简介:NickelnitratewasintroducedintocarbonblocksbyusingECAaggregatesascatalyst-carrier.TheNi-containinganthraciteaggregateswerefirstlypreparedbymixinganthraciteaggregatesinnickelnitrateethanolsolutionandthenincorporatedintocarbonblocksafterpre-treating.Thephasecomposition,microstructureandpropertiesofallcarbonblocksfiredat1000℃or1400℃inacokebedwerestudiedwiththeaidofanX-raydiffractomer,afieldemissionscanningelectronmicroscope,amercuryporosimetryandalaserthermalconductivitymeter.TheresultsshowedthattheadditionofNi-containinganthraciteaggregatespromotedtheformationofone-dimensionalnanocarbonandβ-SiCwhiskersat1000℃andthegrowthofβ-Sialonat1400℃,respectively.Moreover,thecoldcompressivestrengthandmicroporositycharacteristicsofthecarbonblockswiththeadditionofNi-containinganthraciteaggregateswereenhancedandthethermalconductivitywasremarkablyimprovedattributingtothehighheatconductivenetworkformedbytheceramicphases.
简介:目的体外研究丁酸钠对人食管癌Eca-109细胞的凋亡作用。方法以1mmol/L、2.5mmol/L、5mmol/L丁酸钠处理Eca-109细胞,透射电镜观察细胞凋亡的形态,TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化(SP法)检测凋亡抑制基因bcl-2蛋白的表达。结果Eca-109细胞经丁酸钠处理后,透射电镜见到细胞核染色质浓缩,聚集于核膜处等细胞凋亡的形态特征,并见到凋亡小体;TUNEL法检测发现2.5mamol/L丁酸钠处理24h组与阴性对照组细胞凋亡率分别为5.5%和1.6%,其差异具有显著性(P〈0.05);免疫组化检测实验组的bcl-2蛋白表达阳性率低于对照组,具有统计学意义(P〈0.05)。结论丁酸钠可诱导食管癌Eca-109细胞凋亡,其机制与下调凋亡抑制基因bcl-2蛋白表达有关。
简介:we report the effects of TPA on proliferation and nuclear morphometry of human esophageal cancer Eca109 cells.  ,cells.TPA concentration was 1.6×10-8 mol/L,Fabre M. The tumor promoter 12 - O - tetradecanoylphorbol -13-acetate blocks differentiation of HT-29 human colon cancer cells. J Cell Sci
简介:目的:探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的光动力疗法(PDT)对人食管癌细胞杀伤效应的最佳作用参数,为HMME-PDT的临床应用提供一定的参考依据。方法:以4μg·mL-1HMME与人食管癌Eca-109细胞孵育不同时间后,利用形态学软件分析其荧光强度;进一步予不同浓度(0.5μg·mL-1~8μg·mL-1)HMME与细胞孵育1.5小时后,在特定波长下以不同能量的激光(2、4、8J·cm-2)照射,采用CCK8法检测细胞的存活率。结果:HMME在细胞内的荧光强度于给药1.5h后达到高峰。在一定范围内,随着HMME浓度与激光剂量的增加,细胞存活率逐渐下降,当HMME浓度增高到4μg·mL-1时,光照强度增高到4J·cm-2,进一步提高药物浓度与激光剂量,细胞存活率并不随之降低。结论:不同的孵育浓度、不同的孵育时间及不同的光照剂量密度可以显著的影响HMME-PDT对人食管癌Eca-109细胞的体外效应。
简介:摘要目的下调食管癌ECA-109细胞的血管内皮生长因子A(VEGFA)表达,观察其辐射敏感性的改变并初步探讨其发生机制。方法将食管癌ECA-109细胞分成VEGFA转染组、空载组、X射线组和VEGFA转染组联合X射线组。运用qPCR法检测VEGFA基因的表达;Western blot法检测VEGFA蛋白的表达;细胞增殖实验(CCK8法)测定细胞的增殖变化;克隆形成法分析不同照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)细胞的辐射敏感性;流式细胞术分析细胞凋亡变化;免疫荧光法检测γ-H2AX焦点的数量。结果ECA-109细胞VEGFA转染组与空载组比较,VEGFA基因表达明显减少(t=11.98,P<0.05)、VEGFA蛋白表达显著下调(t=12.38,P<0.05);ECA-109转染组细胞相较于空载组细胞,其增殖(A450值)明显受到抑制(t=2.78、7.25、21.93、13.21,P<0.05);与空载组比较,VEGFA转染组ECA-109细胞的D0、Dq、SF2值下降(t=5.83、8.56、7.68,P<0.05),放射增敏比SERD0、SERDq分别为1.41、2.09,凋亡比例明显增加、且联合X射线后ECA-109细胞的凋亡比例进一步增加(t=17.63、22.48、33.87,P<0.05);ECA-109细胞VEGFA转染组和空载组在X射线照射后2 h内细胞核形成的γ-H2AX焦点数量均明显增加,24 h后空载组细胞核的γ-H2AX焦点数量恢复照射前水平,而转染组中的γ-H2AX焦点数量仍高于照射前水平(t=7.00,P<0.05)。结论下调VEGFA能抑制食管癌细胞的增殖,减少细胞集落形成并促进其凋亡,增加食管癌ECA-109细胞的辐射敏感性,其机制与DNA损伤修复密切相关。
简介:摘要目的探讨抑制转移相关基因1(MTA1)的表达对人食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将MTA1 siRNA转染至人食管癌Eca109细胞,同时设置转染对照组和空白对照组。通过实时荧光定量PCR法和Western blot法检测转染对Eca109细胞中MTA1 mRNA和蛋白表达的影响。采用MTT法检测各组Eca109细胞的增殖能力,采用平板克隆实验检测各组Eca109细胞的克隆形成能力,采用流式细胞术检测各组Eca109细胞的凋亡情况,采用Western blot法检测各组Eca109细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡相关蛋白caspase-3和cleaved caspase-3蛋白的表达水平。结果人食管癌Eca109细胞转染MTA1 siRNA 48 h后,实时荧光定量PCR法检测结果显示,空白对照组、转染对照组和MTA1 siRNA组Eca109细胞中MTA1 mRNA的相对表达量分别为1.00±0.10、0.98±0.09和0.21±0.03,MTA1 siRNA组Eca109细胞中MTA1 mRNA的表达水平被抑制,与空白对照组和转染对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。而空白对照组与转染对照组比较,MTA1 mRNA的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot法检测结果与实时荧光定量PCR法检测结果一致。MTT法检测结果显示,与空白对照组和转染对照组比较,MTA1 siRNA组Eca109细胞在48、72和96 h时的吸光度(A)值均明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);而空白对照组与转染对照组48、72和96 h时的A值差异无统计学意义(均P>0.05)。平板克隆形成实验检测结果显示,空白对照组、转染对照组和MTA1 siRNA组Eca109细胞的克隆形成数分别为(58.64±6.86)个、(60.02±7.04)个和(18.10±3.16)个,差异有统计学意义(P<0.05);空白对照组与转染对照组比较,细胞克隆形成能力差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞术检测结果显示,空白对照组、转染对照组和MTA1 siRNA组Eca109细胞的凋亡率分别为(2.13±0.54)%、(2.27±0.61)%和(32.61±5.28)%。MTA1 siRNA组Eca109细胞的凋亡率明显升高,与空白对照组和转染对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而空白对照组与转染对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot法检测结果显示,MTA1 siRNA组Eca109细胞中PCNA蛋白的表达下调,cleaved caspase-3蛋白的表达水平升高,与转染对照组和空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论抑制MTA1基因的表达能够抑制人食管癌Eca109细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其过程可能与下调PCNA蛋白的表达、促进caspase-3蛋白的活化有关。
简介:【摘要】:食管癌是全球常见的恶性肿瘤之一,以其高发病率、高复发率和低治愈率而闻名。甘草查尔酮A,一种从甘草中提取的天然化合物,已在多种癌症中显示出抗癌活性。本研究旨在探讨甘草查尔酮A通过Wnt/β-catenin信号通路对食管癌Eca9706细胞增殖、侵袭的影响。通过实时实验方法检测甘草查尔酮A对食管癌Eca9706细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并进一步研究Wnt/β-catenin信号通路在食管癌细胞增殖、迁移和侵袭发挥作用的机制,为甘草查尔酮A治疗食管癌进一步提供理论及实验依据,具有重要的临床意义。
简介:摘要目的食管癌细胞株ECA109及KYSE150中NFκB与VEGF信号通路研究与分析。方法选取我院2017年1月-2017年12月收治的100例食管癌患者作为对象,收集术后癌组织及癌旁组织共50对标本,提取mRNA及蛋白,了解NFκB、VEGF、VEGR1在转录及蛋白水平的变化情况。培养食管癌细胞株ECA109及KYSE150,设置空白对照组、转染NFκBshRNA载体组、转染NFκB过表达载体组作进一步分析。结果在食管癌细胞株中,NFκB信号通路参与了VEGF的表达调控。结论食管癌细胞株ECA109及KYSE150中,NFκB可参与VEGF的表达调控,NFκB为调控VEGF表达的上游基因。
简介:目的:通过构建DKK1的靶向小干扰RNA(smallinterferingRNA),探讨干扰DKK1基因的表达和对食管癌ECA109及EC1细胞系增殖的影响。方法:转染DKK1siRNA于食管癌细胞系ECA109、EC1,应用蛋白免疫印迹方法检测转染前后细胞中DKK1的蛋白表达变化。食管癌细胞系ECA109及EC1成功干扰DKK1表达后,应用CCK-8法检测癌细胞增殖变化,平板克隆法检测癌细胞的克隆形成能力变化。结果:食管癌细胞系转染DKK1siRNA后,ECA109中DKK1蛋白表达降低48.62%(P〈0.01),EC1中DKK1蛋白表达降低50%(P〈0.01)。在CCK-8法检测癌细胞增殖变化实验中,DKK1siRNA转染后24h、48h及72h,相比阴性对照组,细胞增殖能力显著降低。平板克隆实验中,DKK1siRNA转染后,ECA109细胞克隆均数(77.53±4.948)低于空白对照组(44.2±7.704),克隆率下降42.98%,而EC1细胞克隆均数(71.67±5.239)低于空白对照组(36±2.646),克隆率下降49.76%。结论:干扰DKK1的表达能够抑制食管癌细胞的增殖,DKK1可能成为抑制食管癌增殖的分子靶点。
简介:目的:探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(2-[(3-carboxy-1-oxoprogy1)amino]-2-deoxy-D-Glucose,COPADG)诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法:不同浓度COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、细胞内活性氧(ROS)、线粒体跨膜电位。结果:Eca-109细胞凋亡率与COPADG浓度呈正相关(rs=1.0,P〈0.01);Eca-109细胞线粒体膜电位水平与Eca-109细胞凋亡率相关(rs=1.0,P〈0.01);ROS水平与Eca-109细胞凋亡率呈正相关(rs=1.0,P〈0.01);ROS水平与Eca-109细胞线粒体膜电位水平呈负相关(rs=1.0,P〈0.01)。结论:COPADG可促进Eca-109细胞凋亡,提高Eca-109细胞内ROS水平,并降低线粒体膜电位水平。实验结果提示COPADG提高ROS水平,降低Eca-109细胞线粒体膜电位水平,启动细胞凋亡通路,促使Eca-109细胞凋亡,并且线粒体膜电位的下降是通过提高ROS实现的。
简介:摘要目的探讨高压氧(HBO)增强食管癌ECA109细胞对紫杉醇(Pac)的药物敏感性及其作用机制。方法体外培养食管癌ECA109细胞完成后,按照实验设计将细胞分为4组:对照组、Pac组、HBO组和HBO+Pac组。对照组加入DMSO;Pac组加入5 mg/L的Pac(参照IC50值);HBO组在高压氧舱单独暴露90 min;HBO+Pac组首先将细胞在高压氧舱暴露90 min,随后采用5 mg/L Pac处理。利用CCK-8法检测ECA109细胞的增殖能力,流式细胞术检测ECA109细胞的凋亡情况,Western blotting实验检测ECA109细胞内凋亡蛋白、耐药相关蛋白及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白的表达。结果与对照组和HBO组比较,Pac组ECA109细胞的存活率明显降低,凋亡率明显升高(P<0.05);与Pac组比较,HBO+Pac组ECA109细胞的存活率明显降低,凋亡率明显升高(P<0.05)。与对照组和HBO组比较,Pac组和HBO+Pac组ECA109细胞内Bcl-2、caspase-9和p-ERK蛋白的表达明显降低(P<0.05),Bad、caspase-3、PARP、p-JNK、和p-p38蛋白的表达明显升高(P<0.05)。与Pac组比较,HBO+Pac组ECA109细胞内Bad、caspase-3蛋白的表达明显升高,P-gp蛋白表达明显降低(P<0.05),而Bcl-2、caspase-9和PARP蛋白的表达变化不明显(P>0.05)。结论HBO联合Pac处理能够增强Pac对ECA109细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡作用,其作用机制可能是通过调节ECA109细胞中的MAPK信号通路实现的。
简介:摘要目的探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对Eca-109食管癌细胞生物学行为的影响。方法分别给予0.01、0.05、1.00 μmol/L剂量的PHC处理人Eca-109食管癌细胞,采用细胞计数试剂8(CCK-8)法、平板克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及细胞凋亡率;使用划痕实验和Transwell迁移分析实验分别检测细胞迁移和侵袭能力;采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测长基因间非蛋白编码RNA 00982(LINC00982)表达量。pcDNA、pcDNA-LINC00982分别转染至Eca-109细胞,si-NC、si-LINC00982分别转染至Eca-109细胞后分别加入0.01、0.05、1.00 μmol/L PHC处理24 h,采用上述方法分别检测细胞增殖、克隆形成数目、细胞凋亡率、迁移及侵袭能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测E-钙黏素、B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关X蛋白(bax)和N-钙黏素蛋白表达量。采用独立样本t检验和单因素方差分析。结果PHC低、中和高剂量组Eca-109细胞增殖抑制率[(12.37±0.86)%、(24.88±1.68)%、(42.35±1.76)%比(0.00±0.00)%,F=1769.000,P<0.05]、细胞凋亡率[(11.82±0.57)%、(17.27±0.75)%、(23.16±1.22)%比(7.71±0.41)%,F=636.800,P<0.05]、bax蛋白表达(0.34±0.06、0.46±0.07、0.63±0.09比0.19±0.04,F=68.640,P<0.05)和E-钙粘素蛋白水平(0.20±0.04、0.32±0.05、0.53±0.07比0.11±0.03,F=120.000,P<0.05)高于对照组。PHC低、中和高剂量组LINC00982表达量(1.62±0.08、2.24±0.09、3.43±0.13比1.00±0.00,F=1233.000,P<0.05)高于对照组,细胞克隆形成数目[(86.96±3.52)、(64.52±2.45)、(43.52±2.34)个比(112.87±6.59),F=474.800,P<0.05]、迁移[(190.88±7.76)、(155.71±5.83)、(116.32±3.58)个比(217.55±6.89)个,F=449.200,P<0.05]及侵袭能力[(127.62±3.65)、(95.83±4.32)、(73.32±2.51)个比(157.51±6.21)个,F=634.400,P<0.05]低于对照组,划痕愈合率[(50.73±1.29)%、(38.60±1.78)%、(29.93±1.13)比(63.76±2.48)%,F=636.800,P<0.05]、bcl-2蛋白表达量(0.56±0.08、0.37±0.05、(0.21±0.04比0.72±0.03,F=155.900,P<0.05)和N钙粘素蛋白水平(0.56±0.07、0.44±0.06、0.20±0.03比0.73±0.05,F=150.100,P<0.05)低于对照组,且呈剂量依赖性。pcDNA-LINC00982组细胞增殖抑制率[(34.53±1.09)%比(0.00±0.00)%,t=95.040,P<0.05]、细胞凋亡率[(21.14±0.87)%比(7.59±0.43)%,t=41.890,P<0.05]、bax蛋白表达(0.52±0.06比0.17±0.03,t=15.560,P<0.05)和E-钙粘素蛋白水平(0.44±0.05比0.15±0.03,t=14.920,P<0.05)高于pcDNA组,细胞克隆形成数目[(57.58±2.83)个比(110.56±7.27)个,t=20.370,P<0.05]、迁移[(135.67±6.72)个比(220.81±5.73)个,t=28.920,P<0.05]及侵袭能力[(88.52±3.76)个比(161.72±5.27)个,t=33.920,P<0.05]低于pcDNA组,划痕愈合率[(34.63±2.75)%比(63.87±3.89)%,t=18.140,P<0.05]、bcl-2蛋白表达(0.27±0.04比0.73±0.07,t=17.120,P<0.05)和N-钙粘素蛋白水平(0.24±0.05比0.71±0.08,t=14.950,P<0.05)低于pcDNA组,而转染si-LINC00982可减弱PHC对Eca-109细胞生物学行为的作用。结论PHC可通过上调LINC00982的表达而减弱食管癌Eca-109细胞的增殖、克隆、迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡。
简介:摘要目的探讨食管鳞状细胞癌患者放疗前后血浆miRNA-210(miR-210)表达的变化及其体外对食管鳞状细胞癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法收集2013年12月至2015年3月山东省临沂市人民医院22例初治食管鳞状细胞癌患者(食管癌组)根治性放疗前后及15名健康志愿者(健康对照组)血液标本。以miRNA-21(miR-21)为阳性对照。应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测患者放疗前后血浆miR-210和miR-21的表达水平及常氧和乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中miR-210的表达。采用EdU细胞增殖实验、流式细胞术检测未转染组(空白对照组)、转染miR-210模拟物阴性对照RNA组(阴性对照组)、转染miR-210模拟物RNA组(miR-210组)Eca109细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡情况。结果食管癌组及健康对照组共采集合格血液样本59份。食管癌组放疗前血浆miR-210、miR-21的相对表达量[中位数(P25,P75)]较健康对照组升高,差异均有统计学意义[4.04×10-4(2.06×10-4,6.68×10-4)比0.54×10-4(0.28×10-4,0.77×10-4),397.07×10-4(181.77×10-4,742.93×10-4)比127.43×10-4(21.97×10-4,184.65×10-4);U值分别为37.0、49.0,均P<0.01]。食管癌组患者治疗前血浆miR-210、miR-21表达水平与肿瘤部位和分化程度均无关(均P>0.05)。根治性放疗1周后,食管癌组血浆miR-210、miR-21的相对表达量分别为65.33×10-4(22.15×10-4,160.87×10-4)、437.23×10- 4(327.18×10-4,749.09×10-4),均较放疗前升高(U值分别为32.0、154.0,均P<0.05),其中miR-210升高更为显著。Eca109细胞乏氧培养12 h后, miR-210的表达水平较常氧组增高,24 h后达峰值,差异有统计学意义(P<0.01)。EdU细胞增殖实验显示,miR-210组转染24、48 h后Eca109细胞增殖活力较阴性对照组和空白对照组均下降,差异均有统计学意义(均P<0.01)。流式细胞术分析显示,转染24 h后,同阴性对照组和空白对照组相比,miR-210组Eca109细胞G2/M期比例增高,差异有统计学意义(P<0.05);转染48 h后,G2/M期比例增高更明显(P<0.01);转染24、48 h后,三组凋亡细胞比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论miR-210在食管鳞状细胞癌患者血浆中高表达,尤其是在根治性放疗后血浆miR-210表达水平明显升高。miR-210在乏氧食管鳞状细胞癌Eca109细胞中高表达,miR-210过表达可抑制细胞增殖,其机制可能与G2/M期阻滞相关。