简介:摘要目的研究miR-219a-5p通过调控高迁移率蛋白A2(HMGA2)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法采用实时定量PCR检测骨肉瘤U2OS细胞和正常成骨细胞hFOB1.19的miR-219a-5p mRNA表达水平。采用脂质体转染法将miR-219a-5p模拟物miR-219a-5p mimic(miR-219a-5p mimic组)以及阴性对照mimic NC(mimic NC组)转染U2OS细胞,通过实时定量PCR检测转染后细胞miR-219a-5p和HMGA2 mRNA的表达水平,蛋白质印迹法检测HMGA2蛋白水平,采用CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力、划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-219a-5p与HMGA2间的作用关系。结果实时定量PCR结果显示,骨肉瘤U2OS细胞中的miR-219a-5p表达水平(0.11±0.01)显著低于正常成骨细胞(1.00±0.06),差异具有统计学意义(t=26.83,P<0.001)。CCK-8法结果显示,mimic NC组和miR-219a-5p mimic组培养24 h后细胞吸光度值分别为0.52±0.02、0.42±0.02,48 h后分别为0.85±0.03、0.60±0.03,72 h后分别为1.12±0.02、0.72±0.02,miR-219a-5p mimic组细胞增殖活性显著低于mimic NC组,差异均具有统计学意义(t=6.97,P<0.001;t=16.65,P<0.001;t=26.78,P<0.001)。克隆形成实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞克隆数为(157.00±15.39)个,明显低于mimic NC组的(294.00±15.51)个,差异具有统计学意义(t=9.70,P<0.001)。划痕实验结果显示,培养24 h后,miR-219a-5p mimic组细胞划痕面积百分比为(40.53±2.92)%,显著高于mimic NC组的(21.71±3.11)%,差异具有统计学意义(t=7.26,P=0.002)。Transwell小室侵袭实验结果显示,miR-219a-5p mimic组细胞的穿膜数量为(128.67±18.67)个,显著少于mimic NC组的(317.67±14.33)个,差异具有统计学意义(t=15.65,P<0.001)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,在含有MUT-HMGA2细胞中,与mimic NC组(4.40±0.28)相比,转染miR-219a-5p mimic(4.30±0.26)对荧光素酶活性无明显影响,差异无统计学意义(t=0.85,P=0.690)。在含有WT-HMGA2细胞中,相比于NC mimic组(4.50±0.25),miR-219a-5p mimic组(2.88±0.16)荧光素酶活性显著降低,差异具有统计学意义(t=19.15,P<0.001)。且过表达miR-219a-5p后,骨肉瘤U2OS细胞中的HMGA2 mRNA和蛋白表达(0.77±0.01;0.37±0.01)相比于mimic NC组(1.00±0.02;1.00±0.01)均下调,差异均具有统计学意义(t=16.38,P<0.001;t=42.02,P<0.001)。结论在骨肉瘤细胞中,miR-219a-5p可通过下调HMGA2的表达抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。
简介:摘要:随着科技的发展,医学影像设备也正在发生着重大的变化和挑战,应用范围越来越广,性能也在不断提高,功能更趋完善。现代影像设备已经被广泛应用在临床检查、诊断,为医务工作者对患者的诊断和治疗有了非常好的可靠的依据。研究医学图像的人员和医务工作者都希望图像的分析能够显示在屏幕上以便进行分析,这有更加直观、形象的视觉效果。经过十几年的发展,医学诊断设备已经从辅助诊断发展成为辅助治疗的重要手段,并已深入到医学的各个领域。
简介:摘要: 多数情况下U型换热器在焊接过程中会出现较多问题,从而直接影响到工程的施工质量。针对于此,部分施工团队尝试通过改变换热器的材质来保证施工中的具体应用情况。在多次实验下,可以发现U型铜质换热管在施工中的作用发挥十分稳定。因此,在进行实验数据整理后,本文对铜质优先换热器的实际使用情况进行了分析,并对焊接过程中的要点进行了总结。
简介:摘要:阅读圈模式就是以小组阅读为中心,以角色分工为依托,将听、说、读、写有机结合,推动学生自主探究,合作学习。在阅读圈讨论与分享的过程中交流思想,分享心得,从而有效提升学生的综合语言运用能力和核心素养。
简介:无