出一只绵羊“多莉”。一时间,“克隆”成为20世纪末惊世骇俗的遗传科技。与此同时,围绕克隆技术的间谍窃密、微机复制窃密活动也就相伴而生了。继英国克隆出绵羊后,美国和欧洲也纷纷克隆猪、牛等。在克隆研究中,植入一头胚胎猪或一头胚胎牛细胞中的究竟是哪一种基因,是一个技术秘密,有关公司都守口如瓶。早在几年前,我国(下转第45页)(上接第37页)有关部门便利用克隆技术成功地培育了牛、猪、山羊等动物。国外克隆实验研究机构与间谍机构联手,伺机窃取我克隆机密。我国克隆机密存储于电脑克隆软盘中,国家保密机构为它制定了严格的保密防范措施,反间谍机关则严密注视国际上克隆技术

  • 标签: 克隆技术 反间谍 实验研究 防范措施 国家安全 保密机构
  • 简介:克隆技术已渐成熟,其作用与意义也已成为人们关注的焦点。大家对克隆羊多利也应当比较熟悉。那末你对克隆技术是怎样看的呢?是赞成还是反对?看了下面的文章,也许使你对克隆会有更多的了解,从而得出自己的结论。

  • 标签: 结论 熟悉 作用与意义 文章 焦点 克隆技术
  • 简介:前几天我收到一封信,信封上写着“全美高中生领袖暑期高峰会”,看起来正式极了。我迫不及待地撕开信封,信纸上第一句话写道:尊敬的杨茗同学,祝贺你被全美高中生领袖暑期高峰会录取!我们只挑选最拔尖的高中生参加我们的活动。

  • 标签: 领袖 克隆 高中生 暑期 信封
  • 简介:“彤彤.你不能再玩电脑了,快去写作业!”妈妈又开始唠叨起来。“哎呀,真烦,妈妈真讨厌!”忽然.电脑里的一则消息吸引了我:注意!克隆技术中心开张了!免费克隆!免费克隆!

  • 标签: 克隆 妈妈 技术中心 电脑 免费
  • 简介:假如我会克隆,我一定要克隆两只小猫——“百灵”和“乌龙”。前年,爸爸和妈妈从外公家回来带回两只可爱的小猫。它们好像双胞胎,一男一女。“男”的我们管它叫“乌龙”,“女”的我们管它叫“百灵”。

  • 标签: 克隆 双胞胎 “男” “女”