简介：摘要目的分析并比较2016年浙江省温岭地区EV71型轻、重症手足口病(HFMD)患儿病毒分离株VP1和VP4区基因特征及进化关系。方法研究对象为2016年浙江省温岭市第一人民医院分离鉴定的EV71型HFMD患儿，随机选取轻、重症HFMD患儿EV71病毒株各6例，进行VP1和VP4区基因扩增和测序，利用DNAStar和Mega 6.0软件对测序结果与美国国立生物信息中心公布的EV71典型基因代表株(A、B1～5、C1～4亚型)进行核苷酸和氨基酸比对分析，并构建系统进化树。结果轻、重症手足口病患儿性别(χ2＝14.51，P<0.05)和年龄(t＝2.82，P<0.05)差异无统计学意义。两组EV71分离株的VP1区核苷酸同源性为95.8%～99.6%，氨基酸同源性为99.1%～100%；VP4区核苷酸同源性为95.0%～99.9%，氨基酸同源性为99.0%～100%，轻、重症EV71分离株同源性高。它们与典型C4a基因型代表株最接近，氨基酸同源性为：96.6%～100%(VP1)和94.3%～100%(VP4)。3例EV71型重症HFMD患儿分离株分别出现VP1区V170L突变(缬氨酸→亮氨酸)，VP1区A293S(丙氨酸→丝氨酸)以及VP4区T7A(苏氨酸→丙氨酸)，其他未见明显突变。结论2016年浙江温岭地区轻、重症HFMD患儿EV71病毒分离株VP1和VP4区同源性高，且均属于C4a基因亚型。其中几个位点的氨基酸突变可能与浙江温岭地区HFMD患儿疾病危重有关。

简介：摘要目的了解厦门地区G9型A组轮状病毒主要中和抗原VP7的编码基因进化遗传变异与国内外部分地区VP7基因的差异。方法4株G9型A组轮状病毒毒株来自厦门市儿童医院腹泻患儿的粪便样本，采集时间分别为2017年10月5日、2017年11月12日、2017年12月7日和2018年1月15日。采用反转录聚合酶链反应检测G9型A组轮状病毒VP7的基因全长序列，并用DNA Star、MEGA等生物学软件对测序后获得的基因序列进行同源性分析、系统进化分析，以及氨基酸序列比对。结果进化树分析显示，厦门地区Amoy CHINA/2018地方株与成都市human/SC7/CHN/2013/G9地方株联系最为密切，与江苏省Hu/JS2016地方株同源性较远。氨基酸序列比对分析显示，与参考株WI61相比，厦门地方株在氨基酸一级结构上存在变异，包括D100N、Y144H，这两个位点是进化树Amoy CHINA/2018簇内的代表性变异位点。结论G9型A组轮状病毒VP7的基因组全长序列显示该病毒株在我国存在进化变异。

简介：无

简介：摘要：在高中生物教学中有效强化具体的模仿方法以及模型构建促进学生的生物学习能力以及合作能力的提升，促使学生在模型建构中初步掌握生物基础性概念，注重将生物学习内容有效解决生活实际中的问题，全方位提升学生实际问题的解决能力。在本文中则是进一步针对高中生物教学中所涉及到的具体的模型概念、模型方法以及模型构建等进行全方位的论述，从而为高中生物教师提供具体的参考依据。

简介：摘 要 RIS029VP作为高压安注贯穿件阀门，其常规解体检修窗口为低低水位，但对于无低低水位大修，常规检修窗口无法满足。本文旨在通过对运行技术规范要求及窗口优化可行性两方面的分析，论证 RIS029VP解体检修窗口可优化至 RCS模式（换料停堆模式），从而将 RIS029VP解体检修对无低低水位大修关键路径的影响减至最小。

简介：摘要目的了解浙江省衢州地区儿童病毒性脑炎埃可病毒(Echovirus, ECHOV)优势血清型与变迁并分析ECHOV VP1基因分子特征。方法采集53例病毒性脑炎患儿脑脊液标本进行病毒分离培养。采用荧光RT-PCR和PCR分别检测脑脊液标本中人肠道病毒(human enterovirus，HEV)包括ECHOV、柯萨奇病毒(coxsackie virus，CV)和新型肠道病毒(enterovirus，EV)，以及流行性乙型脑炎病毒(japanese encephalitis virus, JEV)、腮腺炎病毒(mumps virus, MuV)、西尼罗病毒(west nile virus，WNV)、基孔肯雅病毒(chikungunya virus，CHIKV)、单纯疱疹病毒(herpes simplex virus，HSV)和巨细胞病毒(cytomegalovirus，CMV)。HEV阳性脑脊液标本采用RT-PCR法扩增HEV-B组全长VP1基因序列，测序后用多种生物信息学软件分析ECHOV VP1基因型、基因重组和遗传进化特征。结果RD细胞分离培养出6株毒株，但Hep-2细胞分离培养结果均阴性。11份标本HEV通用荧光RT-PCR结果阳性，但其他病毒检测结果均阴性。11份HEV阳性标本中6份检出ECHOV，与分离培养结果一致，分别为4株ECHO6、1株为ECHO7和1株ECHO30血清型，柯萨奇病毒和EV检测结果均阴性。4株ECHO6病毒属于ECHO6-C2基因亚型，但分为ECHO6-41/46和ECHO6-45/48两个流行克隆，ECHO7和ECHO30分别属于ECHO7-C和ECHO30-C基因型。ECHO6与ECHO30病毒在进化过程中存在VP1基因重组。结论ECHOV是该地区儿童病毒性脑炎主要病原体，且可能存在局部暴发流行。ECHO6与ECHO30病毒VP1基因存在重组可能性，ECHO6有成为ECHOV优势血清型的可能。

简介：摘要：

简介：摘要目的原核表达柯萨奇病毒A组5型(coxsackievirus A5，CV-A5)VP1蛋白，并制备抗VP1多克隆抗体(多抗)，为CV-A5相关定性定量研究制备试剂。方法逆转录PCR扩增N端截短的CV-A5 VP1-ΔN56后，克隆至原核表达载体pGEX-6P-1，获得pGEX-6P-1-VP1-ΔN56。将其转化大肠埃希菌BL21(DE3)，表达重组蛋白并纯化。用纯化的谷胱甘肽巯基转移酶-VP1-ΔN56融合蛋白经背部皮下免疫日本大耳白兔，制备多抗。结果重组表达载体构建成功，融合蛋白以不可溶包涵体存在。ELISA、蛋白质印迹法检测表明，获得的兔多抗效价为107，可特异性识别重组和天然CV-A5 VP1蛋白。结论成功制备重组CV-A5 VP1蛋白及特异性多抗。为中和抗原表征研究及VP1定性定量分析奠定了基础。

简介：摘要： 在我国大力提倡退耕还林的前提下 ,森林资源得到了有效地保护。由于近几年来森林火灾不断发生 ,导致森林资源受到巨大的破坏 ,影响了人们正常的生活以及社会发展。做好目前的森林防火工作 ,是保护自然生态环境最有效的手段。

简介：摘要目的通过研究中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-HorseP[12]E403蛋白与寡糖、唾液受体的结合特征，进而为轮状病毒的跨种传播及受体间的作用机制提供重要科学依据。方法通过大肠杆菌表达系统表达、纯化中国马源P[12]型轮状病毒GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白，并利用唾液及寡糖结合实验分析该基因型的受体结合特征。结果马源GST-VP8*-Horse P[12]E403蛋白与黏蛋白核心mucin core 2糖结合良好，与A、B、Lewis型等寡糖及唾液中的HBGAs均不结合。结论VP8*-Horse P[12]E403蛋白的潜在受体可能是黏蛋白核心2，未与人唾液发生结合。

简介：摘要：目的 本研究试图将人源 A群轮状病毒（ HRV）的 VP7和 VP4基因片段串联克隆到表面表达载体 pLA上，构建出重组质粒 pLA-VP7-VP4-LTB，并将其电转化到乳酸菌中，制备出表达融合蛋白 pLA-VP7-VP4-LTB的重组干酪乳杆菌，并证明其具有良好的免疫原性。方法 采用分子克隆相关技术、间接免疫荧光试验、流式细胞术、间接 ELISA试验等。结论 成功制备出能表达融合蛋白的重组乳酸菌 pLA-VP7-VP4-LTB/L.casei，并证明该重组菌既可以刺激机体产生体液免疫，也可以刺激机体产生局部免疫，为进一步筛选制备适用于口服的轮状病毒基因工程乳酸菌疫苗的研究奠定实验基础。

简介：

简介：摘要：高中数学是一门难度较大的学科，想要有效提升教学效率，就需要利用模型教学去优化教学思维，帮助学生扩散其想象力。因此，在高中数学教学中，教师需要去培养学生的模型思想，并且结合相关的数学理念，进而去增强学生的综合素质。本文从培养建模意识、渗透建模方法、培养建模意识这三个方面进行讨论。

简介：摘要目的通过血流动力学、液体平衡相关参数建立脱机失败预测模型以指导临床脱机。方法回顾性分析2017年1月1日至2018年12月31日入住天津市第三中心医院重症医学科有创机械通气时间>24 h并进行脱机试验患者的临床资料。搜集患者入重症监护病房（ICU）24 h内的基线资料、脉搏指示连续心排血量监测（PiCCO）的血流动力学参数、B型利钠肽（BNP）、尿量、液体平衡量以及脱机前24 h内PiCCO监测的血流动力学参数、BNP、尿量、液体平衡量、利尿剂使用、去甲肾上腺素使用、机械通气期间连续性肾脏替代治疗（CRRT）使用情况。根据是否脱机成功将纳入患者分为脱机成功组和脱机失败组，比较两组间各变量的差异，将脱机前24 h内差异有统计学意义的变量纳入Logistic回归分析中，建立脱机失败预测模型，并找出造成脱机失败的可能因素。结果共有159例患者纳入研究，其中脱机成功138例，脱机失败21例。两组入ICU 24 h内PiCCO监测参数、BNP、尿量、液体平衡量比较差异均无统计学意义；两组脱机前24 h内BNP（χ2＝9.262、P＝0.026）、中心静脉压（CVP；χ2＝7.948、P＝0.047）、左室收缩力指数（dPmx；χ2＝10.486、P＝0.015）、尿量（χ2＝8.921、P＝0.030）、液体平衡量（χ2＝9.172、P＝0.027）差异均有统计学意义。此外，为完善模型和提高预测准确率，将脱机前心排血指数（CI；χ2＝7.789、P＝0.051）也纳入预测模型。最终将脱机前24 h内BNP、CVP、CI、dPmx、尿量、液体平衡量纳入Logistic回归模型，其预测脱机失败的准确率为92.9%，敏感度为100%，特异度为76.8%；用年龄和去甲肾上腺素使用进行校正后，其准确率为94.2%，敏感度为100%，特异度为81.2%。结论以PiCCO监测指标联合液体平衡指标建立脱机失败预测模型预测脱机的准确率高，能指导临床脱机。

简介：

简介：摘要目的利用汉逊酵母系统重组表达人细小病毒B19(human parvovirus B19, B19V)主要衣壳蛋白VP2，并对VP2病毒样颗粒(virus-like particles, VLP)进行理化性质研究及免疫效果评价。方法重组表达B19V VP2蛋白，并使其自组装成VLP；通过高密度发酵和系列层析纯化步骤获得VP2-VLP；SDS-PAGE和凝胶过滤高效液相色谱检测蛋白质纯度，动态光散射和透射电镜观察颗粒形态，并检测VP2-VLP磷脂酶活性。采用ELISA和红细胞凝集抑制试验检测小鼠体内VP2-VLP特异性IgG抗体和中和抗体水平。结果本研究制备的重组VP2-VLP纯度大于95%，颗粒均一且形态良好，大小近似天然病毒颗粒；VLP可与特异性单克隆抗体结合，磷脂酶A2活性为阴性；吸附佐剂后的VP2-VLP能够诱导小鼠产生高滴度的特异性IgG抗体和中和抗体。结论汉逊酵母表达系统制备的B19V VP2-VLP可作为候选靶抗原用于B19V预防性疫苗的开发。

简介：

简介：[摘要]在数学的解题中，学生应该体验问题解决中的思维走向，体会从最初的笨拙想法到问题信息再挖掘后的顺畅求解过程，理解从思维闭塞到反思后问题本质的提炼，进而推动解题过程的改进与优化，扩大解题效果．高三的复习更多的是解题教学，重视知识模型的构建，对高三的数学复习效率有很大的提高作用．

简介：摘要：南水北调中线由一条长长的开放式明渠和复杂的水力结构组成。它以极其严格的水质要求为城市提供饮用水。近几十年来，鉴于各类调水工程中偶有发生水污染事故。所以需要对其进行科学有效的风险评估，以评估其对整体应急管理的影响，同时应将其纳入社会，经济和环境问题，以便及时应对和管理突发事件。在这项研究中，我们以丹江口段为研究对象，组建了一个综合的水质安全评价模型，主要为协调发展度模型。该模型的建立可以更科学，更通用地评估事故，从而帮助管理人员或专家更快的做出更有效的决策。

简介：【论文摘要】结合当前教学中存在的普遍性问题，简要介绍了BOPPPS模型及其运用方法，梳理了关于BOPPPS教学模型的几点思考。