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  • 简介:分子标记由于能够反映DNA水平上遗传变异而成为研究遗传多样性重要方法。本文综述了利用分子标记分析高粱遗传多样性研究进展,并阐述了遗传多样性分析在种质创新中应用方向,提出了利用分子标记分析高粱遗传多样性研究中尚需进一步加强研究内容。

  • 标签: 高粱 分子标记 遗传多样性 种质创新
  • 简介:水稻超稀植栽培技术是以旱育稀植、大棚育秧为主一项综合栽培技术,该技术充分发挥了稻株自身生长能力,提高个体质量,使水稻优质、高产,同时该技术还具有省种、省水、节本、增产等优点,特别适合寒地水稻高产栽培。在栽培过程中有一些注意事项。

  • 标签: 水稻超稀植栽培技术 优势 注意事项
  • 简介:目的对雌性树Ju麻醉,生殖器官解剖与卵母细胞形态特征进行观察,为制备转基因树Ju奠定基础,方法用1%戊巴比妥钠(10^-3ml/g体重)肌内注射对树Ju麻醉,比较在不同环境温度下对麻醉效果影响。对雌性树Ju生殖器官解剖结构,卵母细胞形态特征等进行观察。结果(1)在25-28℃,18-20℃下麻醉持续时间分别为80min,130min;(2)雌性树Ju子宫为双角子宫,卵巢外有包膜;(3)卵母细胞富含色素,卵母细胞透明带与质膜韧性较山羊强,结论在25-28℃下,用1%戊巴比妥钠(10^-3ml/g体重)对树Ju麻醉时间比较适中,便于实验操作而且苏醒快,雌性树Ju生殖器官解剖结构,卵母细胞形态特征观察表明,树Ju胚胎移植,转基因等实验操作与小鼠类似,但树Ju受精卵须进行离心处理。

  • 标签: 雌性树Ju 麻醉 生殖器官 解剖 实验动物 卵母细胞
  • 简介:目的:获得抑制效果好泛素C端水解酶LI(UCH—L1)基因小干扰RNA(siRNA)干扰载体。方法:根据Gen—Bank中大鼠UCH—L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列,将4对寡榱苷酸序列退、k成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP—miR中构建4个siRNA表达质粒,测序鉴定后将4个siRNA表达磺牝分别转染HEK293细胞,利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果;将干扰效果最好质粒包装成腺病毒,感染大汛血管平滑肌细胞(VSMC),并采用TNF-a干预诱导UCH—Ll表达升高,Western印迹验证干扰效果。结果:测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6.2-GW/EmGFP—miR;qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载沐对UCH—Ll表达抑制程度最高,将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFd湾导U(:H—I。l表达升高。结论:构建并筛选出干扰效果好UCH—LlsiRNA干扰载体。

  • 标签: 泛素C端水解酶L1 RNA干扰 HEK293细胞 血管平滑肌细胞
  • 简介:目的:构建大鼠CB1(rCB1)基因真核表达载体,检测rCB1基因在细胞中表达,研究rCB1对人宫颈癌CaSki细胞凋亡影响。方法从大鼠脑组织中提取总RNA,RT-PCR扩增rCB1基因,通过酶切、纯化、连接PCR纯化产物与pCDNA3.1(+)质粒,构建pcDNA3.1(+)-rCB1。脂质体法将其转染到HEK293和CaSki细胞,Westernblot及细胞免疫荧光联合激光扫描共聚焦方法检测rCB1表达及定位,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Westernblot与实时荧光定量PCR检测rCB1、Bcl-2、Bax、Bad表达。结果酶切重组质粒获得5300bp载体片段和1500bp目的片段,测序结果和rCB1基因序列(NM_012784.4)一致。转染HEK293细胞后,rCB1在HEK293细胞细胞膜和细胞质表达。转染CaSki细胞后,rCB1使细胞凋亡率增加(P<0.05);rCB1基因上调Bax、Bad表达,同时抑制Bcl-2表达,与空白组比较,其差异具有显著性(P<0.05)。结论成功构建了pcDNA3.1(+)-rCB1真核表达载体,rCB1表达于细胞膜和细胞质,rCB1可以明显促进宫颈癌CaSki细胞凋亡,其机制是上调Bax、Bad和抑制Bcl-2表达。

  • 标签: CB1基因 HEK293细胞 CASKI细胞 细胞凋亡 rCB1
  • 简介:利用同源模建方法模拟得到了肝细胞生长因子4个Kringle域三维结构。结果表明,HGFKringle与纤溶酶原Kringle氨基酸序列具有较高同源性,其功能区附近序列比较保守。HGFKringlel和3与其它具有Lys结合功能Kringle相比,功能区残基发生了变化,可能丧失了结合Lys功能,而2和4仍具有一定该功能。根据Kringle1模建结构,推测该Kringle功能区结构为一个通道,该通道底部和一侧有部分疏水残基,同时两侧还分布着少量酸性或碱性残基,该通道可能具有结合特定肽链功能,从而与Kringle2一起实现HGF与受体结合作用。

  • 标签: 肝细胞生长因子 KRINGLE 三维结构 结构与功能关系
  • 简介:为了研究通过功能筛选得到一个新红细胞分化相关全长cDNA(命名为EDRFI)功能,选择K562细胞作为模型细胞来观察反义EDRFI表达对细胞功能影响.通过快速构建,同时得到了正向和反向插入片段真核表达载体pcDNA3-EDRFI-S(sense)及peDNA3-AS(antisense),并通过改进LipofectAMINE细胞转染和G418筛选,得到了稳定表达细胞株,进行基因组PCR鉴定,证明了转染高效性.NorrhemB10t试验结果表明,反义载体转染K562细胞中,EDRF1在mRNA表达水平上受到下调,提示EDRF1反义DNA表达可能抑制了EDRF1mRNA正常转录.进一步,γ-珠蛋白和PKC-α表达在反义构建质粒转染K562细胞中表达均受到下调,这可能传递了红细胞分化负反馈信号,从而抑制了珠蛋白合成.

  • 标签: 反义RNA 红细胞分化 蛋白激酶C-Α 信号转导 γ- 珠蛋白
  • 简介:多模态融合分子影像技术整合了多种分子影像技术优势,已成为当前分子影像领域研究热点和发展趋势。新近报道七甲川菁(heptamethinecyanine)染料是一类具有肿瘤靶向性近红外荧光(near-infraredfluorescence,NIRF)制剂。该染料独特光学特征使其在肿瘤分子影像、靶向治疗和药物传递系统方面具有广阔应用前景。纳米材料包裹该类染料可用于NIRF/MRI双模成像,标记核素后可实现NIRF/PET双模成像,共轭结合化疗药物后,可实现抗肿瘤药物靶向传递,多个七甲川菁染料复合物已被用作多模态成像,成为光热、光动力学和组合治疗肿瘤新策略。

  • 标签: 近红外荧光 多模态成像 肿瘤模型 分子影像
  • 简介:对同一菌物不同形态型分别命名做法于2011年结束,这就需要对非地衣化多型性子囊菌和担子菌采用统一命名。地衣生Koordersiella属因此也只需要单一名称,而后发表Hansfordiellopsis就是该属异名。此属共有5个种,包括在此发表2个新组合:K.tenuissima和K.variegatecombs.Nov.。本文列举了该属地衣寄主和已报道地理分布,同时也提供了已被接受物种检索表。此外,在Hansfordiellopsis下发表1个种和在Koordersiella下发表2个种,因与该属模式种显然为不同属而被排除。由于缺乏分子序列数据,Koordersiella属在座囊菌纲(Dothideomycetes)中系统学地位目前仍然不明确。

  • 标签: Ascohansfordiellopsis 子囊菌 座囊菌纲 丝孢纲 地衣
  • 简介:克隆河南人免疫缺陷病毒(HIV)感染者HIV-1B型株tat基因完整编码框序列,并分析比较其编码产物序列结构特点.使用重叠PCR技术,从河南省1名HIV-1感染者外周血标本中扩增出tat基因第一和第二外显子并重组为完整tat基因序列.获得HIV-1B病毒株tat基因,第一外显子为263bp,第二外显子为214bp.将该基因编码产物与其他HIV-1株Tat蛋白经DNA软件编辑并翻译成蛋白质,使用ClustalX1.81进行多序列对比分析发现,第一外显子编码产物3个保守区域氨基酸组成大致相同,只有少数氨基酸存在差异.由于Tat蛋白不同病毒株间有高度保守Cys富集区、核心区和碱性氨基酸富集区,tat基因克隆为研究其功能并以其为靶点设计和筛选抗艾滋病药物奠定了基础.

  • 标签: HIV-1 tat 序列分析 克隆 感染 B型
  • 简介:目的建立具有稳定性高,重复性强,存活时间长大鼠心肌梗死模型,探讨采用心电图(ECG)和心脏超声心动图(UCG)监测心梗后心电生理和左室功能变化可行性。方法Wistar大鼠经10%水合氯醛麻醉后,气管切开插管及连通呼吸机,开胸后结扎冠状动脉左前降支。于手术后4、8和12周行ECG检测和UCG检查,术后12周取出心脏行病理检查。结果采用本法建立大鼠心肌梗死模型,术后72h内大鼠存活率为83.3%,术后12周以上大鼠存活率为73.3%。术后48、和12周ECG监测示心梗后PR间期,QRS时限,QT间期和QTc间期均较假手术组延长,同期行UCG监测示心梗后左室舒张末期内径和左室收缩末期内径显著增加,左室射血分数值和左室短轴缩短率值显著降低,12周后组织病理HE染色符合慢性心肌梗死病理改变。结论本技术操作简单、创伤轻、成功率高,术后采用ECG和UCG可有效监测心梗后不同时期心电变化和左室功能变化。

  • 标签: 心肌梗死 心电生理 左室功能
  • 简介:为研究桦褐孔菌菌质多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖影响,采用水提醇沉法提取粗多糖,Sevag法脱蛋白后透析,再经DEAE—SepharoseCL-6B离子交换柱进一步分离纯化,MTT法检测不同浓度桦褐孔菌菌质多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖影响。试验结果得到3个多糖纯化组分JZP1、JZP2、JZP3;粗多糖(JZPC)、精制多糖(JZPJ)和纯化多糖(JZP3),能够促进淋巴细胞增殖,最大增殖率分别为59.04%(1000μg/mL),44.58%(20μg/mL),39.76%(20仙g/mL)。JZP1和JZP2在1000μg/mL时抑制淋巴细胞增殖,抑制率分别15.66%和13.25%。结果表明相同浓度下粗多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖作用强于纯化多糖,不同多糖组分表现出不同免疫学活性,并且其免疫活性与其浓度密切相关。

  • 标签: 桦褐孔菌菌质 多糖纯化 淋巴细胞 增殖作用
  • 简介:目的通过研究烟曲霉对细胞壁合成干扰物质及棘白菌素类药物敏感性、烟曲霉在受热应激后HOG通路成分表达变化探讨pbs2基因在热应激和胞壁应激双重应激中作用。方法烟曲霉野生株AF293和pbs2突变株在含钙荧光白(Calcofluorwhite,CFW),刚果红(Congored,CR)和十二烷基硫酸钠(Sodiumdodecylsulfate,SDS)葡萄糖酵母浸液琼脂(YeastAgarGlucose,YAG)上生长,观察其对上述3种细胞壁合成干扰物质敏感性。微量液基稀释法检测烟曲霉对米卡芬净和卡泊芬净敏感性。实时荧光定量PCR法分析AF293受到热刺激前后菌体pbs2和hog1RNA含量变化。结果50℃培养时pbs2突变株对胞壁合成干扰物质敏感性较野生株AF293增强,600μg/mLCFW,400μg/mLCR及100μg/mLSDS完全抑制pbs2突变株生长,不能完全抑制AF293生长;在37℃培养时,AF293和pbs2突变株敏感性没有差异。50℃培养时,卡泊芬净和米卡芬净对AF293和pbs2突变株最低有效浓度(Minimumeffectiveconcentration,MEC)均为0.25μg/mL,但pbs2突变株在药物浓度为0.5μg/mL作用时生长完全受抑制,而野生株仍生长;在35℃和42℃培养时,AF293和pbs2突变株对两种药物敏感性没有差异,MEC均为0.5μg/mL。50℃热应激后,AF293pbs2和hog1RNA表达量分别下降至37℃时3%和13%;pbs2突变株hog1降至应激前35%。结论烟曲霉受热应激和胞壁应激双重应激时,pbs2基因参与细胞适应反应,发挥保护作用。

  • 标签: pbs2 烟曲霉 热应激 胞壁刺激
  • 简介:通过对湖南农户自留种原地保存(简称农户保存)与异地低温保存在湖南种质库(简称种质库保存)92份同近名水稻材料(7组,同近名材料6组)间表现型及基因型进行分析,鉴定同近名品种间遗传距离,为之后有效保存、针对性供种、高效利用提供理论依据。结果表明.供试同近名材料间,及农户保存与种质库保存同近名材料间在表现型性状上都有极显著差异。通过SSR标记基因型比较农户保存与种质库保存湖南同近名材料,发现除E组外,其他组都是农户保存等位基因变异数小于种质库保存等位基因变异数,说明农户保存材料在年复一年种植、收种过程中经历了自然选择和人工选择留种,进行了加代纯化。除C、E组外。在同近名组内SSR标记遗传相似系数显示,农户保存材料间〉种质库保存材料间〉农户保存材料与种质库保存材料。表明农户自留种保存同近名水稻资源值得收集评价。

  • 标签: 水稻 同名地方稻 SSR标记 表现型性状 遗传相似性
  • 简介:采用同源克隆方法在玉米中得到一个与拟南芥耐盐基因AVP1类似的基因。BLAST分析表明,该基因编码蛋白属于质子泵焦磷酸酶家族(H_PPasesuperfamily)中Ⅰ型VPP,将其命名为ZmVPP1。ZmVPP1包含一个2301bp开放阅读框,编码766个氨基酸残基。蛋白比对结果表明,该蛋白在不同植物中相当保守。实时荧光定量PCR检测发现,ZmVPP1基因在成熟叶片中高丰度表达,在生殖器官中表达量较少。脱水、高盐、低温等逆境胁迫条件和ABA处理下表达分析表明,Zm-VPP1基因受逆境诱导表达,属于不依赖于ABA途径。由此推断,ZmVPP1可能参与玉米对Na+隔离,从而起到耐盐作用。

  • 标签: 玉米 VPP H_PPase 逆境 耐盐
  • 简介:目的:肿瘤多药耐药现象会显著降低肿瘤细胞内药物浓度,本研究通过制备抗肿瘤多药耐药靶向给药系统来逆转肿瘤耐药性以提升细胞对药物敏感性,从而降低该现象对癌症治疗阻碍。方法:本文使用乳化溶剂挥发法制备以含姜黄素两亲性嵌段共聚物载体、以紫杉醇和磁性粒为核心抗肿瘤多药耐药纳米粒,使用透射电镜和动态粒径散射仪等对纳米粒进行表征和磁响应性测试后,使用MTT法测定纳米粒对肿瘤耐药细胞MCF-7/ADR抑制率以探究给药系统耐药逆转性能。结果:制备抗肿瘤多耐药纳米粒粒径为105nm左右,磁响应性良好。所制得载紫杉醇纳米粒包封率为74.74%,载药率为12.40%。纳米粒可以通过磁场和生物素受体介导作用促进肿瘤细胞对粒子内化,以增加抗癌药物蓄积。与游离紫杉醇相比,逆转细胞耐药指数达8.5。结论:纳米系统在维持自身稳定性同时,能够凭借协同作用和靶向作用较大程度提升药物对耐药肿瘤细胞杀伤效果。

  • 标签: 纳米粒 抗肿瘤 靶向性 逆转耐药
  • 简介:Excel是常用电子表格处理软件,笔者采用基于ExcelVBA编程方法,编写了“多项式三角函数拟合单峰曲线”程序,经教学科研工作中使用,获得了理想效果。文中发表了该程序源代码及使用方法,供广大科教人员下载使用。

  • 标签: EXCEL VBA编程 多项式的三角函数 单峰曲线
  • 简介:裸鼹鼠具有抗肿瘤、耐低氧、耐疼痛、寿命长等优势特性,引起了国内外广泛关注,其实验动物化及应用推广迫在眉睫。本团队围绕裸鼹鼠实验动物化及标准化开展了系统研究。通过对裸鼹鼠繁殖、遗传、微生物及营养学研究,解决了了裸鼹鼠繁殖率低下,遗传背景不明确和携带病原微生物不明等问题,成功建立了普通级封闭群裸鼹鼠种群,现种群已繁殖至第6世代。同时对所建立种群生物学特性,如耐低氧、抗肿瘤、抗衰老等开展了系统研究,为相关疾病研究和药物研发提供了新动物模型材料和研究策略。

  • 标签: 裸鼹鼠 普通级 封闭群 耐低氧 抗衰老
  • 简介:目的:分析物种间miRNA序列共同点和差异点,为后续miRNA研究奠定基础。方法:从miRBase数据库下载8种模式生物,即智人、小鼠、大鼠、果蝇、线虫、拟南芥、水稻、玉米全部miRNA,通过生物信息学相关软件及方法对其进行分析。结果:各物种成熟miRNA序列长度均约为22nt,植物miRNA长度分布范围较动物更集中;而pre-miRNA则相反,植物pre-miRNA长度变异远大于动物;各物种miRNA序列第一个碱基倾向于U,而其他位点碱基在不同物种间变异较大;miRNA保守性有一定范围,不存在在所有物种中均保守miRNA。结论:找到了miRNA间一些共同点及差异点,可为后续miRNA鉴定注释提供借鉴。

  • 标签: MIRNA PRE-MIRNA 保守性 GC含量 碱基偏好性
  • 简介:本文研究了在室外条件下不同光程光生物反应器对Palmellococcusminiatus生长速率影响,结果表明在室外,光生物反应器光程越小,藻细胞生长速率越高,在光程1cm反应器中达到最高,比生长速率为0.37d-1,生物量产率为163mgL-1d-1。反应器光程越大,培养系统单位表面积生产速率越大,在光程20cm反应器中达到最大,为7.24gm-2d-1。

  • 标签: 光程 Palmellococcus miniatus 生长