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  • 简介:目的:获得抑制效果好泛素C端水解酶LI(UCH—L1)基因小干扰RNA(siRNA)干扰载体。方法:根据Gen—Bank中大鼠UCH—L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列,将4对寡榱苷酸序列退、k成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP—miR构建4个siRNA表达质粒,测序鉴定后将4个siRNA表达磺牝分别转染HEK293细胞,利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果;将干扰效果最好质粒包装成腺病毒,感染大汛血管平滑肌细胞(VSMC),并采用TNF-a干预诱导UCH—Ll表达升高,Western印迹验证干扰效果。结果:测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP—miR;qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载沐对UCH—Ll表达抑制程度最高,将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFd湾导U(:H—I。l表达升高。结论:构建并筛选出干扰效果好UCH—LlsiRNA干扰载体。

  • 标签: 泛素C端水解酶L1 RNA干扰 HEK293细胞 血管平滑肌细胞
  • 简介:利用同源模建方法模拟得到了肝细胞生长因子4个Kringle域三维结构。结果表明,HGFKringle与纤溶酶原Kringle氨基酸序列具有较高同源性,其功能区附近序列比较保守。HGFKringlel和3与其它具有Lys结合功能Kringle相比,功能区残基发生了变化,可能丧失了结合Lys功能,而2和4仍具有一定该功能。根据Kringle1模建结构,推测该Kringle功能区结构为一个通道,该通道底部和一侧有部分疏水残基,同时两侧还分布着少量酸性或碱性残基,该通道可能具有结合特定肽链功能,从而与Kringle2一起实现HGF与受体结合作用。

  • 标签: 肝细胞生长因子 KRINGLE 三维结构 结构与功能关系
  • 简介:为了研究通过功能筛选得到一个新红细胞分化相关全长cDNA(命名为EDRFI)功能,选择K562细胞作为模型细胞来观察反义EDRFI表达对细胞功能影响.通过快速构建,同时得到了正向和反向插入片段真核表达载体pcDNA3-EDRFI-S(sense)及peDNA3-AS(antisense),并通过改进LipofectAMINE细胞转染和G418筛选,得到了稳定表达细胞株,进行基因组PCR鉴定,证明了转染高效性.NorrhemB10t试验结果表明,反义载体转染K562细胞,EDRF1在mRNA表达水平上受到下调,提示EDRF1反义DNA表达可能抑制了EDRF1mRNA正常转录.进一步,γ-珠蛋白和PKC-α表达在反义构建质粒转染K562细胞表达均受到下调,这可能传递了红细胞分化负反馈信号,从而抑制了珠蛋白合成.

  • 标签: 反义RNA 红细胞分化 蛋白激酶C-Α 信号转导 γ- 珠蛋白
  • 简介:克隆河南人免疫缺陷病毒(HIV)感染者HIV-1B型株tat基因完整编码框序列,并分析比较其编码产物序列结构特点.使用重叠PCR技术,从河南省1名HIV-1感染者外周血标本扩增出tat基因第一和第二外显子并重组为完整tat基因序列.获得HIV-1B病毒株tat基因,第一外显子为263bp,第二外显子为214bp.将该基因编码产物与其他HIV-1株Tat蛋白经DNA软件编辑并翻译成蛋白质,使用ClustalX1.81进行多序列对比分析发现,第一外显子编码产物3个保守区域氨基酸组成大致相同,只有少数氨基酸存在差异.由于Tat蛋白不同病毒株间有高度保守Cys富集区、核心区和碱性氨基酸富集区,tat基因克隆为研究其功能并以其为靶点设计和筛选抗艾滋病药物奠定了基础.

  • 标签: HIV-1 tat 序列分析 克隆 感染 B型
  • 简介:目的:分析物种间miRNA序列共同点和差异点,为后续miRNA研究奠定基础。方法:从miRBase数据库下载8种模式生物,即智人、小鼠、大鼠、果蝇、线虫、拟南芥、水稻、玉米全部miRNA,通过生物信息学相关软件及方法对其进行分析。结果:各物种成熟miRNA序列长度均约为22nt,植物miRNA长度分布范围较动物更集中;而pre-miRNA则相反,植物pre-miRNA长度变异远大于动物;各物种miRNA序列第一个碱基倾向于U,而其他位点碱基在不同物种间变异较大;miRNA保守性有一定范围,不存在在所有物种均保守miRNA。结论:找到了miRNA间一些共同点及差异点,可为后续miRNA鉴定注释提供借鉴。

  • 标签: MIRNA PRE-MIRNA 保守性 GC含量 碱基偏好性
  • 简介:本文研究了在室外条件下不同光程光生物反应器对Palmellococcusminiatus生长速率影响,结果表明在室外,光生物反应器光程越小,藻细胞生长速率越高,在光程1cm反应器达到最高,比生长速率为0.37d-1,生物量产率为163mgL-1d-1。反应器光程越大,培养系统单位表面积生产速率越大,在光程20cm反应器达到最大,为7.24gm-2d-1。

  • 标签: 光程 Palmellococcus miniatus 生长
  • 简介:长期以来,人参非侵染性病害一直没有得到人参种植户认识和重视。经过几年生产实际观察、总结,发现人参非侵染性病害是对人参生长影响比较普遍病害,必须加以预防。

  • 标签: 人参 非侵染性病害 预防
  • 简介:随着时代进步,社会发展,人们生活水平越来越高,近几年来,我国科学技术水平在不断提升,国家经济状况有了新貌,人们生活水平也在不断提高,同时,对身心健康要求标准也在改变,在家庭,每一个家庭成员都是一个家庭核心,家人也都非常重视他们健康.因此,医护研究人员要更加深入地研究医学护理,目前,酒精性肝病临床护理过程中产生安全问题逐渐增多,这些问题由很多因素造成,也给医院以及患者和患者家属带来许多难题.所以,在酒精性肝病临床护理工作,我们一定要找出影响护理安全因素,采取一切有效措施来解决这些问题,也能有效地避免许多不必要护理纠纷,提高医院社会信誉度,加快患者恢复进程.本文就影响酒精性肝病临床护理安全因素进行了简要阐述,并且对此提出了相应解决措施,希望对有效防护酒精性肝病护理工作安全问题能够有所帮助.

  • 标签: 酒精性肝病 临床护理 医院
  • 简介:人类诞生以来,人与生态环境关系就逐渐形成,并且随着人类文明发展逐渐发生着变化,两者之间关系十分复杂,人类有自己权利和价值,生态环境也一样.但人类在对自身权利和价值追求过程很难意识到生态环境自身权利和价值,因此在发展过程中生态环境危机则成为了人类活动必然产物.

  • 标签: 生态环境 生态危机 社会主义
  • 简介:"肿瘤干细胞学说"认为肿瘤组织不是均一,其中只有一小部分肿瘤干细胞具有诱发并维持肿瘤恶性表达能力.这一概念提出为肿瘤真正意义上靶向治疗找到了良方妙药,即选择性杀伤肿瘤干细胞从而治愈肿瘤.找到肿瘤干细胞并了解其生物学特性对我们真正理解肿瘤发生、发展和转归机制,根治肿瘤并防止肿瘤转移和复发具有积极意义.本文概述对人淋巴细胞白血病、乳腺肿瘤、脑部肿瘤及其他肿瘤肿瘤干细胞及其相关机制研究进展.

  • 标签: 肿瘤干细胞 人淋巴细胞白血病 乳腺肿瘤 脑肿瘤 肝肿瘤
  • 简介:随着大蒜种植面积扩大,耕作制度及栽培生态环境不断变化,大蒜植株抗病性也逐年降低,大蒜病虫害造成损失越来越大,因此,通过对大蒜产量低原因分析,总结出相应防治对策,从而达到增产增收目的。

  • 标签: 大蒜 产量 原因 对策
  • 简介:随着时代发展,社会进步,各个领域技术飞速发展,食品色素生物合成技术在不断进步。利用生物技术合成方式生产色素,不但能够缩短生产周期,还能够提高色素产量和品质。所以食品色素生物合成研究逐渐得到人们关注。本文从实际情况出发,从微生物发酵、微藻类养殖以及植物组织培养等方面对生物工程技术生产天然色素展开论述,深入分析了生物工程技术生产天然色素研究进展状况,希望能够对食品色素生物合成研究有所帮助。

  • 标签: 食品色素 生物合成 微生物 组织培养 微藻
  • 简介:目前在疫苗研究,要求新型疫苗不仅能够激发高效持久免疫应答,而且应易于接种、生产费用低.减毒或无毒活微生物作为疫苗载体能够激起持久系统和黏膜免疫反应,批量制备成本较低,且具有良好安全性,近年来已成为疫苗研究领域热点.本文综述了几种活菌疫苗载体,包括沙门氏菌、卡介苗、耶尔森菌等研究状况及其在疫苗载体方面的应用.

  • 标签: 黏膜免疫 疫苗 活菌疫苗载体
  • 简介:生物安全研究范畴涉及任何由生物威胁所造成风险。随着害虫优先考虑级别的不断变化,以及国家和部门间相互协作不断加强,对DNA分子鉴定技术标准化提出了更迫切要求,而DNA条形码出现为此类问题解决提供了很好机遇。我们以前人对毒蛾和果蝇研究为例,比较了DNA条形码技术与PCR-RFLP等传统方法鉴定效果,在此基础上提出了建立一个可对不同入侵种进行快速和准确鉴定条形码技术平台构想。

  • 标签: DNA条形码 生物安全 入侵种 物种鉴定
  • 简介:阿达木单抗是一种抗肿瘤坏死因子α全人源单克隆抗体,可特异性结合人肿瘤坏死因子α,阻止其与效应细胞结合而发挥生物学效应,在风湿性关节炎、银屑病、强直性脊柱炎,克罗恩病以及一些自身免疫性疾病治疗上取得了广泛应用,本文仅就在这些疾病临床治疗进展进行综述.

  • 标签: 阿达木单抗 自身免疫性疾病 临床应用
  • 简介:核受体是一类高度保守配体依赖性转录因子家族,在哺乳动物发育、繁殖、免疫应答、心血管功能、组织生长、肿瘤形成、外源物清除及糖类和脂质代谢等生理过程中发挥重要作用。机体对外源物质清除主要是由孕烷X受体等核受雄介导。孕烷X受体最早是作为外源物感受器而被研究,可以被大多数亲脂性药物等外源性化合物及一些内源性化合物如胆汁酸等结构差异很大配体激活,进而与视黄醇类X受体等形成异源二聚体,结合在ER6、XREM等DNA元件上,调控下游靶基因(包括一相代谢酶、二相结合酶及药物转运体等基因)表达。此外,孕烷X受体在能量代谢和免疫反应也有重要作用,参与某些代谢疾病发生发展,且已在动物模型中被证明是Ⅱ型糖尿病、血脂异常、肥胖症和动脉粥样硬化等代谢疾病治疗有效靶标。我们主要就其发现、结构、组织分布、作用方式、自身表达调节等方面的最新研究进行综述。

  • 标签: 核受体 孕烷X受体 外源物代谢
  • 简介:本文评述了工程抗体酶研究现状和抗体酶在防化医学研究应用。抗体库技术出现使抗体酶研究呈现了新生机。不仅使不具备细胞工程实验条件实验室能够制备抗体酶,而且实验周期大大缩短,比杂交瘤技术提供多20倍结合性抗体作为潜在抗体酶,使抗体酶更易获得。抗体库技术能够容易地评价编码抗体酶基因,因而可以在分子水平上认识和改造抗体酶。噬菌体抗体库可以不经免疫即可制备抗体特点,使通过人源性噬菌体抗体库生产抗体酶能够直接用于临床治疗。随着工程抗体酶研究不断深入,新颖实用抗体酶将会被应用于包括军事医学在内多种领域中。

  • 标签: 工程抗体酶 噬菌体抗体库 催化活性
  • 简介:随着医药改革进程不断推进,我国加强了对于医院服务水平和服务质量相关标准建立和核查.药物管理作为医院深化改革主要内容之一,如何改变药物管理现状,成为人们关注焦点,加强医院药物管理工作可以有效推动医院科学现代化建设.因此,本文浅析了药物管理重要作用,进而对当前我国医院药房管理现状及问题进行了深入分析,并在文章最后具有针对性提出相应解决措施,进而能够在最大程度上改善我国医院药物管理现状,推动我国药物管理实现现代化管理.

  • 标签: 基层医院 药物管理 存在问题 应对措施
  • 简介:microRNA(miRNA)是一类内源性非编码小RNA,广泛存在于病毒、植物和动物等生物体内。miRNA通过与目标mRNA互补配对,对基因进行转录后表达调控,在生物体发育、增殖、分化和凋亡等方面发挥重要生理作用。最近研究表明,miRNA与病毒介导肿瘤之间存在密切关系,尤其在调控乙肝病毒介导肝癌、人乳头瘤病毒介导宫颈癌及EB病毒介导鼻咽癌、淋巴瘤等肿瘤中发挥重要作用。在病毒导致肿瘤发生与发展过程,miRNA表达谱出现时间与空间上改变,其表达调控成为近年来病毒致癌研究热点。我们简要综述病毒致癌相关miRNA研究进展。

  • 标签: MICRORNA 病毒 致癌