简介：摘要支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾病，其典型的病理特征包括气道重塑。气道重塑可导致气道高反应性、不可逆的气流受限以及肺功能的减退。研究表明，Wnt/β-catenin信号通路在肺损伤后的修复中发挥重要作用，同时，Wnt/β-catenin信号通路的异常激活可导致哮喘气道重塑。该文对Wnt/β-catenin信号通路与哮喘气道重塑的研究进展进行综述，并探讨其在哮喘中可能的治疗靶点，有利于进一步研究哮喘的临床治疗。

简介：南昌急救中心，城北分中心，江西 南昌 330038 【摘要】目的 : 探讨 Nkx2.1/β-catenin 信号通路在前肠分化发育过程的作用机制。 方法： 购置 SGC-7901 食管上皮细胞系，随机分为对照组和观察组。对照组采用 DMSO 处理，观察组采用特异性抑制剂 MLN8237 进行处理，浓度为 20umol/L ，采用 Westernblotting 法测定 Nkx2.1/β-catenin 信号通路关键蛋白、 EMT 相关蛋白表达水平； 采用 MTT 法完成 两组食管上皮细胞增殖情况；采用 Transwell 法测定两组细胞侵袭情况。 结果 ： Westernblotting 法测定结果表明：观察组食管上皮细胞中 N-cadherin 、 E-cadherin 、 GAPDH 蛋白水平低于对照组（ P<0.05 ）；两组 0h 细胞增殖抑制率比较无统计学意义（ P>0.05 ）；观察组干预后 6h 、 12h 、 24h 细胞增殖抑制率高于对照组（ P<0.05 ）； Transwell 法测定结果表明：观察组细胞培养 24h 后细胞穿过基膜的细胞数量为（ 28.45 ± 5.41 ）个低于对照组（ 82.59 ± 8.94 ）个（ P<0.05 ）。 结论 ：通过调控 Nkx2.1/β-catenin 信号通路等影响食管上皮细胞的侵袭、增殖，能为前肠发育畸形的治疗提供新的方向。

简介：摘要目的在分子水平探讨Nek2B与β-catenin在三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer，TNBC）中的表达及意义。方法利用生物信息学分析的方法[GEO2R在线工具、基因本体（GO）功能分析、KEGG生物途径富集分析]筛选TNBC基因芯片集数据中的差异表达基因；运用Western blot及即时定量逆转录-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测Nek2B、β-catenin在TNBC细胞系中的表达水平；收集山西医科大学第二医院2007年1月1日至2012年12月31日的80例TNBC患者资料，采用免疫组织化学法检测Nek2B在TNBC肿瘤组织芯片的表达，分析其与TNBC临床病理学特征之间的关系。结果通过生信分析2个TNBC肿瘤的cDNA芯片集（GSE38959和GSE27447），初筛共得到998个差异表达基因（DEG），其中13个共同DEG，生物途径分析结果显示共同DEG与Wnt/β-catenin通路有密切联系，其中Nek2的表达差异最大，且与患者不良预后相关；Western blot和qRT-PCR结果提示在同一种TNBC细胞系中，Nek2B与β-catenin的表达强度一致；免疫组织化学结果显示，在TNBC肿瘤组织中，Nek2B的高表达与高组织学分级（G3；84.3%比37.9%，P<0.001），淋巴结转移（76.7%比54.1%，P=0.032）和高Ki-67阳性指数（78.6%比52.6%，P=0.007）以及β-catenin阳性表达（72.5%比27.3%，P=0.018）相关。结论Nek2B高表达与TNBC患者的不良预后有关，在TNBC组织与细胞中，Nek2B的表达与β-catenin呈正相关性，提示Nek2B可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响TNBC的发生与发展。

简介：摘要目的研究miR-520b在舌鳞状细胞癌（TSCC）中的表达，探讨其在TSCC侵袭转移过程中的作用及分子机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测TSCC组织及细胞系中miR-520b的表达；沉默或过表达TSCC细胞株SCC-9和UM1中miR-520b的表达后，实时荧光定量PCR检测细胞上皮-间质转化（EMT）相关基因表达；Transwell小室验证细胞侵袭转移能力改变；TOP/FO双荧光素酶报告基因系统、实时荧光定量PCR、Western blot等检测miR-520b表达对Wnt/β-catenin信号通路的影响；生物信息学、Western blot及双荧光素酶实验验证miR-520b调控Wnt/β-catenin信号通路的潜在靶基因Dickkopf 1（DKK1）。使用SPSS 21.0软件进行统计学分析，样本均数间比较采用Student′s t检验。结果与正常相邻组织（2.59±1.43）相比，miR-520b相对表达量在TSCC组织中显著上调（5.28 ± 1.63），差异有统计学意义（t = 16.04，P = 0.0005），并且与患者中更具侵袭性的TSCC表型正相关（5.81 ± 0.74 vs. 3.08 ± 0.89，t = 12.11，P = 0.0011）；过表达miR-520b促进TSCC细胞侵袭转移（SCC-9：110.8 ± 17.8 vs. 74.7 ± 9.8，tSCC-9 = 32.58，PSCC-9 = 0.0011；UM1：178.8 ± 39.7 vs. 90.3 ± 22.5，tUM1 = 99.67，PUM1 = 0.0002），低表达则相反（SCC-9：74.7 ± 9.8 vs. 30.9 ± 7.8，tSCC-9 = -31.47，PSCC-9 = 0.0024；UM1：90.3 ± 22.5 vs. 35.7 ± 10.6，tUM1 = -37.89，PUM1 = 0.0019）；此外，过表达miR-520b可靶向抑制DKK1，进而激活Wnt/β-catenin信号通路，促进TSCC细胞上皮-间质转化。结论MiR-520b在TSCC中高表达，可能通过抑制DKK1增强Wnt/β-catenin信号通路，促进TSCC侵袭转移。

简介：摘要目的探讨海南五指山裸花紫珠通过Wnt/β-catenin信号通路的抗肠癌作用及机制。方法采用集落形成实验检测海南五指山裸花紫珠对肠癌细胞增殖的影响；采用HE染色法检测海南五指山裸花紫珠对肠癌细胞集落生长的影响；采用激光共聚焦显微镜检测海南五指山裸花紫珠对肠癌细胞IFITM1跨膜蛋白的影响；采用免疫细胞化学法检测海南五指山裸花紫珠对肠癌细胞抑癌蛋白的影响；采用Western Blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达量。结果海南五指山裸花紫珠浓度的增加可导致SW480和SW620细胞集落数的下调和抑制率的上调，并且呈剂量依赖关系；海南五指山裸花紫珠组（Lhzz组）SW480和SW620细胞相较对照组（con组）集落体积缩小，细胞形态较模糊，集落细胞数明显减少；Lhzz组SW480和SW620细胞相较con组IFITM1跨膜蛋白表达绿色荧光强度减弱，集落生成数减少、体积缩小，胞核固缩且形态不规则；Lhzz组的SW480细胞抑癌蛋白DCC表达水平相较con组显著上调（2.13 ± 0.33比1.05 ± 0.16，t＝3.542，P<0.05）；Lhzz组的SW620细胞抑癌蛋白DCC表达水平相较con组显著上调（1.89 ± 0.26比0.96 ± 0.12，t＝3.466，P<0.05）；Lhzz组的SW480细胞Cyclin D1表达水平相较con组显著上调（0.64 ± 0.11比0.38 ± 0.05，t＝3.154，P<0.05）；Lhzz组的SW620细胞Cyclin D1表达水平相较con组显著上调（0.52 ± 0.09比0.24 ± 0.03，t＝3.143，P<0.05）；且Lhzz组的SW480和SW620细胞β-catenin表达水平相较con组显著上调（P<0.05）。结论海南五指山裸花紫珠可以通过激活Wnt/β-catenin信号通路实现对肠癌细胞增殖生长的抑制作用。

简介：摘要胶质瘤是中枢神经系统中最常见且侵袭性高的恶性肿瘤之一，Wnt-β-catenin信号通路为经典Wnt通路，参与胶质瘤等多种肿瘤的发生发展。长链非编码RNA（LncRNA）为无蛋白编码功能的功能性RNA分子，在多种肿瘤的发生、发展中发挥着调控作用。研究表明，LncRNA与Wnt-β-catenin信号通路共同参与胶质瘤的生长、侵袭、迁移等过程，但其中的复杂机制目前并未得到深入的阐述。文章就Wnt-β-catenin信号通路及其相关的LncRNA对胶质瘤的影响进行综述。

简介：AbstractBackground:The transforming growth factor β1 (TGF-β1)-induced epithelial-mesenchymal transition (EMT) has been proven associated with the pathogenesis of asthmatic airway remodeling, in which the Wnt/β-catenin pathway plays an important role, notably with regard to TGF-β1. Recent studies have shown that 1α, 25-dihydroxyvitamin D3(1α, 25(OH)2D3) inhibits TGF-β1-induced EMT, although the underlying mechanism have not yet been fully elucidated.Methods:Alveolar epithelial cells were exposed to 1α, 25(OH)2D3, ICG-001, or a combination of both, followed by stimulation with TGF-β1. The protein expression of E-cadherin, α-smooth muscle actin, fibronectin, and β-catenin was analyzed by western blotting and immunofluorescence analysis. The mRNA transcript of Snail was analyzed using RT-qPCR, and matrix metalloproteinase 9 (MMP-9) activity was analyzed by gelatin zymogram. The activity of the Wnt/β-catenin signaling pathway was analyzed using the Top/Fop flash reporters.Results:Both 1α, 25(OH)2D3 and ICG-001 blocked TGF-β1-induced EMT in alveolar epithelial cells. In addition, the Top/Fop Flash reporters showed that 1α, 25(OH)2D3 suppressed the activity of the Wnt/β-catenin pathway and reduced the expression of target genes, including MMP-9 and Snail, in synergy with ICG-001.Conclusion:1α, 25(OH)2D3 synergizes with ICG-001 and inhibits TGF-β1-induced EMT in alveolar epithelial cells by negatively regulating the Wnt/β-catenin signaling pathway.

简介：摘要目的探讨Wnt/β-连环链蛋白（catenin）/TCF-4通路在肾癌细胞中的作用，并初步分析其可能的机制。方法分别构建β-catenin sh和TCF-4△Nsh的真核表达载体，并分别转染肾癌786-O细胞，采用CCK8检测转染后细胞的增殖能力，吖啶橙-溴乙锭（AO-EB）染色法检测转染后细胞死亡情况，Western印迹检测转染组、空转组以及空白组细胞TCF-4、Bcl-2、bax、Caspase-3的表达情况。结果转染β-catenin siRNA病毒后，细胞的增殖能力较空转组明显降低（0.443±0.145与0.910±0.721），细胞死亡率较空转组明显增加（16.38±5.32与6.61±1.04），TCF-4的表达受抑制、凋亡蛋白Caspase 3、bax表达增加、抗凋亡蛋白Bcl-2表达减低（均P<0.05）。转染TCF-4 siRNA病毒后，细胞的增殖能力较对照组明显降低，细胞死亡率较对照组明显增加，TCF-4的表达受抑制导致凋亡蛋白Caspase 3、bax表达增加，抗凋亡蛋白Bcl-2表达减低（均P<0.05）。结论Wnt/β-catenin/TCF-4通路在786-O肾癌细胞中具有可调节肾癌细胞的增殖和凋亡的作用，其机制可能为通过调节其下游的凋亡蛋白Caspase 3、bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平来实现。

简介：摘要目的观察使用刺猬蛋白（Hedgehog）信号阻断剂环巴胺（cyclopamine，Cycl）对慢性氟中毒大鼠骨组织中神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白1（glioma-associated oncogene homolog 1, Gli1）及β链蛋白（β-catenin）表达的影响，探讨两者表达变化在氟致骨形成增强中的意义。方法SD大鼠48只分为4组，每组12只。对照组饮用自来水（含氟量<1 ppm），氟中毒组（F组）、氟+环巴胺组（F+Cycl组）和氟+二甲基亚砜组（F+DMSO组）分别饮用含50 ppm氟化钠（NaF）的自来水。饲养6个月后分别给F+Cycl组和F+DMSO组大鼠腹腔注射环巴胺和DMSO。检测各组大鼠尿氟含量；酶联免疫吸附试验测定血清骨碱性磷酸酶（bone alkaline phosphatase,BALP）含量；HE染色观察骨组织形态计量学变化；实时荧光定量PCR法、免疫组织化学和蛋白印迹法检测骨组织中Gli1和β-catenin的mRNA和蛋白表达情况。结果染氟后F组、F+Cycl组和F+DMSO组大鼠尿氟含量、骨小梁密度、骨小梁宽度较对照组明显增加，但3组间未见明显差异（P>0.05）。F组较对照组血清BALP含量增加，Cycl阻断后血清BALP含量明显降低（P<0.05）。与对照组比较，F组Gli1和β-catenin mRNA和蛋白均有表达增强。使用Cycl后，两者表达均较F组降低（P<0.05），而F+DMSO组则无明显变化。Gli1与β-catenin的表达呈正相关关系（r=0.476，P<0.05）；Gli1、β-catenin蛋白表达与血清BALP、骨小梁密度分别呈正相关关系（r1=0.457，r2=0.466，r3=0.581，r4=0.554，P<0.05）。结论Cycl可阻断慢性氟中毒大鼠骨组织Gli1表达，并且其影响成骨相关因子β-catenin的表达，这可能参与到氟致骨形成增强的过程中。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA （lncRNA）LOC730101对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法2019年2月至2019年10月，将体外培养的U2OS细胞分为对照组（正常培养）、阴性组（转染阴性对照）和干扰组（转染靶向LOC730101的干扰序列），采用RT-PCR检测细胞中LOC730101表达,噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力，平板克隆形成实验检测细胞克隆形成率，流式细胞仪检测细胞周期分布情况, Transwell小室检测细胞侵袭与迁移，Western blotting法检测细胞中上皮间质转化相关蛋白波形蛋白（Vi- mentin）、N-钙黏附素（N-cadherin）、E-钙黏附蛋白（E-cadherin）和Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路相关蛋白β-catenin、c-Myc、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1）和基质金属蛋白酶-7 (MMP-7）蛋白的表达水平。结果进行统计学分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组比较,干扰组细胞中LOC730101表达水平（干扰组、对照组分别为0.25±0.03、1.00±0.06，下同）、细胞成活率[（57.65±3.26）%、（100.00±7.39）%]、克隆形成率[（13.03 ± 2.12）%、（25.35±3.58）%]、侵袭细胞数（51.36±3.48、92.85±6.62）、迁移细胞数（77.15 ± 5.05、136.92 ± 15.35）和细胞在S期[（20.54±2.15）%、（28.15±2.38）%]、G2/M期所占百分比[（16.87±2.12）%、（23.36±3.12）%]以及细胞中Vimentin （0.52 ± 0.04、1.17 ± 0.13）、N-cadherin （0.31 ± 0.03、0.65 ± 0.04）、β-catenin （0.42 ± 0.03、0.73 ± 0.04）、c-Myc （0.29±0.03、0.65±0.03）、Cyclin D1 （0.26±0.02、0.58±0.04）、MMP-7蛋白表达水平（分别为0.55± 0.03、0.86±0.06）均明显降低，而细胞在G0/G1期所占百分比［分别为（62.62±5.15）%、（48.46±3.65）%］以及细胞中E-cadherin蛋白的表达水平（分别为0.82±0.06、0.38±0.03）均明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；但阴性组的各指标与对照组之间差异均无统计学意义（P>0.05）。结论下调LOC730101可抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移，其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。

简介：摘要研究发现Wnt/β-catenin信号通路在骨髓间充质干细胞的增殖、分化过程中具有重要。因此，骨髓间充质干细胞移植、分化过程中遇到的问题，如骨髓间充质干细胞的定向诱导分化，可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路来找到解决方案，让骨髓间充质干细胞定向分化及成功移植成为治疗迟发性腺功能减退症(LOH)的新方法。本文对Wnt/β-catenin信号通路调控骨髓间充质干细胞向睾丸间质细胞分化的机制及治疗LOH的研究进展进行综述。

简介：摘要目的观察甲状旁腺激素(PTH)1-34是否可以阻断晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的负性成骨作用及其可能信号通路。方法采用全骨髓法分离培养4周龄SD大鼠的BMSCs，分别给予成骨诱导液、牛血清血蛋白(BSA)、AGEs、AGEs联合PTH1-34预处理，7 d后行实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原酶(COL-Ⅰ)mRNA表达水平，Western印迹法检测β-catenin、osterix(OSX)、核心结合蛋白因子2(RUNX2)、终末期氨基糖基化受体蛋白表达水平。21 d后采用茜素红染色检测矿化结节并定量；在10－8 mmol/L的PTH1-34中加入Wnt通路特异性阻断剂Dickkopf-1(DKK1)1 μg/ml后，Western印迹法再次检测β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达水平。结果AGEs抑制ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达(P<0.05)，而PTH1-34预处理后逆转AGEs的作用，ALP、COL-Ⅰ mRNA及β-catenin、OSX、RUNX2蛋白表达较AGEs组增加(P<0.05)，茜素红染色矿化结节呈红棕色且增多，定量检测OD值，PTH1-34预处理组高于AGEs组(P<0.05)。DKK1(1 μg/ml)作用后，β-catenin、OSX蛋白表达均较BSA组减少(P<0.05)。结论PTH1-34可通过Wnt/β-catenin信号通路阻断AGEs对BMSCs的负性成骨作用。