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  • 简介:目的:研究细菌内同源重组法构建靶向Survivin腺病毒载体及其体外扩增表达。方法:将survivin基因克隆至穿梭质粒载体中,特异性酶切后回收、连接、转化,构建负载survivin片段重组腺病毒载体。提取重组病毒基因酶切鉴定后,包装成病毒,并扩增到所需滴度。行Westernblotting鉴定,观察重组腺病毒载体在真核细胞表达。结果:(1)重组穿梭质粒MluI酶切鉴定结果显示,酶切结果均与相应载体及目的片段大小相符合,基因测序结果基本一致。(2)凝胶电泳产生了两条大约15kb8.5kb片段,由图2可知重组腺病毒质粒酶切充分完全,且回收率较高。(3)重组腺病毒载体转染AD293细胞24h后已出现细胞病变效应,病变细胞细胞核变大。(4)D260/OD280值为1.92,表明重组腺病毒纯度较高。(5)AD293细胞病毒上清中有能与抗Survivin单抗反应蛋白,相对分子质量理论值相吻合,阴性对照组无对应条带出现。结论:本方法成功构建表达了含Survivin重组腺病毒载体,为进一步进行Survivin基因功能研究提供了实验基础理论支持。

  • 标签: 细菌内同源重组法 SURVIVIN 腺病毒载体
  • 简介:目的:探索蔗糖酯类超声造影剂制备方法,并研究其造影效果。方法:采用声振法制备蔗糖酯类造影剂,将F68SE-5按一定质量比称取配置微泡包膜材料,以微泡浓度为指标进行制备优化,将F68SE-5按1:1质量比称取,将其配置成乳状液置入声振仪,以不同超声功率(200W、400W、600W及800W),不同声振时间(30s、60s、90s、120s、150s、180s、210s、240s、270s及300s)进行声振处理。将F68SE-5分别按6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、2:1、3:1及4:1质量比称取制成乳状液,选择最佳声振功率声振时间,筛选最佳溶液配比。选用优化条件下制备微泡,观察兔肝脏造影效果。结果:蔗糖酯类造影剂最佳制备条件为:泊洛沙姆188(PluronicF68)蔗糖酯-5(SE-5)配比为2:1,声振仪功率为600W,声振持续时间为240s。注射造影剂后兔肝脏超声造影图像清晰,回声强度明显增强。结论:通过优化制备工艺,制备出蔗糖酯类微泡浓度及直径均符合超声造影要求,具有良好显影效果。

  • 标签: 蔗糖酯 泊洛沙姆 六氟化硫 微泡 超声造影剂
  • 简介:目的:肿瘤多药耐药现象会显著降低肿瘤细胞内药物浓度,本研究通过制备抗肿瘤多药耐药靶向给药系统来逆转肿瘤耐药性以提升细胞对药物敏感性,从而降低该现象对癌症治疗阻碍。方法:本文使用乳化溶剂挥发法制备以含姜黄素两亲性嵌段共聚物载体、以紫杉醇和磁性粒为核心抗肿瘤多药耐药纳米粒,使用透射电镜动态粒径散射仪等对纳米粒进行表征磁响应性测试后,使用MTT法测定纳米粒对肿瘤耐药细胞MCF-7/ADR抑制率以探究给药系统耐药逆转性能。结果:制备抗肿瘤多耐药纳米粒粒径为105nm左右,磁响应性良好。所制得载紫杉醇纳米粒包封率为74.74%,载药率为12.40%。纳米粒可以通过磁场生物素受体介导作用促进肿瘤细胞对粒子内化,以增加抗癌药物蓄积。游离紫杉醇相比,逆转细胞耐药指数达8.5。结论:纳米系统在维持自身稳定性同时,能够凭借协同作用靶向作用较大程度提升药物对耐药肿瘤细胞杀伤效果。

  • 标签: 纳米粒 抗肿瘤 靶向性 逆转耐药
  • 简介:目的:通过探讨缬沙坦联合氨氯地平治疗高血压伴左心肥厚患者疗效及对心功能影响,为临床治疗提供依据。方法:选择2010年1月~2014年12月我院收治高血压伴左心室肥厚患者共120例,按照随机数字表法随机分为观察组对照组。对照组患者给予氨氯地平,观察组患者缬沙坦联合氨氯地平治疗,治疗6个月后,观察两组患者舒张压(DBP)、收缩压(SBP)、心率(HR)、室间隔厚度(IVST),左室后壁厚度(LVPWT)、左室舒张末期内径(LVDd)左室重量指数(LVMI)。结果:治疗后,两组患者SBP、DBPHR均较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组患者SBP、DBPHR均低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。治疗后,两组患者IVST、IVPWT、LVDdLVMI均较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P〈0.05);观察组患者IVST、IVPWT、LVDdLVMI均低于对照组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:缬沙坦联合氨氯地平治疗高血压伴左心肥厚患者,能够降低患者血压、逆转左心室肥厚,改善患者心功能,疗效优于氨氯地平单独治疗,值得临床推广应用。

  • 标签: 高血压 左心肥厚 缬沙坦 氨氯地平
  • 简介:目的:探究中空硅纳米粒在细胞线粒体内定位。方法:以阿霉素为模型药物及荧光影像分子,通过激光共聚焦显微镜,考察中空硅纳米粒线粒体分子探针在线粒体内共定位。通过差速离心法提取线粒体,进一步确认硅纳米粒在线粒体内聚集。结果:线粒体分子探针为共定位参照,中孔硅纳米粒在线粒体中分布皮尔逊系数为0.758±0.033,线粒体提取结果显示,进入细胞纳米粒有90.01±3.89%分布于线粒体。结论:中空硅纳米粒具有自发聚集于线粒体能力,可以作为药物靶向递送载体,为线粒体类疾病治疗提供新平台。

  • 标签: 中空硅纳米粒 线粒体靶向 药物递送
  • 简介:目的:探讨芳香烃受体(arylhydrocarbonreceptor,AhR)在过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老模型中表达变化情况及其对血管生成相关因子表达影响。方法:采用不同浓度H2O2(100μM,200μM,300μM)处理HUVECs诱导内皮细胞衰老,通过β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老情况,Westernblot检测HUVECs中AhR蛋白以及血管生成相关因子低氧诱导因子-1α(hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-1α)蛋白表达,ELISA检测细胞培养上清液中血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达变化。结果:对照组相比,经过不同浓度H2O2处理后,HUVECs均出现细胞衰老表现,AhR蛋白表达显著增加,HIF-1α以及VEGF蛋白表达明显减少,且均呈现出剂量依赖性,以300μMH2O2处理组最为显著。结论:在过氧化氢诱导衰老的人脐静脉内皮细胞中AhR蛋白表达明显增加,HIF-1αVEGF等促血管生成因子明显减少。

  • 标签: 芳香烃受体 人脐静脉内皮细胞 衰老 低氧诱导因子-1Α 血管内皮生长因子
  • 简介:抗生素摄入通常会损伤肠道天然菌群,从而就会抑制机体控制病原体能力,进而引发常见腹泻肠道炎症等病症。艰难梭菌(Clostridiumdifficile)就是一种通过毒素攻击肠道细胞病原体,会在肠道细胞表面形成一种特殊突起结构。进而使得更多细菌在肠道细胞表面着陆引发感染。

  • 标签: 细菌性腹泻 发病机理 科学家 细胞表面 艰难梭菌 病原体
  • 简介:目的:分析肺部炎性假瘤高分辨率CT影像学表现极其鉴别诊断价值。方法:收集2012年4月-2015年4月我院收治59例经手术病理检查证实为肺部炎性假瘤患者为病例组,并于同一时期随机选取80例周围型肺癌患者为对照组。比较两组患者高分辨率CT影像学特征,并分析各种影像学特征肺部炎性假瘤关系。结果:病例组刀切征、桃尖征及延迟期持续强化发生率高于对照组,分叶征发生率低于对照组(均P〈0.05)。多因素Spearman秩相关分析发现,刀切征、桃尖征及延迟期持续强化肺部炎性假瘤诊断呈正相关关系(r=0.738,0.829,0.763,均P〈0.05),分叶征肺部炎性假瘤诊断呈负相关关系(r=-0.791,P〈0.05)。结论:CT影像学表现中刀切征、分叶征、桃尖征及延迟期持续强化对肺部炎性假瘤具有较高鉴别诊断价值,可作为临床辅助诊断肺部炎性假瘤重要影像学资料。

  • 标签: 肺部炎性假瘤 周围型肺癌 CT 影像学表现 诊断价值
  • 简介:近日,刊登于国际杂志ScienceTranslationalMedicine上一项研究论文中,来自纪念斯隆凯特琳癌症中心研究人员通过研究鉴别出了一种新型策略,可以将药物靶向特异性作用于癌症位点,包括转移性肿瘤等;文章中,研究者设计了一种纳米颗粒来模拟肿瘤自身在机体全身转移机制。而且这种新型纳米颗粒适用于一系列类型肿瘤药物。同时也可以用于自身免疫疾病血管疾病中。

  • 标签: 纳米颗粒 癌症 机制 科学家 利用 自身免疫疾病
  • 简介:目的:研究miR-9在卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)中作用。方法:上调或者下调miR-9后,在RNA水平上通过RT-qPCR检测卵巢癌细胞系SKOV3A2780中上皮指标E-cadherin表达变化;在蛋白水平,通过westernblotting方法检测2株细胞系中上皮指标E-cadherin间质指标vimentin蛋白表达变化。生物信息学预测可能靶向E-cadherin3’UTRmiRNA,双荧光素酶报告系统进一步验证miR-9靶向结合E-cadherin3’UTR区。结果:上调miR-9后,卵巢癌细胞系中E-cadherin表达受到明显抑制,vimentin表达明显增加;反之,下调miR-9后,E-cadherin表达明显增高,vimentin表达明显降低。通过生物信息学预测发现miR-9可以直接靶向E-cadherin3’UTR区,荧光素酶报告系统验证预测结果正确。结论:miR-9促进卵巢癌细胞上皮间质转化。

  • 标签: MIR-9 卵巢癌 侵袭与转移 E-CADHERIN
  • 简介:目的:对一例酪氨酸血症患儿进行临床表现基因突变分析。方法:采用血氨基酸液相色谱-串联质谱法尿液有机酸气相色谱-质谱分析患儿血尿代谢情况,采用PCR一代测序技术分别对患儿FAH基因HPD基因外显子及其旁翼区进行序列分析。结果:检测出先证者血液中酪氨酸水平为404.6μM、甲硫氨酸(Met)水平为126.4μM、苯丙氨酸(Phe)水平为514.8μM,三者浓度均明显高于正常水平;尿液中检测出4-羟基苯乙酸(+)、4-羟基苯乳酸(+)4-羟基苯丙酮酸(++);基因序列分析FAH基因未见异常,HPD基因上发现突变位点c.G97A(p.A33T)。结论:根据患儿临床表现及血尿代谢检测结果,提示患儿为酪氨酸血症患者,进一步基因检测结果提示患儿可能为罕见Hawkinsinuria症。

  • 标签: 酪氨酸血症 Hawkinsinuria症 代谢分析 序列分析
  • 简介:近日,来自卡罗琳学院路德维格癌症研究所科学家们通过联合研究,对发育第一周胚胎进行了详尽分子特性分析,结果表明。人类小鼠胚胎发育过程存在相当大差异。而且X染色体上基因或被以不同方式进行调节;相关研究结果刊登于国际著名杂志Cell上。

  • 标签: 早期胚胎发育 CELL 科学家 人类 大发 胚胎发育过程
  • 简介:目的:探讨核质双向转运蛋白Importin13(IPO13)在翼状胬肉中表达及意义。方法:收集2015年1月至2015年6月在中南大学湘雅医院眼科门诊确诊为"翼状胬肉"并行手术切除患者标本5例作为翼状胬肉组,收集人正常球结膜组织5例作为人正常结膜组织组,采用免疫组织化学方法检测两组结膜上皮翼状胬肉组织IPO13、核转录因子p63、ABCG2、CD133表达。结果:IPO13及p63表达定位于结膜上皮翼状胬肉组织上皮基底细胞核内,ABCG2表达定位于结膜上皮翼状胬肉上皮基底细胞层细胞浆及细胞膜,CD133表达定位于结膜上皮翼状胬肉上皮基底细胞层细胞膜。IPO13、p63、ABCG2及CD133在人正常结膜组织中均呈低表达(光密度OD值IPO13:0.43±0.30;p63:139.09±40.15;ABCG2:63.63±22.56;CD133:70.31±33.41);在翼状胬肉中表达均明显增高(OD值IPO13:155.1±21.80;p63:617.35±87.43;ABCG2:214.03±34;CD133:201.05±46.38)。两组之间差异显著(IPO13:t’=15.87,P〈0.005;p63:t’=11.92,P〈0.005;ABCG2:t=8.15,P〈0.005;CD133:t=5.08,P〈0.005)。结论:IPO13、p63、ABCG2及CD133在翼状胬肉中高表达提示可能在翼状胬肉异常增殖性病变中起着正向调控作用。

  • 标签: 翼状胬肉 Importin13 P63 ABCG2 CD133
  • 简介:目的:探讨阿米洛利对脑梗死急性期患者血清ox-LDL、炎症因子及MMP-9水平影响及其意义。方法:选取我院诊治急性脑梗死患者120例,随机分为对照组实验组,每组60例。两组患者均给予常规对症治疗,实验组在对照组治疗基础上加用盐酸阿米洛利片。采用酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫透射比浊法分别测定两组患者血清ox-LDL、炎症因子及MMP-9水平,并对患者神经功能缺损程度进行评分。结果:治疗后,两组患者神经功能均较治疗前明显改善,且实验组明显优于对照组,差异均具有统计学意义(P〈0.05);治疗后,两组患者血清ox-LDL及MMP-9水平均低于治疗前,且实验组低于对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05);治疗后,两组患者血清炎症因子TNF-α、IL-6及hs-CRP水平均低于治疗前,且实验组低于对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论:阿米洛利能够降低脑梗死急性期患者ox-LDL、TNF-α、IL-6、hs-CRP及MMP-9水平,减轻炎症反应,改善患者神经功能。

  • 标签: 急性脑梗死 盐酸阿米洛利 氧化低密度脂蛋白 炎症因子 MMP-9
  • 简介:目的:探讨氟代脱氧葡萄糖((18)F-FDG)正电子发射断层显像/X线计算机体层成像仪(PET/CT)检查在局灶早期宫颈癌中临床应用价值。方法:53例病理确诊为早期宫颈癌患者行全身~(18)F-FDGPET/CT检查,并在检查结束10日内行广泛性全子宫切除术+双附件切除术+盆腔淋巴结清扫术,计算(18)F-FDGPET/CT诊断宫颈原发部位肿瘤及盆腔淋巴结转移敏感度,特异度准确度。结果:(18)F-FDGPET/CT检查诊断宫颈原发部位肿瘤敏感度为79.25%,特异度为86.79%,准确度为84.9%;以病人为单位诊断盆腔淋巴结转移准确度为85.71%,特异度为97.87%;以淋巴结为单位诊断盆腔淋巴结转移准确度为84.61%,特异度为99.00%。结论:PET/CT显像对宫颈癌诊断,分期诊断及盆腔淋巴结转移检出具有重要临床意义。

  • 标签: 宫颈癌 18F-FDG PET/CT 诊断 分期
  • 简介:目的:探讨携带IGF-1基因慢病毒转染脂肪间充质干细胞(ADMSCs)可行性,对引起细胞凋亡机制做出初步研究,并讨论PI3K/Akt通路关系。方法:分离培养ADMSCs,利用脂质体将携带IGF-1基因慢病毒载体转染入ADMSCs。实验分为Blank组,Lv-nonLv-IGF-1三组,转染后用MTT法测定各组细胞生长情况并绘制生长曲线,流式细胞术测定各组细胞凋亡,Westernblot测定各组中IGF-1、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白表达。结果:成功分离、培养了大鼠脂肪间充质干细胞;携带IGF-1慢病毒载体转染ADMSCs后,流式细胞术检测发现Lv-nonBlank组凋亡率明显高于Lv-IGF-1组(P〈0.05)。同时发现Lv-IGF-1组中促凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9蛋白Bax表达水平显著下调(P〈0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2显著上调(P〈0.01)。MTT法结果显示Lv-IGF-1能促进细胞生长,在5到6天时显著高于其他两组(P〈0.05)。通过检测PI3K/Akt通路发现,Lv-IGF-1组PI3Kp-Akt水平显著高于BlankLv-non组(P〈0.05),通路被激活。结论:携带IGF-1基因慢病毒载体成功转染ADMSCs。在ADMSCs中过表达IGF-1蛋白可以促进细胞生长,同时抑制细胞凋亡,机制可能与PI3K/Akt通路蛋白磷酸化相关。

  • 标签: 脂肪间充质干细胞 慢病毒载体 IGF-1基因 PI3K/AKT通路
  • 简介:目的:探讨高分辨率熔解曲线分析(Highresolutionmelting,HRM)技术检测结核分枝杆菌耐药突变位点可行性。方法:对218株结核分枝杆菌进行利福平(RFP)异烟肼(INH)药物敏感性测定,并进行耐药基因位点PCR扩增测序,同时采用HRM方法检测RFPINH耐药基因位点情况,分析HRM敏感性特异性。结果:218株结核分枝杆菌药敏试验结果显示,有106株(48.6%)对RFP耐药,100株(45.9%)对INH耐药,81株(37.4%)对RFPINH均耐药。测序发现,101株(46.3%)存在RFP耐药基因突变,107株(49.1%)存在INH耐药基因突变。HRM检测结果显示,100株(45.9%)存在RFP耐药基因突变,103株(47.2%)存在INH耐药基因突变。分别以药敏试验测序结果为标准,HRM检测RFP耐药敏感性为94.3%(100/106)99.0%(100/101);特异性为97.3%(109/112)100%(117/117);INH耐药敏感性为97.0%(97/100)98.1%(103/105);特异性为97.3%(109/112)100%(113/113)。结论:HRM快速检测结核分枝杆菌耐药具有较高特异性灵敏度,能够满足临床需求。

  • 标签: 高分辨率熔解曲线 结核 耐药 特异性 灵敏度
  • 简介:目的:探讨人参皂苷对骨肉瘤患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)影响及临床疗效。方法:收集我院收治骨肉瘤患者60例,根据用药不同分为对照组实验组,每组30例。对照组采用FOLFOX4方案化疗,实验组在对照组基础上加用人参皂苷治疗。观察并比较两组患者治疗前后肿瘤体积、血清VEGF及TSGF水平变化以及临床疗效。结果:治疗前比较,两组患者治疗后肿瘤体积均显著减小,血清VEGF及TSGF水平均显著下降,差异具有统计学意义(P〈0.05);对照组相比,实验组患者治疗后肿瘤体积减小更明显,血清VEGF及TSGF水平下降更显著,差异具有统计学意义(P〈0.05);实验组患者治疗总有效率(80.0%)显著高于对照组(46.67%),差异具有统计学意义(P=0.009)。结论:人参皂苷能够显著降低骨肉瘤患者血清VEGF及TSGF水平,减小肿瘤体积,临床疗效显著。

  • 标签: 人参皂苷 骨肉瘤 血清血管内皮生长因子 肿瘤特异性生长因子 临床疗效
  • 简介:目的:探讨活血化瘀通络法联合针刺辅助治疗对糖尿病下肢血管病变(DLEAD)影响。方法:收集我院DLEAD患者90例,随机分为实验组1、实验组2对照组。对照组予DLEAD基础治疗。实验组1在对照组基础上予以活血化瘀法中药治疗。实验组2在实验组1基础上加针刺治疗。对三组患者治疗前、治疗后进行FBG、P2hBG、HbAlc测定,血清IL-6、ET-1水平测定及PAgT%、踝肱指数ABI测定。结果:1治疗后三组FBG、P2hBG、HbAlc均下降,两组实验组较对照组均改善更明显,且实验组2下降更明显,差异有统计学意义(P〈0.05);2治疗后三组IL-6、ET-1及PAgT%均下降,两组实验组均比对照组改善更明显,实验组2下降更明显,差异有统计学意义(P〈0.05);3治疗后三组ABI均有所改善,两组实验组均更明显改善,且实验组2ABI上升更明显,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:活血化瘀联合针刺治疗,可调节血清IL-6、ET-1水平,降低PAgT%,改善ABI,可有效提升DLEAD患者临床疗效,改善预后,对提高患者生活质量有重要意义。

  • 标签: 活血化瘀法 针刺 糖尿病 下肢血管病变
  • 简介:目的:探讨低频脉冲电治疗仪联合木丹颗粒对糖尿病周围神经病变临床疗效。方法:收集我院收治糖尿病周围神经病变患者90例,随机分为实验组对照组。对照组患者给予甲钴胺片治疗,实验组患者给予木丹颗粒联合低频脉冲电刺激治疗。观察并比较两组患者治疗前后FBG、P2hBG及HbAlc水平变化情况,记录患者正中神经、腓神经运动神经传导速度(MCV)及感觉神经传导速度(SCV),参照TCSS评分判定临床疗效。结果:治疗后,两组患者腓总神经及正中神经MCV、SCV均上升,对照组比较,实验组上升显著,差异有统计学意义(P〈0.05);治疗后,两组患者TCSS评分均下降,对照组比较,实验组下降更明显,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:低频脉冲电治疗仪联合木丹颗粒治疗糖尿病周围神经病变疗效优于单用甲钴胺片治疗。

  • 标签: 低频脉冲电治疗 木丹颗粒 糖尿病周围神经病变