简介：摘要目的研究叔丁基对苯二酚(tBHQ)对高糖环境下SD大鼠视网膜Müller细胞氧化应激的影响及其机制。方法体外培养SD大鼠视网膜Müller细胞。将实验分为正常对照组、高糖组和tBHQ干预组，采用Western blot法和实时荧光定量PCR测定各组Müller细胞核因子-E2相关因子(Nrf2)、血红素氧化酶1(HO-1)、缺氧诱导因子1 α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及其mRNA的相对表达量。结果体外培养Müller细胞的细胞体扁平不规则，细胞核呈卵圆形，细胞质丰富，相邻细胞交织形成网状；Western blot法检测结果显示，正常对照组、高糖组和tBHQ干预组Müller细胞中Nrf2、HO-1、HIF-1α和VEGF的蛋白相对表达量总体比较，差异均有统计学意义(F＝73.831、148.618、152.269、91.217，均P<0.001)；其中高糖组Nrf2、HO-1、HIF-1α和VEGF蛋白相对表达量分别是0.17±0.02、0.47±0.02、0.67±0.07和0.60±0.05，较正常对照组的0.06±0.01、0.19±0.03、0.06±0.00和0.07±0.02明显增加，差异均有统计学意义(t＝4.114、9.275、16.479、13.353，均P<0.001)；tBHQ干预组Nrf2、HO-1蛋白表达量分别为0.40±0.06、0.72±0.05，较高糖组增加，差异均有统计学意义(t＝7.847、7.947，均P<0.001)；tBHQ干预组HIF-1α、VEGF蛋白表达量分别为0.18±0.04、0.26±0.07，较高糖组降低，但较正常对照组增加，差异均有统计学意义(t＝13.215、8.444，均P＝0.000)。实时荧光定量PCR测定结果显示，正常对照组、高糖组和tBHQ干预组Müller细胞中Nrf2、HO-1、HIF-1α和VEGF mRNA相对表达量总体比较，差异均有统计学意义(F＝340.317、1 582.911、488.852、185.699，均P<0.001)；其中高糖组Nrf2、HO-1、HIF-1α和VEGF mRNA相对表达量分别是1.53±0.06、1.50±0.04、2.56±0.09和3.04±0.19，较正常对照组的1.07±0.07、0.95±0.05、0.99±0.02和1.09±0.08明显增加，差异均有统计学意义(t＝7.292、15.014、30.550、18.573，均P<0.001)；tBHQ干预组Nrf2、HO-1mRNA相对表达量分别为2.68±0.09、2.94±0.05，较高糖组增加，差异均有统计学意义(t＝18.046、39.458，均P<0.001)；tBHQ干预组HIF-1α、VEGF mRNA相对表达量分别为1.48±0.05、1.6±0.08，较高糖组降低，但较正常对照组增加，差异均有统计学意义(t＝21.036、13.739，均P<0.001)。结论tBHQ通过激活抗氧化应激Nrf2/ARE信号通路，对高糖环境下Müller细胞损伤起保护作用。

简介：摘要目的不同环境对雄性快速老化小鼠P8(SAMP8)血促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇和睾酮水平的影响。方法将雄性SAMP8小鼠30只随机分为丰富环境组、贫瘠环境组和标准环境组，每组10只，均在对应环境中生活8周。8周后采用放射免疫方法测定血ACTH、皮质醇和睾酮水平。结果饲养8周后，贫瘠组、丰富组和标准组血ACTH浓度分别为(60.54±16.22)pg/ml、(48.98±15.30)pg/ml和(28.49±8.24)pg/ml；血皮质醇浓度分别为(5.37±0.81)ng/ml、(4.09±0.92)ng/ml、(3.19±0.88)ng/ml；血睾酮浓度分别为(2.35±0.90)ng/ml、(7.07±1.57)ng/ml、(3.16±1.10)ng/ml。标准环境组小鼠的血ACTH水平和血皮质醇水平与贫瘠环境组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，标准环境组的血ACTH水平和血睾酮水平与丰富环境组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，丰富环境组小鼠的血皮质醇水平和血睾酮水平与贫瘠环境组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。结论贫瘠环境可促进SAMP8小鼠血ACTH分泌，皮质醇增多，并激活下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴。丰富环境对SAMP8小鼠血ACTH的产生和血睾酮浓度的升高有促进作用，但对皮质醇的促进作用不明显。

简介：摘要目的探讨新生儿重症监护室（NICU）声光触环境因素对低体质量早产儿生理功能的影响，并提出NICU环境改进方案。方法选取2017年6—12月重庆市妇幼保健院收治的40例低体质量早产儿为研究对象，设定工作日8：00—9：00为日常时段，10：00—11：00为安静时段，分别对NICU内光照、声音、触摸等环境因素进行定量化检测，记录新生儿基础生命体征、活动度、应激激素等变化，分析环境因素对患儿的影响。结果日常时段与安静时段触摸次数分别为（5.02 ± 0.54）、（4.56 ± 0.55）次/h，差异无统计学意义（P>0.05）；相邻两日同一时段，早产儿在安静时段的活动度为每10分钟（8.26 ± 3.10）次，低于日常时段的每10分钟（17.52 ± 5.78）次，差异有统计学意义（t值为8.967, P<0.01）；早产儿安静时段睡眠时间（23.24 ± 8.38）min/h，显著高于日常时段（4.80 ± 5.39）min/h，差异有统计学意义（t值为-11.679，P<0.01）；早产儿在安静时段的皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素水平分别为（61.53 ± 13.47）、（15.91 ± 3.94）、（49.22 ± 15.15）μg/L，低于日常时段（74.52 ± 20.98）、（23.40 ± 11.66）、（80.32 ± 32.43）μg/L，差异有统计学意义（t值为3.295、3.848、5.502，P<0.01）；早产儿在安静时段的心率及收缩压为（130.44 ± 8.06）次/min、（64.05 ± 10.40）mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），显著低于日常时段（145.21 ± 10.52）次/min、（72.85 ± 13.36）mmHg，差异有统计学意义（t值为3.340、2.166，P<0.01或0.05）。同一日不同时间段，早产儿在安静时段的活动度为每10分钟（9.87 ± 3.31）次，低于日常时段的每10分钟（19.82 ± 5.57）次，差异有统计学意义（t值为9.761，P<0.01）；早产儿安静时段睡眠时间（25.75 ± 9.07）min/h，显著高于日常时段的（4.70 ± 3.89）min/h，差异有统计学意义（t值为-13.457，P<0.01）；早产儿在安静时段的皮质醇、肾上腺素、去甲肾上腺素水平分别为（59.42 ± 11.95）、（15.78 ± 1.45）、（50.90 ± 14.73）μg/L，低于日常时段的（71.50 ± 20.56）、（25.62 ± 11.95）、（79.87 ± 29.91）μg/L，差异有统计学意义（t值为3.212、5.169、3.585，P<0.01）；早产儿在安静时段的心率及收缩压为（136.02 ± 11.22）次/min、（65.35 ± 9.56）mmHg，显著低于日常时段的（144.10 ± 9.18）次/min、（73.47 ± 12.92）mmHg，差异有统计学意义（t值为3.533、2.008，P<0.01或0.05）。结论NICU患儿总体处于高噪声、强光照及多触摸环境，这些因素会在一定程度上引起不良的生理反应，改善NICU环境或能进一步促进患儿的恢复与生长发育。

简介：摘要目的探究在墨西哥儿童中绝对端粒长度(aTL)、肥胖及家庭环境之间是否存在明确关联。方法招募在2016年定期进行初级保健检查的134例8～10岁儿童(男孩占52%)，并对体育运动、喂养方式、体格测量、体脂百分比(BF%)和不良家庭环境进行评估。用定量PCR(qPCR)方法检测唾液样本中分离出的DNA绝对端粒长度(aTL)。结果在男孩中，健康体脂百分比者的aTL长于高体脂百分比者(P<0.01)。参与体育运动儿童的aTL长于久坐儿童(P<0.05)。令人惊讶的是，90%的儿童属于不良家庭，且高体脂百分比与不良家庭相关(r＝-0.57)。在男孩中，体脂百分比与aTL(r＝-0.1765)及体育运动时间(r＝-0.031)均呈负相关。相反，aTL与周体育运动时间呈正相关(r＝0.1938)。未在女孩中观察到这些相关性。结论端粒长度缩短与男孩的高体脂百分比相关，在女孩中不存在这种相关性。不良的家庭环境也是一个关键因素。学校的体育运动课程应该进行。

简介：摘要目的探讨外源性肿瘤坏死因子α(TNF－α)对三维环境下小鼠间充质干细胞向汗腺细胞分化的影响及其分子机制。方法(1)取5只6～8周龄雌性C57BL/6小鼠，用烫伤仪在每只小鼠背部制成1个1 cm2深Ⅱ～Ⅲ度烫伤创面。伤后1 d，取创面全层皮肤组织，采用酶联免疫吸附测定法检测组织中TNF－α浓度。(2)将0.9 g明胶和0.3 g海藻酸钠混匀后溶于30 mL磷酸盐缓冲液中制成水凝胶，取10只1 d龄雌雄不明C57BL/6小鼠足底全层皮肤研磨成真皮匀浆，从10只7 d龄雌雄不明C57BL/6小鼠股骨和胫骨中分离培养间充质干细胞。混合8 mL预热水凝胶、1 mL小鼠足部真皮匀浆、1 mL第2或3代终浓度为1.5×105个/mL间充质干细胞悬液，利用三维生物打印机在培养皿中打印出纵横交错的圆柱块共12块。打印块用25 g/L氯化钙溶液交联10 min，加入间充质干细胞培养基常规培养12 h后，按随机数字表法分为空白对照组和TNF－α处理组，每组6皿、6块。2组打印块均更换新鲜的汗腺诱导培养基培养，TNF－α处理组培养基中另加入终质量浓度为20 ng/mL的TNF－α。培养6 h，采用实时荧光定量反转录PCR法检测各组2皿打印块中间充质干细胞的多能性标志物Nanog mRNA的表达，采用蛋白质印迹法检测各组1皿打印块中间充质干细胞的Nanog蛋白表达，样本数均为3。培养14 d，采用实时荧光定量反转录PCR法检测各组2皿打印块中间充质干细胞的汗腺细胞标志物细胞角蛋白14(CK14)、CK18、钠钾ATP酶蛋白a1(ATP1a1)和水通道蛋白5(AQP5)mRNA表达，样本数为3；采用免疫荧光染色检测各组1皿打印块中间充质干细胞CK14、CK18、ATP1a1和AQP5蛋白表达分布。对数据行独立样本t检验。结果(1)伤后1 d，小鼠烫伤创面组织中TNF－α质量浓度为(19±3)ng/mL。(2)培养6 h，TNF－α处理组打印块中间充质干细胞Nanog mRNA和蛋白表达量分别为0.39±0.04、0.36±0.03，均明显低于空白对照组的1.00±0.05、1.00±0.07(t＝16.51、14.56，P<0.01)。(3)培养14 d，TNF－α处理组打印块中间充质干细胞CK18、CK14、ATP1a1、AQP5 mRNA表达量分别为0.38±0.03、0.42±0.11、0.23±0.06、0.25±0.03，明显少于空白对照组的1.00±0.03、1.00±0.05、1.00±0.05、1.00±0.07(t＝25.31、8.31、17.07、17.06，P<0.01)。(4)培养14 d，空白对照组打印块中间充质干细胞CK18、CK14、ATP1a1和AQP5蛋白均广泛分布于细胞质，而TNF－α处理组打印块中间充质干细胞CK18、CK14、ATP1a1和AQP5蛋白在细胞质的分布较空白对照组明显减少。结论外源性TNF－α抑制三维环境下小鼠间充质干细胞向汗腺细胞定向分化，这可能与TNF－α抑制Nanog mRNA和蛋白水平的表达从而使间充质干细胞多向分化潜能下调有关。

简介：摘要 :目的 :观察益气解毒活络中药组分配伍对高糖高脂环境下人肾小球系膜细胞 PPAR－ γmRNA及蛋白表达影响，探讨益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的可能机制。方法 :体外培养人肾小球系膜细胞株 (GMC)，分为正常对照组，高糖高脂模型组、中药组 (第 1组、第 2组、第 3组 )， qRT－ PCR法检测各组 24、 48hPPAR－ γmRNA的表达， WesternBlot法检测各组 24、 48hPPAR－ γ蛋白活性的表达。结果 :(1)各组 24、 48hPPAR－ γmRNA表达比较 :24h:与正常组比较模型组及中药配伍组均有显著差异 (P＜ 0.01)，与模型组比较各中药配伍组 PPAR－ γmRNA表达均明显上升，且有显著差异 (P＜ 0.01)，各中药配伍组组间比较发现第 1组 PPAR－ γmRNA表达最高 (P＜ 0.01)。 48h:与正常组比较除去第 1组未见明显差异 (P＞ 0.05)，模型组及其余各用药组均有显著差异 (P＜ 0.01);与模型组比较各中药配伍组 PPAR－ γmRNA表达均明显上升，且有显著差异 (P＜ 0.01);各中药配伍组组间比较发现第 1组 PPAR－ γmRNA表达最高 (P＜ 0.01)。正常组 24、 48h两时间点 PPAR－ γmRNA表达未见显著差异 (P＞ 0.05)，模型组及第 1、 2、 3组 48hPPAR－ γmRNA表达显著高于 24hPPAR－ γmRNA表达 (P＜ 0.01)。 (2)各组 24、 48hPPAR－ γ蛋白表达比较 :GMC细胞 24hPPAR－ γ蛋白表达比较 :模型对照组 PPAR－ γ蛋白低表达，各中药配伍组均能够调高 PPAR－ γ的表达，各中药配伍组组间比较发现第 1组调高 PPAR－ γ作用最显著。 GMC细胞 48hPPAR－ γ蛋白表达比较 :模型对照组 PPAR－ γ蛋白低表达，各中药配伍组均能够调高 PPAR－ γ的表达，各中药配伍组组间比较发现第 1组调高 PPAR－ γ作用最显著。结论 :益气解毒活络中药有效成分可能是通过上调 PPAR－ γ表达水平的作用来保护受损的 GMC，从而起到减缓糖尿病肾病病程进展，保护受损肾脏的作用。

简介：摘要目的了解湖州市人感染H7N9禽流感病例的流行病学特征及外环境样本检测情况。方法收集2013—2018年现住址为湖州市的人感染H7N9禽流感确诊病例的流行病学信息，同时采集暴露可疑环境样本进行病原学检测。运用Spearman相关分析法分析发病数与环境阳性检出率的关系。结果2013—2018年湖州市确诊的人感染H7N9禽流感病例39例，死亡9例，病死率为23.08%。男性多于女性，病例主要60岁以上的老年群体和农民。病例溯源样本阳性检出率为8.47%（30/345），农贸市场活禽交易场所的阳性检出率为25.00%（127/508），发病数与样本、场所检出阳性率的Spearman相关系数分别为0.379和0.392。结论中老年男性及农民是人感染H7N9禽流感的高发群体，活禽暴露是发病的高危因素。

简介：摘要 :目的 :观察益气解毒活络中药组分配伍对高糖高脂环境下人肾小球系膜细胞 PPAR－ γmRNA及蛋白表达影响，探讨益气解毒活络中药有效成分防治糖尿病肾病的可能机制。方法 :体外培养人肾小球系膜细胞株 (GMC)，分为正常对照组，高糖高脂模型组、中药组 (第 1组、第 2组、第 3组 )， qRT－ PCR法检测各组 24、 48hPPAR－ γmRNA的表达， WesternBlot法检测各组 24、 48hPPAR－ γ蛋白活性的表达。结果 :(1)各组 24、 48hPPAR－ γmRNA表达比较 :24h:与正常组比较模型组及中药配伍组均有显著差异 (P＜ 0.01)，与模型组比较各中药配伍组 PPAR－ γmRNA表达均明显上升，且有显著差异 (P＜ 0.01)，各中药配伍组组间比较发现第 1组 PPAR－ γmRNA表达最高 (P＜ 0.01)。 48h:与正常组比较除去第 1组未见明显差异 (P＞ 0.05)，模型组及其余各用药组均有显著差异 (P＜ 0.01);与模型组比较各中药配伍组 PPAR－ γmRNA表达均明显上升，且有显著差异 (P＜ 0.01);各中药配伍组组间比较发现第 1组 PPAR－ γmRNA表达最高 (P＜ 0.01)。正常组 24、 48h两时间点 PPAR－ γmRNA表达未见显著差异 (P＞ 0.05)，模型组及第 1、 2、 3组 48hPPAR－ γmRNA表达显著高于 24hPPAR－ γmRNA表达 (P＜ 0.01)。 (2)各组 24、 48hPPAR－ γ蛋白表达比较 :GMC细胞 24hPPAR－ γ蛋白表达比较 :模型对照组 PPAR－ γ蛋白低表达，各中药配伍组均能够调高 PPAR－ γ的表达，各中药配伍组组间比较发现第 1组调高 PPAR－ γ作用最显著。 GMC细胞 48hPPAR－ γ蛋白表达比较 :模型对照组 PPAR－ γ蛋白低表达，各中药配伍组均能够调高 PPAR－ γ的表达，各中药配伍组组间比较发现第 1组调高 PPAR－ γ作用最显著。结论 :益气解毒活络中药有效成分可能是通过上调 PPAR－ γ表达水平的作用来保护受损的 GMC，从而起到减缓糖尿病肾病病程进展，保护受损肾脏的作用。

简介：摘要目的探究125I-RSOAds-hTERT/PSA溶瘤腺病毒对前列腺癌靶向治疗作用以及对肿瘤微环境的影响。方法采用PCR扩增技术及双酶切连接技术构建125I-RSOAds-hTERT/PSA溶瘤腺病毒(125I-病毒复合物)。通过缺口末端标记法(TUNEL)染色，流式细胞实验以及Caspase-3的免疫印迹实验分别从体内和体外检测125I-病毒复合物对前列腺癌细胞的杀伤作用。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测人前列腺癌细胞株PC3和小鼠前列腺癌细胞株RM-1培养上清液及血清中的白介素2(IL-2)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)等的分泌水平，探究125I-病毒复合物对瘤组织细胞因子分泌水平的影响。通过免疫组织化学法以及免疫荧光实验探究125I-病毒复合物对前列腺癌组织及癌细胞中CD24、CD44以及前列腺干细胞抗原(PSCA)表达的调节，同时检测瘤组织中CD32和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平，以及CD4＋、CD8＋和巨噬细胞浸润情况。结果125I-病毒复合物体内、体外均可显著诱导癌细胞凋亡，同时显著高于125I组和病毒复合物组。同时IL-2(t＝-183.30、-38.20，P<0.05)、IL-10(t＝113.80、92.71，P<0.05)、TNF-α(t＝-73.20、-73.91，P<0.05)、IFN-γ(t＝-65.37、-139.70，P<0.05)在体内体外含量均升高。125I-病毒复合物可降低癌细胞及癌组织中CD24、CD44以及PSCA表达，减小癌组织重量(t＝8.55，P<0.05)，抑制癌组织血管生成，同时调节肿瘤组织中免疫反应。结论125I-病毒复合物溶瘤腺病毒对前列腺癌靶向可显著杀伤癌细胞，减少癌组织重量和血管生成，同时改善肿瘤微环境。

简介：无

简介：摘要目的观察低氧微环境对小鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)与聚3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯[P(3HB-co-4HB)]三维培养形成心肌补片的影响。方法提取mMSCs，将5代mMSCs与P(3HB-co-4HB)三维培养制作成细胞补片，随机分为常氧组和低氧组，用细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定细胞增殖；扫描电子显微镜(SEM)观察补片存活、黏附、生长。加入诱导剂5氮杂胞苷，免疫荧光检测两组心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达；通过实时定量聚合酶链反应(PCR)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA的表达，用蛋白质印迹法(Western blot)检测两组HIF-1α蛋白的表达。采用独立样本均数t检验进行统计学分析。结果CCK-8法测定低氧组吸光度(A)值(0.349±0.038)显著大于常氧组(0.308±0.025)(t＝2.420，P<0.05)，SEM观察到低氧组P(3HB-co-4HB)材料上细胞数量更多，细胞形态正常，黏附牢固。免疫荧光显示低氧组cTnT表达比常氧组更加显著；实时定量PCR观察到低氧组的HIF-1 mRNA表达水平上调(P<0.05)；Western blot检测HIF-1α蛋白相对表达水平低氧组(0.63±0.06)显著高于常氧组(0.47±0.05)(P<0.05)。结论低氧微环境可促进mMSCs在P(3HB-co-4HB)上的黏附、存活、增殖、分化，并且形成一种更有效的心肌补片，这一效应可能与HIF-1α通路的激活有关。