简介:摘要目的探讨连接斑珠蛋白(JUP)体外对放疗抵抗子宫颈癌细胞的影响。方法对子宫颈癌细胞株SiHa、HeLa、Me-180采用单次剂量1 Gy、每周3次的60Co放射线照射,诱导细胞耐放疗性,得到获得性放疗抵抗细胞株SiHaIR、HeLaIR、Me-180IR,以相应野生型细胞株作为对照组。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法检测6组细胞中JUP mRNA及蛋白的表达情况,采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果SiHa组和SiHaIR组、HeLa组和HeLaIR组、Me-180组和Me-180IR组JUP mRNA相对表达量分别为1.74±0.06和0.48±0.02(t=12.327,P<0.01)、1.77±0.06和0.28±0.03(t=14.698,P<0.01)、2.28±0.06和0.78±0.01(t=7.367,P<0.01),JUP蛋白的相对表达量分别为2.36±0.03和0.55±0.02(t=9.245,P<0.01)、2.13±0.02和0.23±0.01(t=15.643,P<0.01)、1.96±0.05和0.73±0.02(t=5.826,P<0.01)。划痕后培养12、24、48 h时,3组放疗抵抗细胞迁移率均较相应野生型细胞增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论JUP在放疗抵抗子宫颈癌细胞株的表达量低于野生型细胞株,且放疗抵抗细胞的迁移能力增强。
简介:摘要目的用高通量方法筛选口腔鳞癌放疗抵抗相关的激酶基因,为口腔鳞癌的临床治疗决策提供理论基础。方法以慢病毒构建的短发夹核糖核酸(shRNA)激酶文库(含4 675个不同shRNA序列,覆盖709个人激酶基因)感染舌鳞癌Cal-27细胞,嘌呤霉素筛选去除未成功感染的细胞后,以光子射线进行照射(0、10和15 cGy),然后继续培养3 d,以增加不同射线抗性细胞的丰度差异。提取细胞基因组DNA,利用PCR获得完整shRNA序列,同时每组引入不同标签序列,利用illumina平台进行二代测序,找出丰度发生显著变化的shRNA,其对应基因即为影响射线抗性的基因。结果本次实验共筛选到5个影响口腔鳞癌放射线抗性的激酶基因,其中,PKLR和IPMK敲减后会增加射线抵抗,AURKB、ITPKB和DLG2敲减后会导致放射敏感,其高表达会导致患者对放疗耐受。结论本研究利用shRNA慢病毒文库结合二代测序方法筛选到3个口腔鳞癌放射抵抗基因,但具体作用机制尚需进一步探究。
简介:阿司匹林(Aspirin,AS)于1897年合成,1899年德莱塞推介到临床并取名为阿司匹林。迄今己逾百年,是医药史上三大经典药物之一。它除镇痛、解热、消炎外,其抗血小板聚集作用也十分重要。临床现已广泛用于心脑血管疾病的防治。但是近年来研究发现,常规剂量甚至加大剂量的AS不能完全抑制血栓素的生成和血小板聚集,对AS的心脑血管保护作用呈现阿司匹林抵抗(AspirinResistancc,AR)现象,即应用AS治疗的患者,仍不能免受血栓性疾病的损害,且其死亡危险高于AS敏感者。1AR的定义至今对AR尚无统一的定义。1966年Quick在AS耐受性试验中发现,口服AS后,可使出血时间(BleedingTime,BT)延长,但也发现部分人BT并不延长,当时
简介:摘要目的探讨环状RNA-7(circularRNA, ciRS)-7在食管鳞癌细胞放疗抵抗中的作用及生物学机制。方法采用慢病毒转染食管鳞癌细胞系KYSE410和KYSE510构建ciRS-7敲降细胞系(分为正常对照组和sh#1组、sh#2组)。不同剂量射线(2 Gy组、4 Gy组、8 Gy组)照射上述细胞,收集各组细胞染色,流式细胞术检测活细胞比例。双荧光素酶报告系统检测ciRS-7与微小RNA(microRNA,miR)-7的调控关系;KYSE410细胞分正常组、ciRS-7敲降组,RT-qPCR检测miR-7表达。shRNA转染KYSE410细胞,分为干扰组(正常对照组、敲降ciRS-7组);过表达组(ciRS-7和miR-7同时过表达组、阴性对照组、miR-7过表达组),蛋白质印迹法检测各组中B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白(bcl-2)的表达。两组间比较采用独立样本的t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果KYSE410细胞sh#1组(0.36±0.03)、sh#2组(0.37±0.12)ciRS-7表达量低于正常对照组(1.00±0.01, t=24.460、8.910, P<0.05); KYSE510细胞sh#1组(0.40±0.08)、sh#2组(0.34±0.08)ciRS-7表达量低于正常对照组(1.00±0.08, t=8.514、9.550, P<0.05),差异均有统计学意义。4 Gy射线照射后,KYSE410细胞sh#1组[(37.00±3.07)%]、sh#2组[(39.50±0.70)%]活细胞比例低于正常对照组[(63.50±6.36)%, t=7.400、5.301, P<0.05]; KYSE510细胞sh#1组[(39.00±8.48)%]、sh#2组[(39.50±0.70)%]活细胞比例低于正常对照组[(73.50±6.36)%, t=4.600、7.509, P<0.05]。8 Gy射线照射后,KYSE410细胞sh#1组[(22.50±3.53)%]、sh#2组[(39.50±0.70)%]活细胞比例低于正常对照组[(50.50±2.12)%, t=9.604、11.800, P<0.05]; KYSE510细胞sh#1组[(33.00±2.82)%]、sh#2组[(31.00±2.82)%]活细胞比例低于正常对照组[(60.50±2.12)%, t=11.000、11.800, P<0.05],差异均有统计学意义。KYSE410细胞过表达ciRS-7组(1.00±0.23)的miR-7表达低于正常对照组(0.54±0.08, t=3.191, P<0.05),双荧光素酶报告系统证实ciRS-7吸附结合miR-7。同时过表达miR-7及ciRS-7组的bcl-2表达高于过表达miR-7组(0.59±0.11, t=6.013, P<0.05)、敲降ciRS-7组(0.83±0.08, t=3.717, P<0.05),差异均有统计学意义。结论ciRS-7通过靶向miR-7促进食管鳞癌细胞的放疗抵抗。
简介:摘要目的探讨老年冠心病血浆抵抗素与胰岛素抵抗的相关性。方法选取2014年8月~2015年8月在我院心血管内科就诊的50例老年人(老年组)和以及同时期门诊健康体检的30例中青年人(对照组)为本文研究对象,按照老年人是否患有冠心病将老年组患者分为健康组和冠心病组,采用竞争性酶联免疫吸附试验对两种患者空腹状态下血浆抵抗素水平进行测定,同时检查空腹胰岛素、血糖、血脂以及胰岛素敏感指标,测量两组患者臀围、腰围以及腰臀围。结果与对照组比较老年冠心病组患者血浆抵抗素水平显著升高(P<0.05);老年冠心病组患者血浆抵抗素与健康老年人组比较差异不明显无统计学意义(P<0.05);血浆抵抗素水平与年龄呈现出正相关性(r=0.31,P<0.01),与其体质指数呈现出正相关性(r=0.25,P<0.05),而与胰岛素抵抗指数则呈现出负相关性(r=-0.31,P<0.05)。结论空腹状态下的血浆抵抗素水平与冠心病患者年龄以及体质指数呈现出正相关性,而与胰岛素的抵抗指数呈现出负相关性。