简介：摘要目的观察前列腺癌基因表达标志物1(PCGEM1)对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响并探讨其分子机制。方法选取2016年6月到2019年6月南阳中心医院收集的159例膀胱癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁组织和膀胱癌组织中PCGEM1表达水平。采用RNA干扰技术在膀胱癌细胞T24和BIU-87(购自上海中国科学院细胞库)建立PCGEM1敲降和对照细胞株，分别为PCGEM1 KD/T24组、T24对照组、PCGEM1 KD/BIU-87组和BIU-87对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析每组细胞增殖；采用流式细胞术分析每组细胞凋亡水平；采用蛋白质印迹法(Western blot)分析每组细胞Rho超家族成员A(RhoA)和B细胞淋巴瘤/白血病(bcl)-xL表达水平。采用t检验。结果与癌旁组织(1.34±0.21)比较，膀胱癌组织中PCGEM1表达水平(3.91±0.29)显著增加，差异有统计学意义(t＝3.109，P<0.05)。与T24对照组和BIU-87对照组(1.80±0.17、1.97±0.21)比较，PCGEM1 KD/T24组和PCGEM1 KD/BIU-87组细胞吸光度值(1.06±0.14、0.96±0.11)显著下降，差异有统计学意义(t＝2.701、2.481，P<0.05)。与T24对照组和BIU-87对照组细胞凋亡率[(5.39±1.14)%、(4.90±1.22)%]比较，PCGEM1 KD/T24组和PCGEM1 KD/BIU-87组细胞凋亡率[(31.49±6.12)%、(35.92±5.09)%]显著增加，差异有统计学意义(t＝3.081、3.815，P<0.05)。与T24对照组和BIU-87对照组细胞RhoA(1.14±0.15、1.21±0.21)和bcl-xL(0.98±0.11、0.93±0.18)表达水平比较，PCGEM1 KD/T24组和PCGEM1 KD/BIU-87组细胞RhoA(0.31±0.10、0.29±0.09)和bcl-xL (0.38±0.13、0.41±0.11)表达水平显著下降，差异有统计学意义(t＝2.517、2.419、2.754，P<0.05)。结论PCGEM1在膀胱癌中呈高表达，通过调节RhoA和bcl-xL蛋白表达，调节膀胱癌细胞增殖和凋亡。

简介：摘要目的探究狼疮抗凝物（LA）比值、D-二聚体（D-D）、可溶性内皮细胞蛋白C受体（sEPCR）对深静脉血栓形成（DVT）的早期预测价值。方法以浙江省荣军医院2018年10月至2019年10月收治的下肢骨折手术患者350例为研究对象，以下肢深静脉造影为金标准，确诊DVT患者82例为观察组，非DVT患者268例为对照组，比较两组LA比值、D-D及sEPCR水平的差异；采用Pearson相关分析血浆sEPCR水平与LA比值、D-D水平的相关性，采用受试者工作特征（ROC）曲线评估血浆sEPCR、LA比值、D-D水平对DVT的预测价值。结果观察组血浆sEPCR水平、LA比值、D-D水平均高于对照组[（143.30 ± 11.28）μg/L比（112.56 ± 14.62）μg/L、1.51 ± 0.24比1.22 ± 0.18、（1 013.00 ± 319.54）μg/L比（425.17 ± 100.36）μg/L]，差异有统计学意义（P<0.05）。两组活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）比较差异无统计学意义（P>0.05）。观察组患者血浆sEPCR水平与LA比值、D-D水平均呈正相关（r=0.280，P=0.011；r=0.563，P<0.001），LA比值与D-D水平也呈正相关（r=0.741，P<0.001）。D-D诊断DVT的曲线下面积（AUC）为0.940，截断值569.43 μg/L时诊断DVT的灵敏度、特异度为87.80%、87.69%；LA比值诊断DVT AUC最小，为0.912，截断值1.23时灵敏度、特异度为87.80%、91.25%；sEPCR + LA比值+ DD诊断DVT灵敏度为95.12%，特异度为95.00%。结论LA比值、D-D联合sEPCR对DVT有较高的预测价值。

简介：摘要目的探讨华蟾素注射液联合化疗治疗老年结直肠癌患者近期疗效及其对患者血清肿瘤标志物和免疫功能的影响。方法选择浙江省中医院新昌分院2015年1月至2017年12月收治的老年结直肠癌患者62例，依据随机数字表法分为观察组31例与对照组31例。对照组患者采用化疗治疗，观察组在对照组基础上结合华蟾素注射液。两组均以21 d为1个周期，连续化疗2 ~ 4个周期。比较两组治疗近期疗效，治疗前后Karnofsky功能状态评分（KPS评分）、血清　肿瘤标志物和免疫功能变化，及毒副反应发生情况。结果观察组近期治疗总有效率为77.42%（24/31），高于对照组的48.39%（15/31），差异有统计学意义（χ2=5.599，P<0.05）。观察组治疗后KPS评分为（87.48 ± 6.57）分，高于对照组的（80.20 ± 6.12）分，差异有统计学意义（t=4.514，P<0.05）。观察组治疗后血清癌抗原19-9（CA19-9）、糖类抗原724（CA724）和癌胚抗原（CEA）水平均低于对照组[（3.59 ± 1.02）kU/L比（6.98 ± 1.37）kU/L、（7.38 ± 1.87）μg/L比（9.82 ± 1.42）μg/L、（12.27 ± 2.36）μg/L比（16.57 ± 3.24）μg/L]，差异均有统计学意义（t=11.051、9.042、10.624，P<0.05）。观察组治疗后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+高于对照组[（58.97 ± 3.72）%比（47.31 ± 2.98）%、（38.85 ± 3.25）%比（30.19 ± 2.71）%、1.59 ± 0.18比0.89 ± 0.14]，差异均有统计学意义（t=13.620、11.394、17.091，P<0.05）。观察组各项毒副反应发生率均低于对照组（P<0.05）。结论华蟾素注射液联合化疗治疗老年结直肠癌患者近期疗效明显，可提高患者生存质量，且可降低血清CA19-9、CA724和CEA水平，提高患者免疫功能，毒副反应少。

简介：摘要目的探讨桃红四物汤加减联合氨甲环酸治疗黄褐斑的疗效及对患者性激素水平和氧化应激指标的影响。方法选择义乌市中医医院2017年1月至2019年12月收治的黄褐斑患者96例为观察对象，采用随机数字表法分为观察组(48例)与对照组(48例)。对照组给予氨甲环酸治疗，观察组在对照组基础上联合桃红四物汤加减治疗。两组疗程均为12周。比较两组临床疗效，治疗前后黄褐斑面积和严重指数(MASI)评分、性激素及氧化应激水平变化，不良反应发生情况。结果观察组治疗总有效率[91.67%(44/48)]高于对照组[68.75%(33/48)](χ2＝7.940，P<0.05)；观察组治疗后MASI评分[(8.64±1.27)分]低于对照组[(17.93±2.53)分](t＝22.736，P<0.05)；观察组治疗后血清雌二醇[(19.83±4.21)ng/L]、黄体生成素(LH)[(3.79±0.68)mU/L]和卵泡刺激素(FSH)[(5.23±1.76)mU/L]均低于对照组[(43.79±4.69)ng/L、(5.81±1.07)mU/L、(10.64±2.60)mU/L](t＝26.339、11.039、11.938，均P<0.05)；观察组治疗后血清丙二醛[(3.67±0.40)μmol/L]低于对照组[(4.52±0.32)μmol/L]，而超氧化物歧化酶[(78.84±5.67)IU/L]高于对照组[(60.65±5.29)IU/L](t＝11.496、16.252，均P<0.05)。结论桃红四物汤加减联合氨甲环酸治疗黄褐斑疗效良好，可改善患者性激素和氧化应激水平，且无明显不良反应。

简介：摘要目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患者血清脂联素与炎性标志物、营养状态及重度急性加重次数的关系。方法选取2017年7月至2019年4月上海市宝山区吴淞中心医院AECOPD男性患者163例，根据血清脂联素水平将患者分为低脂联素组（血清脂联素≤ 102.38 μg/L，97例）和高脂联素组（血清脂联素>102.38 μg/L，66例），比较两组白细胞介素（IL）-6、IL-8、红细胞沉降率（ESR）、C反应蛋白（CRP）、血红蛋白、白蛋白、前白蛋白、体质量指数（BMI）及随访1年重度急性加重次数，分析脂联素与炎性标志物、营养状态及1年内重度急性加重次数的关系。结果低脂联素组BMI、血红蛋白、前白蛋白和白蛋白明显高于高脂联素组[（23.20 ± 3.26）kg/m2比（20.77 ± 3.78）kg/m2、（133.23 ± 17.13）g/L比（125.68 ± 20.83）g/L、（185.36 ± 57.60）g/L比（148.83 ± 64.79）g/L、（37.09 ± 4.06）g/L比（33.77 ± 5.86）g/L]，差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）；两组总蛋白、IL-6、IL-8、CRP和ESR比较差异无统计学意义（P>0.05）。脂联素与BMI、血红蛋白、白蛋白和前白蛋白呈负相关（r = -0.42、-0.28、-0.33和-0.31，P<0.01），与IL-6、IL-8、ESR、CRP无相关性（P>0.05）。低脂联素组随访1年重度急性加重≥ 4次率明显低于高脂联素组[8.25%（8/97）比22.73%（15/66）]，差异有统计学意义（χ2 = 6.79，P<0.05）。结论低脂联素AECOPD患者营养状态好，重度急性加重次数少。血清脂联素可作为AECOPD患者重度急性加重的预测指标。

简介：摘要目的应用规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9系统(CRISPR/Cas9)体外实验研究修正威尔森氏症(WD)基因。方法选用来源于DL近交系小鼠的Toxic milk小鼠(购自美国Jackson Laboratory公司)作WD模型，设计3个CRISPR来源的RNA (crRNA)-crRNA001/002/003，应用CRISPR/Cas9核糖核蛋白复合物(RNP)方法转染WD肝细胞，48 h后提取基因组DNA，聚合酶链反应(PCR)后测序检测基因编辑效率，筛选出效率最高者crRNA001，并设计相应的单链寡核苷酸(ssODN)修复模板；用crRNA001和ssODN共转染肝细胞，模板特异性引物行PCR，验证ssODN掺入。组间比较采用Student’S t检验。结果Sanger测序结果显示，crRNA001的编辑效率为(57.8±5.1)%。用ssODN共转染细胞后，模板特异性引物行PCR，能扩增出修正后的铜离子转运ATP酶β肽(ATP7B)基因条带；二代测序结果显示，ATP7B基因修复效率为(7.45±2.54)%。结论CRISPR/Cas9 RNP转染能达到较高编辑效率，相应的ssODN可以高效修复缺陷ATP7B基因，为进一步的体内实验提供理论和实验基础。

简介：【摘要】目的：分析桃红四物汤加减治疗踝关节骨折术后软组织肿胀的疗效。方法：回顾分析我院2019年5月至2020年5月期间收治的60例踝关节骨折术后患者，按治疗方式分组，其中30例接受桃红四物汤加减治疗（观察组），另30例接受伤科接骨片治疗（对照组），比较患者踝关节肿胀状况和肌红蛋白、C反应蛋白指标。结果：比较踝关节肿胀程度，治疗前组间数据无统计学差异（P>0.05），治疗后，观察组踝关节肿胀程度低于对照组（P0.05），治疗后，观察组Mb高于对照组，CRP低于对照组（P

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA) HOX转录物反义RNA(HOTAIR)通过磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响。方法采用体外培养人食管鳞癌细胞株(购自中国细胞资源种子库)，分别用磷酸盐缓冲液(PBS)和CRISPR/Cas9 KO HOTAIR病毒或CRISPR/Cas9 KO HOTAIR病毒＋PI3K/Akt激活剂胰岛素样生长因子(IGF)-1处理，得到对照组(NC组)，CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组和CRISPR/Cas9 KO HOTAIR＋IGF-1组。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA HOTAIR和Akt mRNA水平；蛋白质印迹法(Western blot)法测定磷酸化Akt(p-Akt)、t-Akt和Tubulin蛋白的表达量；噻唑蓝(MTT)检测各组细胞增殖情况，最后通过Tanswell测各组细胞迁移。采用双尾t检验。结果通过RT-PCR检测IncRNA HOTAIR在正常食管组织组(1.001±0.115)和食管鳞癌组织组(4.167±0.491)，两者差异有统计学意义(t＝8.654，P<0.01)；与NC组(1.001±0.144)比较，CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(0.051±0.014)的lncRNA HOTAIR表达水平显著降低(t＝6.554，P<0.01)，差异有统计学意义；与NC组(1.033±0.060)比较，CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(0.220±0.058)的p-Akt或p-Akt/t-Akt值显著降低(t＝10.054，P<0.01)，差异有统计学意义，而CRISPR/Cas9 KO HOTAIR＋IGF-1组(0.400±0.029)与CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(0.220±0.058)比较，p-Akt或p-Akt/t-Akt值显著升高(t＝1.412，P<0.05)，差异有统计学意义；通过敲除HOTAIR基因对的Akt mRNA检测：NC组(1.033±0.044)与CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(0.936±0.064)比较，两者差异无统计学意义(t＝0.936，P>0.05)；CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(0.936±0.064)与CRISPR/Cas9 KO HOTAIR ＋IGF-1组(1.036±0.102)比较，两者差异无统计学意义；通过MTT检测细胞的增殖，在72 h比较细胞增殖，NC组(6.700±0.289)与CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(2.517±0.306)比较，两者差异有统计学意义(t＝0.458，P<0.01)；CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(2.517±0.306)与CRISPR/Cas9 KO HOTAIR＋IGF-1组(4.200±0.265)比较，两者差异有统计学意义(t＝0.966，P<0.05)。通过Transwell检测细胞的迁移，NC组(1.000±0.029)与CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(0.330±0.049)比较，两者差异有统计学意义(t＝14.798，P<0.01)；CRISPR/Cas9 KO HOTAIR组(0.330±0.049)与CRISPR/Cas9 KO HOTAIR＋IGF-1(0.608±0.068)组比较，两者差异有统计学意义(t＝0.876，P<0.05)。结论敲除HOTAIR基因(KO HOTAIR)通过降低p-Akt水平，降低p-Akt/t-Akt值而抑制PI3K/Akt信号通路，降低细胞增殖，抑制细胞迁移。而PI3K/Akt的激活剂IGF-1可以阻止HOTAIR基因敲除产生的影响。

简介：摘要目的探讨Bcl-2腺病E1B 19kD蛋白相互作用蛋白3类似物(也称NIX)介导PC12细胞线粒体自噬的可能机制。方法PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)放置于含体积分数1%O2的缺氧培养箱中培养，建立细胞缺氧损伤模型。分为常氧组和不同时相点缺氧损伤组(缺氧6，12, 24, 48 h组)。Western blot检测缺氧不同时相点NIX、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)和细胞色素C氧化酶4(COX4)的表达水平。电镜观察PC12细胞缺氧24 h后细胞中自噬体的形成。激光共聚焦显微镜观察NIX过表达48 h后细胞中线粒体-NIX-LC3-自噬体膜复合体的形成。免疫共沉淀(CoIP)检测NIX与LC3之间的相互作用。激光共聚焦显微镜观察抑制NIX对线粒体形态的影响。PC12细胞分为常氧组、常氧＋NIX抑制组、缺氧组、缺氧＋NIX抑制组Western blot检测抑制NIX后各组NIX、LC3、TOMM20、COX4蛋白的表达变化。结果PC12细胞缺氧24 h后NIX和LC3的表达量与常氧组相比明显升高[(0.44±0.03)∶(0.21±0.01)、(1.04±0.03)∶(0.32±0.01)](P均<0.05)；TOMM20和COX4的表达量在缺氧24 h后较常氧组明显降低[(0.78±0.07)∶(1.46±0.08)、(0.52±0.04)∶(0.98±0.06)](P均<0.05)。电镜观察发现，缺氧24 h后细胞中有包含线粒体的自噬体形成。激光共聚焦检测发现，NIX过表达48 h后细胞中线粒体-NIX-LC3-自噬体膜复合体的形成。CoIP检测发现，NIX与LC3之间存在相互作用。激光共聚焦显微镜观察发现，与缺氧组相比，抑制NIX能保存缺氧条件下线粒体的完整性。Western blot检测发现，与缺氧组相比，缺氧＋NIX抑制组中NIX和LC3-II的表达[(0.80±0.02)∶(1.18±0.06)、(0.68±0.05)∶( 0.97±0.13)](P均<0.05)，使TOMM20和COX4的表达量升高[(0.78±0.06)∶( 0.69±0.08)、(0.81±0.07)∶( 0.81±0.07)](P均<0.05)。结论在PC12细胞中NIX与LC3相互作用介导线粒体自噬的发生，抑制NIX能保存缺氧条件下线粒体的完整性、降低自噬水平，为线粒体提供保护作用。

简介：摘要目的探索表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）rs2237051及过氧化物酶增殖物激活受体-α（peroxidase proliferators activate receptor-α，PPAR-α）rs4253623基因多态性与广泛型侵袭性牙周炎（generalized aggressive periodontitis，GAgP）易感性的相关性及其交互作用，为筛选GAgP的高危人群提供遗传学依据。方法纳入219例于2001年1月至2015年12月在北京大学口腔医学院·口腔医院就诊的GAgP患者（GAgP组）和138名年龄、性别匹配的全身及牙周健康的北京大学口腔医学院·口腔医院职工和学生作为健康对照者（对照组），采用基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术进行EGF rs2237051及PPAR-α rs4253623基因型检测，使用多重逻辑回归模型分析不同基因型与GAgP易感性的关系，采用似然比检验对两个基因多态性位点在GAgP易感性方面是否存在交互作用进行分析，交互作用模型采用相乘模型。结果GAgP组年龄为（27.3±4.5）岁，男性87例，女性132例；对照组年龄为（27.1±4.2）岁，男性53人，女性85人，两组人群年龄、性别构成比差异均无统计学意义（P>0.05）。EGF rs2237051位点中，AA基因型频率在GAgP组[49.5%（107/216）]显著高于对照组[37.7%（52/138）]，AG/GG基因型频率在GAgP组[50.5%（109/216）]显著低于对照组[62.3%（86/138）]（P<0.05）。调整年龄、性别后，与AA基因型相比，AG/GG基因型个体患GAgP风险显著降低39%（OR：0.61，95%CI：0.40~0.95，P<0.05）。PPAR-α rs4253623位点中，AA基因型频率在GAgP组[76.2%（160/210）]显著高于对照组[65.9%（81/123）]，AG/GG基因型频率在GAgP组[23.8%（50/210）]显著低于对照组[34.1%（42/123）]（P<0.05）。调整年龄、性别后，与AA基因型相比，AG/GG基因型个体患GAgP风险显著降低40%（OR：0.60，95%CI：0.36~0.98，P<0.05）。EGF rs2237051及PPAR-α rs4253623在GAgP易感性方面存在显著交互作用，两个位点均为AG/GG基因型个体与均为AA基因型的个体相比，患GAgP风险降低66%（OR：0.34，95%CI：0.17~0.66，P<0.01）。结论EGF rs2237051及PPAR-α rs4253623位点与GAgP易感性相关，两者在GAgP易感性方面存在显著交互作用，两个位点中等位基因G在GAgP患病方面具有保护作用。

简介：摘要目的分析胰高血糖素样肽-1（GLP-1）类似物联合精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液对初诊2型糖尿病患者血糖控制及体质量指数（BMI）的影响。方法选取2017年12月至2019年2月间在本院初诊2型糖尿病患者86例，依据治疗方法不同分为观察组（n=43）与参照组（n=43），参照组予以精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液，观察组在参照组基础上予以GLP-1类似物。对比两组治疗前后血糖指标[空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、餐后2 h血糖（2hPBG）]、血脂指标[总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）]、BMI变化。结果治疗后，观察组FBG、HbA1c、2hPBG水平均较参照组低（均P<0.05）；治疗后，观察组TC、TG水平均较参照组低[（4.32±1.03）mmol/L、（1.74±0.31）mmol/L比（5.29±1.05）mmol/L、（2.05±0.42）mmol/L，均P<0.05]；治疗后，观察组BMI值较参照组低[（21.39±1.04）kg/m2比（25.03±1.01）kg/m2，P<0.05]；观察组药物不良反应发生率低于参照组（4.7%比20.9%，P<0.05）。结论在精蛋白锌重组赖脯胰岛素混合注射液治疗初诊2型糖尿病患者基础上加用GLP-1类似物可显著降低BMI、血糖、血脂水平，值得临床推广应用。

简介：摘要目的通过生物信息学方法筛选出参与肝细胞癌（HCC）进展的核心基因（Hub gene），探讨细胞周期蛋白B2（CCNB2）在HCC发生发展及预后中的潜在作用。方法从GEO数据库中筛选并下载四个HCC相关数据集，用GEO2R分析数据并鉴定差异表达基因（DEGs）。利用DAVID数据库对DEGs进行GO分析，Cytoscape的ClueGO插件完成KEGG信号通路富集分析，并将DEGs导入STRING数据库建立蛋白相互作用（PPI）网络图，用Cytoscape对PPI网络进行可视化，构建关键模块（cluster）和筛选核心基因。分别使用UCSC数据库和UALCAN数据库完成核心基因在TCGA肝癌中的差异表达分析和生存分析。使用Firebrowse，Oncomine和UALCAN数据库分析核心基因在包括HCC在内的多个肿瘤中的表达。用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测候选基因在HCC组织和肝癌细胞系中的表达水平。结果从四个数据集中共鉴定了73个DEGs，包括15个上调基因和58个下调基因。KEGG信号通路富集分析显示DEGs主要富集于肿瘤相关通路。基于DEGs的PPI网络图,筛选了一个关键模块和10个核心基因。CCNB2与NCAPG在多个数据库的肝癌组织中均高表达。CCNB2与NCAPG呈正相关，被认为是与预后相关的关键基因（P < 0.01）。RT-qPCR结果表明CCNB2在人肝癌组织和细胞系中高表达（P < 0.01）。结论成功筛选出HCC相关的DEGs和核心基因，其中CCNB2在HCC中高表达且与患者生存预后相关，有望成为HCC诊疗和预后的生物标志物。

简介：摘要目的探讨维生素K环氧化物还原酶复合体1(VKORC1)基因多态性对布加氏综合征(BCS)介入术后华法林出血风险的影响。方法选取2015年6月至2018年5月在郑州大学第一附属医院BCS患者(95例)及健康体检者(120例)为病例组和健康组，以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法分析VKORC1基因型；随访统计术后华法林出血事件，应用Logistic回归分析法分析VKORC1基因型及其他华法林抗凝治疗出血的危险因素。采用t检验及χ2检验。结果病例组VKORC1基因分型中GG型1例，GA型12例，AA型82例。平均随访(20.55±9.60)个月，共发生44次出血事件(42.32%)，发生在38例患者中，共25例为华法林出血者，发生出血事件时平均国际标准化比值(INR)为2.50±0.51，中位数为2.31(1.90～4.61)。非携带G等位基因(AA)组患者中华法林导致出血的发生率高于携带G等位基因(GG/GA)组(P<0.05)。经Logistic回归分析，年龄>65岁、肾功能不全、VKORC1基因型AA型为华法林导致出血的危险因素{比值比(OR)[95%可信区间(CI)]＝1.697(1.021～2.373)、1.863(1.103～2.622)、3.171(1.349～4.993)，P<0.05}。结论BCS介入术后患者华法林抗凝治疗患者中，VKORC1基因AA型出血风险较高，该基因多态性可能是华法林抗凝出血并发症的遗传因素。

简介：摘要目的探讨超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase1，SOD1)的两种突变类型G41S和G41D对小鼠认知行为的影响。方法构建过表达人源性SOD1WT、SOD1G41S、SOD1G41D的重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus，rAAV)及不携带目的基因的空白病毒，立体定位注射到小鼠的双侧内侧前额叶皮层( medial prefrontal cortex，mPFC)，根据注射病毒的不同，分为CONTROL组、SOD1WT组、SOD1G41S组及SOD1G41D组(均n＝16)。1个月后，对小鼠进行旷场实验、Y迷宫自发交替实验、三箱社交实验、追踪条件恐惧实验，观察突变基因对小鼠认知行为的影响。结果在旷场实验中，SOD1WT组[(39.67±6.04)m]的运动路程明显多于SOD1G41D组[(28.47±6.92)m，P＝0.034]；在Y迷宫自发交替实验中，SOD1WT组[(40.56±10.12)次，(32.63±8.19)次]及SOD1G41S组[(36.75±9.43)次，(29.06±8.32)次]的总进臂数和实际交替进臂数明显高于SOD1G41D组[(24.50±11.30)次，(18.38±9.09)次，均P<0.05]；在三箱社交实验中，SOD1G41D组在含有老鼠的区域停留时间[(279.08±134.94)s]和对侧空金属笼子区域[(218.54±125.63)s]差异无统计学意义(t＝1.313，P＝0.199)，SOD1WT组及SOD1G41S组在陌生鼠1[(253.07±55.60)s，(253.20±57.61)s]及陌生鼠2[(243.44±55.33)s，(239.76±67.49)s]所在区域停留时间差异无统计学意义(P>0.05)，SOD1WT组、SOD1G41S组表现为社交趋新障碍；在追踪条件恐惧实验的测试阶段，SOD1G41S组的僵直时间百分比明显高于其他实验组和CONTROL组(P<0.05)。结论SOD1G41S和SOD1G41D对小鼠的认知行为产生了明显的改变，相同位点上的两种突变类型产生的认知行为改变存在明显差异。

简介：摘要目的研究子痫前期胎盘中第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homologue-deleted chromosome ten gene，PTEN)、Syncytin-1与母体内皮损伤、滋养细胞损伤的相关性。方法选择2015年2月至2017年12月在南方医科大学附属小榄医院诊断为子痫前期并分娩的46例患者及同期正常分娩的的80名孕妇，分娩前留取母体外周血并测定内皮损伤标志物的含量，分娩后留取胎盘并测定PTEN、Syncytin-1、细胞凋亡基因的表达量以及氧化应激标志物的含量。结果子痫前期胎盘组织中PTEN的mRNA表达量显著高于正常胎盘组织(t＝32.797、P<0.000)，Syncytin-1的mRNA表达量显著低于正常胎盘组织(t＝28.506、P<0.000)；子痫前期患者母体血液循环中内皮素-1(endothelin-1，ET-1)、可溶性血管内皮生长因子受体-1(soluble fms-like tyrosine kinase receptor 1，sFlt-1)的含量显著高于正常妊娠孕妇(t值分别为39.884、40.243、P均<0.001)，且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.674、0.596，P分别为0.004、0.007)，与Syncytin-1的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为－0.615、－0.637，P分别为0.009、0.008)，一氧化氮(nitric oxide ，NO)、前列腺素I 2(prostaglandin I2，PGI2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor ，VEGF)、胎盘生长因子(Placental growth factor ，PLGF)的含量显著低于正常妊娠孕妇(t值分别为30.944、27.404、32.827、26.644、P均<0.001)，且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为－0.648、－0.592、－0.537、－0.613，P分别为0.006、0.009、0.013、0.007)，与Syncytin-1的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.632、0.572、0.537、0.654，P值分别为0.010、0.013、0.015、0.009)；子痫前期胎盘组织中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-reduced oxidase 4，NOX4)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、8-羟基脱氧鸟苷酸(8-hydroxydeoxyguanosine，8-OHdG)的含量以及自杀相关因子(factors associated suicide ，Fas)、Fas配体(fas ligand，FasL)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein，Bax)、葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 ，GRP78)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein ，CHOP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteine-containing aspartic acid proteolytic enzymes-3，Caspase-3)的mRNA表达量显著高于正常胎盘组织(t值分别为27.714、27.704、26.786、22.622、27.964、25.496、25.893、30.837、28.975、P均<0.001)，且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.703、0.651、0.593、0.628、0.449、0.552、0.612、0.569、0.502，P值分别为0.003、0.007、0.004、0.006、0.016、0.010、0.006、0.012、0.018)，gn Syncytin-1的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为－0.615、－0.714、－0.577、－0.548、－0.512、－0.585、－0.619、－0.495、－0.662，P值分别为0.009、0.001、0.013、0.015、0.018、0.011、0.009、0.023、0.003)，Peroxiredoxin-Ⅱ蛋白(PrxⅡ)、PrxⅢ、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase ，SOD)的含量以及B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)的mRNA表达量显著低于正常胎盘组织(t值分别为26.115、23.502、21.439、17.194、P均<0.001)，且与胎盘组织中PTEN的mRNA表达量呈负相关(相关系数分别为－0.713、－0.657、－0.591、－0.642，P值分别为<0.001、0.006、0.009、0.007)，与Syncytin-1的mRNA表达量呈正相关(相关系数分别为0.562、0.711、0.682、0.608，P值分别为0.013、<0.001、0.002、0.008)。结论子痫前期胎盘中PTEN的高表达以及Syncytin-1的低表达能够加重母体内皮损伤以及胎盘滋养细胞损伤。

简介：摘要目的探讨微小RNA(miRNA，miR)-454对食管癌细胞顺铂敏感性的影响及机制。方法将转染anti-miR-454、anti-miR-NC的ECA109细胞(中国科学院上海细胞库)设为anti-miR-454组、anti-miR-NC组。噻唑蓝(MTT)法检测顺铂对ECA109细胞增殖抑制率，并计算半数抑制浓度(IC50)；蛋白质印迹法(Western blot)实验检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶(p70S6K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平。多样本计量资料比较采用单因素方差分析，两两样本比较采用SNK-q检验。结果anti-miR-454组IC50值低于anti-miR-NC组[(0.41±0.05) μg/ml比(0.82±0.08) μg/ml，P<0.01]；MTT实验显示，细胞中miR-454下调后，不同顺铂浓度对ECA109细胞增殖抑制率显著升高；Western blot实验显示，细胞中miR-454下调后，PI3K、mTOR、p70S6K蛋白相对表达量，p-Akt/Akt显著降低。结论下调miR-454表达可增强食管癌ECA109细胞顺铂敏感性，推测与其靶向上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达、抑制Akt信号通路有关。

简介：摘要目的分析探讨结直肠癌中4种错配修复(MMR)蛋白的表达及其临床意义，RAS、鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因状态及其与4种蛋白表达的相关性。方法采用免疫组织化学法检测634例结直肠癌组织中4种MMR蛋白的表达；对存在MMR蛋白表达缺失者进行微卫星不稳定(MSI)检测。对其中236例(含缺失组的53例)进行RAS和BRAF基因检测。计数资料组间比较采用χ2检验。结果634例中53例(8.4%)发生MMR蛋白表达缺失，Mut L同源基因1(MLH1)、PMS2、人类MutS同源蛋白2(MSH2)和人类MutS同源蛋白6(MSH6)蛋白表达缺失率分别4.4%(28/634)、4.7%(30/634)、3.3%(21/634)、3.6%(23/634)。缺失组的53例进行MSI分子检测，其中49例(92.4%)出现2～5个位点微卫星不稳定，为MSI-H。236例(含缺失组的53例)结直肠癌RAS和BRAF基因检测结果显示，BRAF基因V600E突变11例，均为微卫星稳定(pMMR)；v-Ki-ras2大鼠Kirsten肉瘤病毒基因同源基因(KRAS)基因突变109例，其中7例为错配修复基因缺陷(dMMR)；NRAS基因2号外显子检测到突变8例，均为pMMR。结论MMR蛋白表达缺失组多发生于右半结肠，组织学分化差且常伴有粘液成分，肿瘤组织间可见显著的淋巴细胞浸润，患病年龄偏低。KRAS基因状态影响MMR蛋白表达。

简介：摘要目的探讨亚低温治疗对轻度缺氧缺血性脑病（HIE）患儿的磁共振（MR）生物标志物和神经发育结局的影响。研究设计非随机队列研究。背景在英国和美国建立了8个三级新生儿病房。研究对象在出生后6小时内进行NICHD神经检查的47例轻度HIE患儿。干预措施全身降温72小时（n=32）或常规护理（n=15，其中5例降温<12小时）。主要结局指标出生后2周内进行磁共振成像（MRI）和MR波谱分析（MRS），并在2岁时进行神经发育结局评估。结果两组的基线特征相似，但亚低温治疗的患儿10分钟Apgar评分较低（P=0.02）。然而，亚低温治疗组MRS的丘脑NAA/Cr[1.4（0.1）比1.6（0.2）；P<0.001]和NAA/Cho[0.67（0.08）比0.89（0.11）；P<0.001]比值明显更高。亚低温治疗组患儿的白质损伤评分低于未降温的患儿（P=0.02）。4名（27%）轻度HIE非亚低温治疗患儿在6小时后出现癫痫发作，而亚低温治疗患儿均无癫痫发作（P=0.008）。2岁时，40例（85%）患儿可获得神经发育结果。2例（14.3%）未行亚低温治疗的患儿出现了不良结局，而亚低温治疗的患儿均未出现不良结局（P=0.09）。结论亚低温疗法对患有轻度HIE的患儿可能具有神经保护作用，MRI显示MR生物标志物的改善和白质损伤的减少都证明了这一点。这可能需要在足够有力的随机对照试验中进一步予以评估。

简介：摘要目的探讨小鼠乳腺癌细胞(4T1)和小鼠腹腔巨噬细胞(PMs)共培养构成的肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)中，过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)促进4T1细胞侵袭的作用机制。方法(1)提取PMs并用小发卡RNA(shRNA)敲低PGC-1α蛋白表达：采用原代细胞提取的方法提取PMs，并用低表达PGC-1α的shRNA(sh-PGC-1α-1、sh-PGC-1α-2、sh-PGC-1α-3)转染细胞，然后用Western blot检测PMs[对照组(PMs组)、阴性对照组(sh-control)、sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组、sh-PGC-1α-3组]中PGC-1α蛋白表达水平，选取抑制效果最好的shRNA用于实验。所得低表达PGC-1α的sh-PGC-1α PMs为本实验所需。(2)验证TAMs中PGC-1α蛋白表达水平：利用Transwell建立PMs/sh-PGC-1α PMs和4T1细胞的共培养体系，得到TAMs/sh-PGC-1α TAMs。收集细胞并提取蛋白，用Western blot检测对照组(PMs组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组PGC-1α蛋白表达水平。(3)验证共培养体系中4T1细胞的侵袭、迁移、愈合能力：利用Transwell小室模型观察对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组4T1细胞的侵袭、迁移数；利用创伤愈合实验观察对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组4T1细胞的愈合情况。(4)验证共培养体系中PMs的PGC-1α对4T1细胞发生细胞上皮-间质转化(EMT)的影响：利用Transwell建立PMs /sh-PGC-1α PMs和4T1细胞的共培养体系，采用Western blot检测对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组EMT相关蛋白E-cadherin(上皮标志物)及vimentin(间质标志物)的表达情况。多组实验数据比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD法。结果(1)对照组(PMs组)、阴性对照组、sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组和sh-PGC-1α-3组PGC-1α表达水平分别为1.00±0.00、0.96±0.06、0.43±0.04、0.35±0.07和0.38±0.08，5组比较，差异有统计学意义(F＝32.648，P<0.050)，其中，对照组(PMs组)分别与阴性对照组、sh-PGC-1α-3组比较，PGC-1α表达水平的差异均无统计学意义(P＝0.991、0.065)，但是，sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组PGC-1α表达水平均低于对照组(PMs组)(P＝0.014、0.045)，并且，sh-PGC-1α-1组、sh-PGC-1α-2组和sh-PGC-1α-3组的PGC-1α表达水平均低于阴性对照组(P＝0.015、0.018、0.035)。因此，选择对PGC-1α抑制效果最好的sh-PGC-1α-2进行后续实验。(2)对照组(PMs组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组PGC-1α表达水平分别为1.00±0.00、1.92±0.20和0.90±0.23，3组比较，差异有统计学意义(F＝10.294，P＝0.011)，其中TAMs组PGC-1α蛋白表达水平明显高于对照组(PMs组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)。(3)Transwell侵袭实验显示，对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组比较，共培养24 h后穿膜的细胞数分别为(41.67±6.01)、(75.33±5.46)和(24.33±1.45)个，3组比较，差异有统计学意义(F＝29.668，P<0.050)，其中TAMs组4T1细胞的侵袭能力显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)。Transwell迁移实验显示，对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组共培养24 h后穿膜的细胞数分别为(55.67±12.13)、(97.67±8.45)和(30.67±6.49)个，3组比较，差异有统计学意义(F＝13.193，P<0.05)，其中TAMs组4T1细胞的迁移能力显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)。创伤愈合实验显示，对照组(4T1组)、TAMs组、sh-PGC-1α TAMs组4T1细胞24 h的愈合率分别为(100.00±0.00)%、(135.98±5.18)%和(68.82±7.28)%，3组比较，差异有统计学意义(F＝42.435，P<0.050)，其中TAMs组4T1细胞的愈合能力显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P<0.050)。(4)Western blot检测发现：对照组(4T1组)、TAMs组和sh-PGC-1α TAMs组E-cadherin表达水平分别为1.00±0.00、0.44±0.11和2.51±1.67, vimentin表达水平分别为1.00±0.00、2.20±0.15和0.36±0.10，3组比较，E-cadherin和vimentin表达水平的差异均有统计学意义(F＝87.295、79.058，P均<0.050)；组间两两比较显示，TAMs组E-cadherin表达水平显著低于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)，vimentin表达水平显著高于对照组(4T1组)和sh-PGC-1α TAMs组(P均<0.050)，而sh-PGC-1α TAMs组E-cadherin表达水平显著高于对照组(4T1组)(P<0.050)，vimentin表达水平显著低于对照组(4T1组)(P<0.050)。结论TAMs可促进4T1细胞的侵袭、迁移、愈合以及EMT过程，且该作用与TAMs的PGC-1α相关。

简介：摘要目的探讨依达拉奉联合丁苯酞软胶囊治疗早期急性脑梗死(ACI)的疗效，分析该方法对血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β蛋白和超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。方法选择2017年2月至2018年12月临猗县人民医院神经内科诊疗的急性脑梗死患者96例，按照入院单双号随机标记法分为观察组和对照组各48例，对照组单独使用依达拉奉进行治疗，观察组患者在对照组的基础上联合丁苯酞软胶囊进行治疗；观察并分析治疗前后的NSE、S-100β、SOD水平变化以及美国国立卫生研究院卒中量表(NI-HSS)的评分变化。结果治疗前两组NSE、S-100β及SOD水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后观察组血清NSE(6.29±1.72)μg/L、S-100β(3.73±1.56)μg/L，均低于治疗前，且均低于对照组(t＝3.769、3.317，均P<0.001)；治疗后观察组SOD(42.38±7.32)μg/L，明显高于对照组(t＝3.533，P<0.05)；观察组总有效治疗率为97.92%，高于对照组的75.00%(χ2＝10.766，P<0.001)。结论使用依达拉奉联合丁苯酞软胶囊进行对ACI进行治疗，可有效提高ACI的临床治疗效果，进一步保证早期急性脑梗死患者的术后恢复，值得在相关疾病诊治中推广。