简介:摘要目的探讨受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)死亡、增殖、分化、迁徙等生物功能的影响。方法通过RNA干扰技术降低RIPK1在BMSCs中的表达后,光镜观察细胞形态变化,Transwell细胞迁移实验检测BMSCs迁移能力变化,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测BMSCs增殖变化,茜素红染色检测BMSCs成骨分化能力变化,油红O染色检测BMSCs成脂分化能力变化,阿新蓝染染色检测BMSCs成软骨分化能力变化,蛋白质印迹法(Western blot)分析BMSCs分化相关标志分子Runt相关基因2(Runx2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、性别决定区Y框蛋白9(Sox9)的表达变化以及凋亡标志性分子裂解的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、坏死性凋亡相关标志性分子p-RIPK3、RIPK3、p-MLKL的表达变化。两组间比较采用t检验,多组间比较应用单因素方差分析。结果小干扰RNA(siRNA)干扰24 h后,非选择性siRNA对照组吸光度值(0.46±0.00),siRIPK1组吸光度值(0.45±0.01),差异无统计学意义(t=1.923,P>0.05);siRNA干扰48 h后,非选择性siRNA对照组吸光度值(0.92±0.04),siRIPK1组吸光度值分别(0.63±0.03),差异有统计学意义(t=10.910,P<0.05);siRNA干扰72 h后,非选择性siRNA对照组吸光度值(1.52±0.01),siRIPK1组吸光度值(0.52±0.03);差异有统计学意义(t=48.960,P<0.05)。siRNA干扰RIPK1后,BMSCs内Runx2表达水平(0.41±0.08)明显低于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=6.628,P<0.05);BMSCs内PPARγ表达水平(0.36±0.11)明显低于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=6.810,P<0.05);BMSCs内Sox9表达水平(0.33±0.19)明显低于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=6.949,P<0.05)。茜素红染色结果显示,与非选择性的siRNA对照组比较,RIPK1干扰显著抑制BMSCs成骨分化过程中矿化结节的形成。油红O细胞染色结果显示,与非选择性的siRNA对照组比较,RIPK1干扰显著抑制BMSCs成脂分化过程中脂滴的形成。阿新蓝细胞染色结果显示,和非选择性的siRNA对照组比较,RIPK1干扰显著抑制BMSCs成软骨分化过程中硫酸粘液物质的形成。Transwell细胞迁移实验结果显示,siRIPK1组(19.33±10.69)BMSCs的迁移数量明显少于非选择性siRNA对照组(52.33±9.71),差异有统计学意义(t=3.957,P<0.05)。siRNA干扰RIPK1后,BMSCs内细胞凋亡标志性分子Cleaved caspase3表达水平(1.73±0.40)明显高于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=3.841,P<0.05);坏死性凋亡标志性分子p-RIPK3(2.07±0.73)、RIPK3(1.67±0.17)、p-MLKL(2.77±0.68)表达水平明显高于对照组(1±0),差异有统计学意义(t=3.841、3.555、4.542,P<0.05)。结论RIPK1是BMSCs内维持增殖、多向分化潜能以及迁移能力的重要调控基因。
简介:摘要目的探讨甲状腺激素受体相互作用蛋白6(TRIP6)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在乳腺癌中的表达及其生物学意义。方法收集齐齐哈尔医学院第五附属医院(大庆市龙南医院)2015年7月至2021年7月乳腺癌组织和癌旁组织标本112例,应用免疫组织化学方法检测以上组织中TRIP6和HMGB1的表达,采用χ2检验结合临床病理资料行相关性分析。结果乳腺癌组织中TRIP6阳性表达率为74.11%(83/112),明显高于癌旁组织中TRIP6阳性表达率23.21%(26/112),两者之间的差异有统计学意义(χ2=58.060,P<0.01)。TRIP6表达水平与乳腺癌TNM分期(TNM stage)、肿瘤大小、组织学分级、淋巴结转移明显相关(χ2=5.586、9.156、4.658、5.812,P<0.05)。TRIP6表达水平与乳腺癌年龄、组织学分型无明显相关(χ2=0.001、0.066,P>0.05)。乳腺癌组织中HMGB1阳性表达率为65.18%(73/112),明显高于癌旁组织中HMGB1阳性表达率16.96%(19/112),两者差异有统计学意义(χ2=53.787,P<0.01)。HMGB1表达水平与乳腺癌TNM分期、淋巴结转移、肿瘤大小明显相关(χ2=5.899、0.004、5.080,P<0.05),差异有统计学意义。HMGB1表达水平与乳腺癌年龄、组织学分型、组织学分级无明显相关(χ2= 0.027、4.658、0.149,P>0.05)。结论TRIP6和HMGB1在乳腺癌组织中表达上调,TRIP6和HMGB1有助于乳腺癌患者预后的评估。
简介:摘要近视是我国乃至于全球的重大公共卫生问题,延缓近视进展已成为人们关注的热点问题。但目前光学镜片、化学药物以及激光手术等治疗、干预手段的效果不甚令人满意,且有一定的副作用,提示近视的发病和调控机制尚不明确,近视治疗缺乏精准而有效的对因治疗靶点。完整的视觉体验取决于从视网膜到视皮质的整个视觉通路,其中任何一个环节出现结构和功能障碍均可导致视觉异常。近年来,随着红外光谱和磁共振技术的进步,越来越多的证据表明近视的发展与视皮质有关,通过改善视皮质不同区域之间的功能连接和血流量可能缓解近视进展。深入认识近视与视皮质之间的相互作用,有助于探寻精准而有效的近视治疗靶点以及新型干预策略。
简介:摘要:伴随着人们生活质量的不断提高,使得我们在进行生活的过程中,对于一些机器上的使用更加严谨,我们也通过自身生活质量的不断提升,去促使了各个行业的一个发展,特别是促使了机械电子工程的作用与价值越来越突出,我们也能够更多的去认识到机械工程与人工智能的关系。那么伴随着各国发展,机械电子工程生产水平得到了有效的提升,再加上目前科技的进步和社会的发展,我们就能够发现机械电子工程已趋向于智能化,这给电子工程带来了一个全新的挑战,为什么这样说呢?因为以往的机械电子工程中,它往往是需要人力来进行一个设计和准备工作,但是目前随着科技的进步,人工智能的不断发展,使得我们不得不重新去审视人工智能对于我们生活质量提升的一个关键作用。它是否能够与机械电子工程进行有效的衔接呢,答案是可以的,因此,有了这样的视角下的监督和了解,我们也需要去看到机械电子工程与人工智能之间的有效关系,把握好其这关系,才能够去更好的进行二者的融合,那么本文去详细介绍和分析机械电子工程的相关内容,阐述了人工智能的特点与原理,去概述了机械电子工程与人工智能之间的关系,那么,这对于研究人工智能以及机械电子工程等方面具有很大的影响,有助于工作者掌握机械电子工程在人工智能技术中的发展。
简介:摘要目的探究人体中与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv1705c蛋白相互作用的蛋白质。方法原核表达Rv1705c蛋白基因,收集包涵体,裂解后透析纯化Rv1705c并测定其浓度,ELISA法检测细菌Rv1705c刺激巨噬细胞后细胞因子IFN-γ的分泌量,使用纯化并带有生物素标记的Rv1705c孵育人蛋白质组芯片HuProt™,筛选与Rv1705c相互作用的人类蛋白质,使用GenePix Pro 6.0软件对蛋白质芯片的信号图像进行数据提取,使用GO、KEGG等多个数据库进行生物信息学分析,GST pulldown验证Rv1705c与PSMA3、RSAD2的相互作用。结果纯化结果显示,Rv1705c在包涵体中表达,Rv1705c刺激巨噬细胞后IFN-γ分泌量显著上升。芯片结果显示共筛选出了29个与Rv1705c相互作用的潜在阳性蛋白质,其中PSMA3、NLN、THOP1、UPF3A、RSAD2、OMG、PNKD、STEAP3、MED8共9个蛋白质的信噪比(signal-to-noise ratio,SNR)>1.6。进一步的生物信息学分析发现候选蛋白PSMA3、RSAD2、C1QBP参与固有免疫应答激活信号转导,并且PSMA3、RSAD2与干扰素存在交互作用,GST pulldown验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c确有相互作用。结论发现并验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c存在相互作用,为Mtb感染机制的研究提供参考。