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  • 简介:目的:构建白细胞介素7IL-7)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)共表达的重组腺病毒载体,为进一步感染干细胞奠定基础。方法:将目的基因IL-7克隆到含有报告基因EGFP的穿梭质粒中,然后再将构建的重组穿梭质粒转移至pAdxsi载体中,构建重组腺病毒载体质粒,继而在H293细胞中扩增,纯化后测定病毒滴度。结果:pShuttle-EGFP-mIL7重组穿梭质粒经酶切鉴定得到0.5kb和5.1kb2条带;pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体质粒经酶切鉴定得到14K、11.8K、3.1kb、2.66kb、2.47K、1.45K、0.6K7条带;TCID50法测定纯化后的病毒滴度为2×10^10pfu/ml。结论:pAdxsi-EGFP-mIL7重组腺病毒载体构建成功。

  • 标签: 白细胞介素7 增强型绿色荧光蛋白 重组腺病毒载体 构建
  • 简介:摘要目的研究慢性乙型肝炎(乙肝)患者血清IL-7IL-21、乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)、HBV DNA载量、T淋巴细胞表面CD127表达的关系,探讨IL-7对细胞免疫的影响。方法收集2017年9月至2020年3月至北京友谊医院就诊的560例慢性乙肝患者血清标本,采用ELISA法检测IL-7IL-21;流式细胞仪检测HBV特异性CTL和T淋巴细胞表面CD127表达;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测HBV DNA。根据IL-7检测结果(低、中、高),将研究对象分为A、B、C 3组(A组:IL-7<20 pg/ml; B组:20 pg/ml≤IL-7<30 pg/ml; C组:IL-7≥30 pg/ml)。结果慢性乙肝患者血清IL-7平均浓度显著低于健康对照组(P<0.01),3组检测值差异有统计学意义(P<0.01),同时3组患者IL-21、HBV特异性CTL百分比、CD8+T淋巴细胞表面CD127的表达率也依次升高,3组检测值差异均有统计学意义(P<0.01),两两变量之间均呈正相关(P<0.01)。只有HBV DNA在A、B、C 3组呈下降趋势,3组检测值差异有统计学意义(P<0.01),与其他变量均呈负相关(P<0.01)。多重线性回归分析显示HBV特异性CTL是对HBV DNA回归分析的独立影响因素(P<0.01);IL-7、CD8+T淋巴细胞CD127表达、IL-21均是对HBV特异性CTL回归分析的独立影响因素(P<0.05)。结论慢性乙肝患者IL-7调节HBV特异性免疫应答,或可成为评价患者细胞免疫状态的有效细胞免疫指标。

  • 标签: 肝炎病毒,乙型 IL-7 IL-21 HBV特异性CTL DNA CD127
  • 简介:摘要目的观察脓毒症患者中膜型CD127(membrane-bound CD127,mCD127)和可溶型CD127(soluble CD127,sCD127)的表达,探讨IL-7调控脓毒症患者CD8+T细胞活性的机制。方法采用前瞻性研究队列,入组47例脓毒症患者和18例健康对照者,分离血清和外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),纯化CD8+T细胞,酶联免疫吸附试验检测血清中IL-7和sCD127,流式细胞术检测CD8+T细胞表面mCD127表达,实时定量PCR法检测CD8+T细胞中总CD127 mRNA和sCD127 mRNA相对表达量。使用重组人IL-7刺激CD8+T细胞并抑制信号转导和转录激活因子5(signal transducer and activator of transcription 5,STAT5)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)通路,检测CD8+T细胞表面mCD127表达、总CD127 mRNA和sCD127 mRNA相对表达量的变化,利用CD8+T细胞与MCF-7细胞共培养系统评估IL-7刺激后CD8+T细胞杀伤功能的变化。采用t检验或LSD-t检验进行统计分析。结果脓毒症患者血清中IL-7和sCD127水平均低于对照组[(101.82±12.58) pg/ml vs (111.07±11.10) pg/ml,P<0.01;(278.58±62.31) pg/ml vs (334.62±70.55) pg/ml,P<0.01],且两者水平呈正相关(r=0.46,P<0.01)。脓毒症患者CD8+T细胞中mCD127+CD8+T细胞比例和mCD127平均荧光强度均高于对照组(P<0.05)。脓毒症患者CD8+T细胞中sCD127 mRNA相对表达量低于对照组(1.34±0.33 vs 1.80±0.60,P<0.001)。重组人IL-7刺激后CD8+T细胞sCD127分泌水平、总CD127和sCD127 mRNA相对表达量升高(P<0.05),抑制STAT5后IL-7诱导的sCD127分泌水平、总CD127和sCD127 mRNA相对表达量降低(P<0.05),但抑制PI3K后IL-7诱导的sCD127分泌水平、总CD127和sCD127 mRNA相对表达量变化无统计学意义(P>0.05)。脓毒症患者CD8+T细胞诱导靶细胞死亡的比例低于对照组[(12.49±2.12)% vs (23.83±3.76)%,P<0.001],重组人IL-7刺激后CD8+T细胞诱导靶细胞死亡的比例升高(P<0.05),细胞因子和毒性颗粒分泌增加(P<0.05),抑制STAT5后IL-7诱导的CD8+T细胞杀伤功能减弱(P<0.05),但抑制PI3K后IL-7诱导的CD8+T细胞杀伤功能变化无统计学意义(P>0.05)。结论IL-7可增加sCD127分泌,通过STAT5信号通路增强脓毒症患者CD8+T细胞的体外杀伤功能。

  • 标签: 脓毒症 IL-7 CD127 CD8+T淋巴细胞
  • 简介:interleukin-24(IL-24)能在人的癌症的一个大系列导致apoptosis,是记录得好的MDA-7/IL-24基因的导出的房间线,而是效果在未知的老鼠黑瘤房间遗体上转。IL-24(pEGFP-IL-24)的真核细胞的表示plasmid被DNA再结合技术构造。再结合plasmid和空向量是进B16F0房间的transfected,IL-24的表情被LSM决定,B16F0房间的增长被MTT试金,和apoptosis率测量,B16F0房间的房间周期分发被FCM测量。在老鼠固体肿瘤的IL-24基因transfection的禁止的效果被观察并且测量。与控制相比,B16F0房间的增长被transfection与pEGFP-IL-24禁止,transfected房间的G2/M阶段也是increased.Moreover,在与pEGFP-IL-24与B16F0房间transfected接种以后,有可检测的肿瘤的鼠标的百分比被减少。在老鼠模型的肿瘤的生长率显著地与控制相比在IL-24基因治疗组被禁止。B16F0细胞的增长被pEGFP-IL-24的pEGFP-IL-24transfection.Theintratumor注射禁止能显著地在老鼠禁止稳固的肿瘤的生长。

  • 标签: 肿瘤移植 治疗方法 IL-24 MDA-7 病理
  • 简介:Objective:TostudythesynergiceffectsofIL-12andB7-1transfectantonantitumorimmunityinvivo.Methods:TheretrovirusvectorencodingmIL-12andmB7-1genewastranfectedintoEL-4thymiclymphomacellsrespectively.Thecellswereusedastumorvaccineandthetherapeuticeffectwasobserved.Results:IncontrasttothemiceimmunizedwithEL-4/WtorEL-4/Neogroups,thetumorigenicityofEL-4/IL-12transfectantwasdecreased(P<0.001).TheEL-4/IL-12andEL-4/B7-1cellsirradiatedwith60CoshowedsignificantsystematicprotectiveeffectsagainsttherechallengeofEL-4/Wt.60CoirradiatedEL-4/IL-12cellsdelayedtheoccurrenceoftumorandprolongedthesurvivalperiodoftumorbearingmice.CombinationofthevaccinesofEL-4/IL-12andEL-4/B7-1resultedintheenhancedtherapeuticeffectcomparedwitheachsingletransfectantgroup(P<0.001).Conclusion:TheresultsshowedthatIL-12transducedcellscouldenhancetheantitumorimmunityofhostascancervaccine.CombinationoftheEL-4/IL-12andEL-4/B7-1transfectantcouldimproveimmunityofhostandisaprospectcancervaccine.

  • 标签: IL-12 B7-1 基因转染细胞 抗肿瘤免疫 癌症 疫苗
  • 简介:摘要哮喘是一种慢性气道炎症和阻塞为特征的变应性疾病。哮喘常见于过敏性体质中,与白介素(IL)、IgE、嗜酸性粒细胞等表达水平相关。Th2型细胞因子,包括白细胞介素IL-4、IL-5和IL-13等都是炎症反应及过敏反应启动和传递的必要的因子,越来越多研究表明了IL-4、IL-5和IL-13在哮喘的重要性1,认识哮喘相关性白介素的作用机制有助于我们从细胞因子水平上认识和治疗哮喘。本文就IL-4、IL-5和IL-13在哮喘的作用机制及意义进行综述。

  • 标签: 哮喘 白介素 炎症
  • 简介:[摘要]目的:探讨血清IL-2、IL-4、IL-6在卵巢癌中诊断价值。方法:选取本院收治的105例卵巢癌为实验组,40例卵巢巧克力囊肿为良性对照组,进行血清IL-2、IL-4、IL-6测定,比较其相关性,绘制ROC曲线。结果:卵巢癌组血清IL-2、IL-4、IL-6水平高于良性组,均具有较高的AUC。结论:血清IL-2、IL-4、IL-6在卵巢癌中具有较高的诊断价值。

  • 标签: []IL-2 IL-4 IL-6 卵巢癌
  • 简介:摘要白细胞介素(IL)家族能直接或间接地刺激肿瘤细胞增殖、存活和扩散,并进一步塑造肿瘤微环境,从而在一定程度上影响肿瘤的生长与转化。研究发现IL-12家族的新成员IL-35、IL-39、IL-27在多种肿瘤中发挥相关的特异性免疫功能,可能是肿瘤研究的重要靶向分子。

  • 标签: 肿瘤微环境 免疫 细胞因子
  • 简介:[摘要]  目的  检测日本血吸虫感染小鼠血清IL-2、IL-4及IL-10的动态变化,探讨IL-2、IL-4及IL-10在日本血吸虫感染中的应答特征。 方法  建立日本血吸虫感染的小鼠模型,采用ELISA法检测小鼠感染后2、4、6、8、10、12周血清中IL-2、IL-4及IL-10水平。同时设立正常小鼠对照组。结果  日本血吸虫感染小鼠血清IL-2在第2周迅速增加,第4周达到高峰,之后从第6周开始下降,但至12周仍维持高水平,显著高于对照组小鼠(P

  • 标签: []  日本血吸虫 小鼠 白细胞介素2 白细胞介素4 白细胞介素10
  • 简介:摘要目的探讨血清白细胞介素-6、8、10、22(IL-6、IL-8、IL-10、IL-22)水平在急性胰腺炎(AP)早期诊断中的价值。方法选择近3年滕州市中医院收治的123例轻度急性胰腺炎(MAP组)、37例中度和28例重度急性胰腺炎(MSAP+SAP组)患者以及30例健康体检者(对照组)作为研究对象。MAP组患者中男性70例,女性53例,年龄(43.7±13.7)岁;MSAP+SAP组患者中男性45例,女性20例,年龄(45.0±13.3)岁;对照组,其中男性17例,女性13例,年龄(45.3±11.8)岁。入院第1、3、7、10天采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清IL-6、IL-8、IL-10、IL-22水平,并比较分析其在急性胰腺炎早期诊断和病情严重程度判断中的价值。结果MSAP+SAP组第1天血清IL-6、IL-8、IL-22分别为(277.60±46.72)pg/ml、(99.84±18.66)pg/ml、(175.77±26.66)pg/ml,第3天分别为(231.47±57.72)pg/ml、(77.89±30.33)pg/ml、(140.97±44.31)pg/ml,第7天分别为(207.97±76.93)pg/ml、(68.59±38.11)pg/ml、(125.77±54.06)pg/ml,第10天分别为(187.21±89.94)pg/ml、(59.75±45.19)pg/ml、(111.44±61.54)pg/ml;MAP组第1天血清IL-6、IL-8、IL-22分别为(199.51±28.86)pg/ml、(97.36±19.05)pg/ml、(122.67±18.10)pg/ml,第3天分别为(148.30±30.94)pg/ml、(70.68±8.64)pg/ml、(94.00±13.53)pg/ml,第7天分别为(125.92±22.58)pg/ml、(52.04±6.82)pg/ml、(80.60±11.59)pg/ml,第10天分别为(97.36±19.05)pg/ml、(44.89±9.08)pg/ml、(59.46±17.28)pg/ml;两组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。MAP组患者入院时血清IL-10水平升高,随后逐渐降低,第10天降至正常水平;MSAP+SAP组患者入院时血清IL-10水平略低于对照组,随后逐渐降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。AP患者血清IL-6、IL-8、IL-22水平与急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分均呈正相关,血清IL-10水平与APACHEⅡ评分呈负相关。ROC分析发现,血清IL-22水平对SAP的早期诊断效能最大(AUC=0.948),灵敏度及特异度分别为0.938和0.813。结论血清IL-6、IL-8、IL-10、IL-22有助于急性胰腺炎的早期诊断,且与病情严重程度密切相关。

  • 标签: 急性胰腺炎 白细胞介素-6 白细胞介素-8 白细胞介素-10 白细胞介素-22 APACHEⅡ评分 ROC
  • 简介:<正>一天,“1”在数学王国东转转西跑跑觉得很无趣,想到拼音国去玩,于是它坐着魔棍“一”来到了拼音国。它碰到“i”说:“‘1’你怎么多了个点,你难道不怕回去被皇上‘10’把你的点打掉吗?”“i”摸不着头脑走了。

  • 标签: IL 不知道
  • 简介:白介素(几)几一12和几一4对支气管哮喘(哮喘)异常免疫起关键作用。IL一12具有调节Thl/Th2细胞免疫应答作用。哮喘患者由于IL一12缺陷导致1112细胞免疫应答过强;IL一4作为1112细胞因子成员,它通过激活嗜酸性粒细胞(EOS)减少凋亡,促进IgE分泌等机制参与过敏性哮喘和炎症过程。有证据表明这两种关键性免疫细胞调节因子在哮喘患者的肺中产生不平衡,即IL一12的产生减少和IL一4的产生过量。IL一12/IL一4产生失衡是哮喘发病的关键因素之一,如何调整两者的平衡是哮喘治疗的一个方向。

  • 标签: 支气管哮喘 哮喘患者 IL-12 细胞免疫应答 IL-4 治疗
  • 简介:IthasbeenshownthatIL-2andIL-15canhaveopposingeffectsonlifeanddeathofTcells.However,theroleofIL-2andIL-15inregulatingthefateofothercelltypesislessclear.Inthepresentstudy,weexaminedtheimpactofIL-2andIL-15onlifeanddeathofpre-BcellsusingtheBAF-B03line.WeshowedthatBAF-B03cellsconstitutivelyexpressedtheprivateIL-2RαchainandIL-15Rαchain,andthesharedIL-2Rβchainandγcchain.StimulationofBAF-B03cellsinvitrowithIL-2andIL-15inducedvigorouscellproliferationinadose-dependentfashion.TitrationofIL-2andIL-15intheassayshowedthatthemitoticeffectsofIL-2andIL-15wereremarkablysimilar,Howerer,thesensitivitiesofBAF-B03cellstoFasmediatedapoptosisafterIL-2andIL-15stimulationwerestrikinglydifferent.CellsculturedinIL-2readilyunderwentapoptoticcelldeathuponcross-linkingoftheFasreceptorwhereascellsculturedinIL-15wereextremelyresistanttoFastriggeredcelldeath.Theanti-apoptoticeffectofIL-15inthismodelwasassociatedwithincreasedexpressionofBcl-xL.FLIPexpression,however,wascomparablebetweenIL-2andIL-15stimulatedcells.WeconcludethatIL-2andIL-15havediametricallyoppositeeffectonthefateofBAF-B03cells,althoughbothcytokinessharesimilarreceptorstructureandexhibitsimilarmitoticactivities.

  • 标签: IL-2 IL-15 T细胞 免疫学 免疫反应
  • 简介:摘要目的探讨了肩周炎患者治疗前后血清IL-8,IL-32和IL-18水平的变化及意义。方法应用放射免疫分析法和酶联法对31例肩周炎患者进行了推拿治疗前后血清IL-8,IL-32和IL-18水平检测,并与35名正常健康人作比较。结果肩周炎患者在推拿治疗前血清IL-8,IL-32和IL-18水平均非常显著地高于正常人(P<0.01),经推拿治疗2周后则与正常人比较无显著性差异(P>0.05),且血清IL-8水平与IL-32,IL-18水平呈显著正相关(r=0.6118,0.4982,P<0.01)。结论检测血清IL-8,IL-32和IL-18水平的变化与疾病的发生发展密切相关,具有重要的临床价值。

  • 标签: 肩周炎 推拿疗法 IL-8 IL-32 IL-18
  • 简介:^60Co照射所致再障小鼠IL-1显著低于正常,补肾中药(补肾生髓1号方)治疗后,IL-1活,IL-l生明显增加;再障小鼠IL-6活性显著低于正常,治疗后IL-6水平增高至接近正常,且与IL-1呈显著正相关(r=0.904);再障小鼠IL-2的产生较正常明显增多,治疗组IL-2水平虽有所下降但无统计学意义。结果表明补肾中药可通过调节免疫活性因子IL-1、IL-2、IL-6的活性而促进骨髓造血重建。

  • 标签: 再障 IL-6 IL-2 IL-1 正常 补肾中药
  • 简介:宝安凤凰社区有望“农地入市”深圳宝安区凤凰社区将成为我市首个原深圳“农村土地”入市试点,该宗地块位于深圳宝安区福永街道凤凰社区,毗邻深圳机场和广深一级公路,用地面积14568平方米。预计最快将于今年年底实现挂牌出让。

  • 标签: 深圳机场 农地入市 农村土地 一级公路 用地面积 挂牌出让
  • 作者: 常铸 梅志雄 方毅敏 王姣 黄明柳 赖小敏
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2020-08-12
  • 出处:《中华临床医师杂志(电子版)》 2020年第08期
  • 机构:510080 广州,中山大学中山医学院微生物学教研室,热带病防治研究教育部重点实验室,结核病研究所,海洋微生物功能分子广东省高校重点实验室,广东省重大传染病预防和控制技术中心,510530 广州,中山大学第三附属医院岭南院区妇产科,510095 广州,广州市胸科医院,国家呼吸疾病重点实验室
  • 简介:摘要目的研究4-羟基-3-甲基-2-烯基焦磷酸(HMBPP)和多肽E7对结核患者胸水及脐带血中γδ T细胞分泌白介素6(IL-6)的影响和机制。方法收集自广州市胸科医院临床诊断结核性胸膜炎患者胸水标本18例,自中山大学附属第三医院正常健康产妇脐带血标本17例。使用流式分选技术分选出结核性胸水和脐带血中的γδ T细胞与CD277+CD14+单核-巨噬细胞混合培养,分别用HMBPP或E7刺激后,运用流式细胞术检测分泌IL-6的γδ T细胞百分率及表达程序性死亡配体1(PD-L1)的CD277+CD14+单核-巨噬细胞百分率;利用RT-PCR技术检测细胞中IL-6、PD-L1的mRNA表达水平;用ELISA方法检测细胞培养上清中IL-6的含量;用PD-L1特异性小分子干扰RNA(siRNA)沉默PD-L1的表达以检测PD-L1是否参与分泌IL-6;在分选于结核性胸水和脐带血的共培养细胞中,HMBPP或E7刺激后上述指标在每一时间点对照组和实验组间分别采用独立样本t检验比较其差异,分析其统计学意义。结果在结核性胸水和脐带血中,给予HMBPP或E7刺激24 h之后,与对照组相比IL-6+γδ+ T细胞占比显著升高,给予HMBPP或E7刺激12 h之后γδ T细胞中IL-6在mRNA水平的相对表达量显著上调,以及在蛋白质水平的表达显著上调;在分选于脐带血的共培养细胞中,给予HMBPP或E7刺激,CD277+CD14+单核-巨噬细胞中PD-L1在mRNA水平的相对表达量显著上调[(3.70±0.33)vs(4.20±0.34)vs 1.00];在沉默PD-L1的表达后,γδ T细胞中IL-6的表达显著降低[(0.53±0.03)vs(0.55±0.01) vs 1.00],差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论HMBPP和多肽E7能够促进CD277+CD14+单核-巨噬细胞PD-L1表达上调,后者参与刺激与其共培养的γδ T细胞分泌更多的IL-6,这为γδ T细胞的抗结核免疫机制的研究以及结核患者的免疫治疗提供依据。

  • 标签: γδ T细胞 CD277+CD14+单核-巨噬细胞 白介素-6 程序性死亡配体1