简介:摘要目的初步探讨高危型人乳头瘤病毒16(human papillomavirus 16,HPV16)E6蛋白促进宫颈癌细胞增殖、侵袭和迁移的潜在免疫调控分子机制。方法构建HPV16 E6蛋白过表达慢病毒并感染C33A细胞,获得C33A-E6稳定细胞系,采用qRT-PCR和Western blot法检测C33A和C33A-E6组细胞内HSP70的表达。放线菌素D(ActD)和放线菌酮(CHX)处理细胞后不同时间采用qRT-PCR和Western blot法分别检测HSP70 mRNA和蛋白质降解速率。超速离心法提取两组细胞外泌体,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外泌体中HSP70含量。提取C33A和C33A-E6细胞干扰HSP70表达后的外泌体,ELISA检测经外泌体处理的THP-1细胞培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10的表达水平。将外泌体处理的THP-1细胞与C33A细胞共培养,CCK-8法检测C33A细胞增殖。Transwell小室评估C33A细胞侵袭和迁移状态。结果与C33A细胞相比,C33A-E6细胞HSP70 mRNA水平显著增高(P<0.05),但蛋白质水平没有明显变化(P>0.05)。经ActD/CHX处理不同时间的两组细胞中HSP70 mRNA和蛋白质降解速率差异无统计学意义(P>0.05),但C33A-E6组分泌的外泌体中HSP70含量明显增高(P<0.001)。C33A-E6细胞分泌的外泌体可增强THP-1细胞分泌IL-6、TNF-α和IL-10的水平(P<0.001),并且外泌体处理后的THP-1细胞可促进C33A细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.001);而干扰C33A-E6细胞中HSP70的表达可显著降低外泌体诱导的THP-1细胞分泌IL-6和IL-10及THP-1细胞对C33A细胞增殖、迁移和侵袭的促进作用(P<0.001)。结论高危型HPV16 E6蛋白可上调宫颈癌细胞外泌体中HSP70的表达,进而促进巨噬细胞分泌IL-6和IL-10,并介导宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。
简介: 摘要:世界各国科技蓬勃发展的今天我国对于人才培养的期盼逐项增加,新一轮课程改革也在这样的殷殷期盼中发展,学生的主体地位越来越重要,因此提高生物课堂培养学生能力的水平势在必行。"7E"教学模式是在"5E"教学模式的基础上进一步发展而来,"7E"教学模式共包含七个教学环节,教学环节之间环环相扣且注重突出学生的主体地位。若能适当的在教学中运用"7E"教学模式,那无疑会对现阶段的中学生物课堂教学效果起到促进作用,本文就从以下五个方面提出"7E"教学模式在中学生物学教学中的作用。
简介:Itisknownfromclassicaldifferentialgeometrythatonecanreconstructacurvewith(n-1)prescribedcurvaturefunctions,ifthesefunctionscanbedifferentiatedacertainnumberoftimesintheusualsenseandifthefirst(n-2)functionsarestrictlypositive.ItisestablishedherethatthisresultstillholdsundertheassumptionthatthecurvaturefunctionsbelongtosomeSobolevspaces,byusingthenotionofderivativeinthedistributionalsense.ItisalsoshownthatthemappingwhichassociateswithsuchprescribedcurvaturefunctionsthereconstructedcurveisofclassC∞.