简介:目的探讨一种可溶性的外分泌因子midkine-a在斑马鱼胚胎心脏发育过程中的功能.方法在整体胚胎上做midkine-aRNA的原位杂交实验;利用原有的转基因斑马鱼系Tg(pmidkine-a:EGFP),动态观察胚胎从出生到心脏发育成形这一段时间心脏荧光表达情况;将原有的转基因斑马鱼体系Tg(phsp:midkine-a:EGFP)胚胎进行热休克而过表达midkine-a,观察胚胎心脏表型;利用Tg(pcmlc2:dsRed)鱼系胚胎的心肌细胞核带有红色荧光,能进行单个心脏心肌细胞计数这一特点,将杂合的Tg(phsp:midkine-a:EGFP)鱼系与纯合的Tg(pcmlc2:dsRed)鱼系交配,以得到Tg(phsp:midkine-a:EGFP/pcmlc2:dsRed)的杂合胚胎,对其进行热休克而过表达midkine-a,计算每个胚胎心脏内心肌细胞的总数;用吗啉寡聚核苷酸(morphonino,MO)阻碍新生胚胎内的midkine-amRNA表达,观察胚胎心脏表型.结果原位杂交试验证实midkine-a在胚胎48hpf(hourpostfertilization,受精后,用来标记斑马鱼胚胎年龄)大时表达于心脏;转基因Tg(pmidkine-a:EGFP)胚胎在72hpf时其EGFP表达于心脏;Tg(phsp:midkine-a:EGFP)胚胎在过表达midkine-a后心脏变小;吗啉寡聚核苷酸敲除midkine-a对胚胎心脏发育无影响;最后在Tg(phsp:midkine-a:EGFP/pcmlc2:dsRed)鱼系胚胎内过表达midkine-a导致其单个心脏内心肌细胞数目变少,与其小心脏外形吻合.结论midkine-a在斑马鱼胚胎发育过程中表达于胚胎心脏;过表达midkine-a导致胚胎心脏内心肌细胞总数减少及心脏变小;敲除midkine-a则对胚胎心脏发育无影响.
简介:摘要:确认实验室能够正确应用GB 4789.2—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》检测该偏酸性胶囊。方法:按GB 4789.2—2016[1]、《中华人民共和国药典》2020版四部[2],人为添加目标微生物,包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌到臻源胶囊样液中,采用A、B两种前处理方式,A是不调节PH,按GB 4789.2方法检测,B是样品稀释后,将样品匀液的pH调节在6.5~7.5之间后按GB 4789.2方法检测,两种方式分别连续进行三次独立实验,计算其回收率。回收率在0.5-2之间,则该方法适用;回收率不在这个范围,则该方法不适用。结果:按A方式,对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌均有不同程度抑制,回收率不达标。按B方式,对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌没有抑制,回收率达标。结论:应用GB 4789.2—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》检测该偏酸性胶囊,样品前处理需将样品匀液的pH调节在6.5~7.5之间。
简介:摘要:确认实验室能够正确应用GB 4789.2—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》检测该偏酸性胶囊。方法:按GB 4789.2—2016[1]、《中华人民共和国药典》2020版四部[2],人为添加目标微生物,包括金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌到臻源胶囊样液中,采用A、B两种前处理方式,A是不调节PH,按GB 4789.2方法检测,B是样品稀释后,将样品匀液的pH调节在6.5~7.5之间后按GB 4789.2方法检测,两种方式分别连续进行三次独立实验,计算其回收率。回收率在0.5-2之间,则该方法适用;回收率不在这个范围,则该方法不适用。结果:按A方式,对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌均有不同程度抑制,回收率不达标。按B方式,对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌没有抑制,回收率达标。结论:应用GB 4789.2—2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》检测该偏酸性胶囊,样品前处理需将样品匀液的pH调节在6.5~7.5之间。
简介:【摘要】目的:刍议PCR检验法与细菌培养法的应用对提高阴道细菌检验准确性的影响。方法:我院2021年1月~2022年1月随机抽取了110例阴道细菌检验患者作为研究对象,使用计算机表法分组分为实验组55例与参照组55例。其中实验组实行PCR检验法而参照组采用细菌培养法,重点对比两组的检验效果。结果:(1)实验组与参照组致病菌阳性检出率相比差异显著有统计学意义,P<0.05。(2)实验组与参照组检验灵敏度、特异度相比差异均显著有统计学意义,P<0.05。结论:阴道细菌检验中PCR检验法的应用可提高致病菌检出率,而且检验灵敏度和特异度均较高。
简介:【摘要】目的:研究分析对阴道炎患者阴道细菌检查中使用 PCR检查法与细菌培养法的效果差异。方法:从 2018年 09月 -2019年 09月期间在我院阴道炎患者中随机选取 92人,分别采集样本后分别进行 PCR检查法与细菌培养法检验菌株,比较分析两组检测结果的差异,进而分析两种检验方法的应用价值。结果:细菌培养组样本检测结果显示棒状杆菌、戛纳杆菌、肠球菌分别有 16例、 35例、和 14例,分别占比 17.39%、 38.04%和 15.22%,检出率为 70.65%, PCR检查组样本检测结果显示棒状杆菌、戛纳杆菌、肠球菌分别有 26例、 39例、和 19例,分别占比 28.26%、 42.39%和 20.65%,检出率为 91.30%,相比之下, PCR检查组检测结果阳性率较高,差异有统计学意义( P<0.05)。结论:相比细菌培养法,对阴道炎患者阴道细菌检查中使用 PCR检查法能有效提升菌株检出率,具有推广价值。
简介:摘要细菌的抗菌素耐药已成为威胁人类健康的重大问题,亟需新策略阻控细菌耐药。群体感应是微生物细胞间交流的一种机制,当环境中群体密度达到阈值后群体感应即被激活,调控下游基因转录。群体感应已被证实可调控生物膜、外排泵、细菌分泌系统等抗菌素耐药机制,有望成为耐药调控靶点。目前已有多种群体感应抑制剂通过降解信号分子、干扰信号分子与受体蛋白的识别和结合、阻断群体感应信号的合成等方式干扰群体感应。群体感应抑制剂有望成为阻控微生物耐药的新方法。
简介:目的总结和分析某医院2007年细菌耐药监测资料。方法采用API系统鉴定细菌到种,以纸片扩散法进行药敏试验(按照美国临床实验室标准化研究所2007年标准),药敏结果以WHONET5.4软件进行统计分析。结果全年共分离3107株细菌,革兰阴性菌占60.93%,革兰阳性菌占27.78%,真菌占11.30%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌分别占金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的60.58%和77.35%。屎肠球菌的分离数和耐药率均高于粪肠球菌(P〈0.(15),氨基糖苷类高度耐药肠球菌的产生率为59.44%。大肠埃希菌和克雷伯菌属超广谱β-内酰胺酶产生率分别为59.50%和55.98%。63.97%的铜绿假单胞菌来源于痰标本,不同科室痰标本中分离的铜绿假单胞菌耐药率从高到低依次为重症监护室(21.05%)、神经外科(15.99%)、呼吸急救儿科(7.09%)、呼吸内科(6.07%)。结论定期总结医院细菌耐药监测结果,发现细菌呈多重耐药趋势,对规范医生合理使用抗菌药物具有重大意义。