简介:摘要:自发性气胸是肺部疾病常见的急症之一,是在无外伤或人为医疗因素的情况下,肺组织及脏层胸膜突然破裂而引起的胸腔气胸。在法医活体检验鉴定工作中一般遇到的气胸都是外伤性气胸,但有些气胸可能自发性气肿,检验鉴定工作中杜绝草率,去伪存真,要认真地分析气胸的发生的基础。
简介:【 摘要 】: 目的 采样 6 例疑难血型的鉴定结果,并分析其产生原因。方法 对本院 2018 年 -2019 年收治遇到的 6 例疑难血型作为研究对象,对着 6 例 ABO 疑难血型血液标本进行血清学检测,分别采用吸收放散试验 唾液血型物质的测定、配血试验对血型正、反定型进行检测。结果 6 例 ABO 疑难血型血液标准中, 1 例 血清中抗 -A 的反应性减弱 , 2 例 ABO 亚型 , 2 例无 无凝集或溶血反应 , 1 例出现凝集反应。结论 正常人抗体缺乏见于免疫耐受现象,肿瘤患者在急性发作期或化疗后造成机体免疫功能低下,特异性抗体水平下降。
简介:摘要目的评估痰潘多拉菌生化反应、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和基因测序的鉴定结果,为临床微生物鉴定痰潘多拉菌提供更佳方案。方法方法性能评价。收集2018年7至10月武汉大学中南医院住院患者血培养中分离的10株痰潘多拉菌,对其培养特性、菌落形态和染色特征进行研究和记录。然后分别通过手工生化鉴定(API 20NE)、全自动微生物鉴定分析系统(梅里埃VITEK 2 Compact、BD Phoenix-100、赛默飞世尔ARIS 2X)、MALDI-TOF MS(梅里埃VITEK MS和布鲁克MALDI Biotyper)和16S核糖体核糖核酸(rRNA)基因测序对痰潘多拉菌进行鉴定,并评估各方法的鉴定性能。结果痰潘多拉菌是一种动力阴性、氧化酶阳性、触酶阳性的非发酵革兰阴性杆菌。10株痰潘多拉菌的API 20NE鉴定结果为反硝化无色杆菌、粪产碱菌或少见嗜铜菌,种属鉴定准确率0;VITEK 2 Compact鉴定结果显示其中6株为潘多拉菌属,3株为其他种属细菌(洋葱伯克霍尔德菌群、少动鞘氨醇单胞菌、皮氏罗尔斯顿菌),1株为Low Discrim(低分辨率),属鉴定准确率6/10;Phoenix-100鉴定结果显示10株均为无鉴定结果,种属鉴定准确率0;ARIS 2X鉴定结果显示其中7株为其他种属细菌(嗜麦芽窄食单胞菌、鲁氏不动杆菌、少动鞘氨醇单胞菌、浅黄假单胞菌、鲍曼不动杆菌复合体/溶血不动杆菌),3株为极罕见生物类型,种属鉴定准确率0;VITEK MS和MALDI Biotyper鉴定结果均为痰潘多拉菌,种属鉴定准确率10/10;16S rRNA基因测序结果与痰潘多拉菌相似度为100%。结论目前基于生化反应的临床微生物学检验方法很难将痰潘多拉菌准确鉴定到种的水平,MALDL-TOF MS和16S rRNA基因测序技术是目前鉴定痰潘多拉菌快速准确的方法。
简介:摘要目的制备全人源表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体,为基于人EGFR靶点的肿瘤免疫调节治疗提供基础制剂。方法采集110例胸部肿瘤(肺癌102例,乳腺癌8例)患者外周血,构建噬菌体单链抗体库。经噬菌体展示后筛选阳性克隆,测序并构建全长轻重链表达载体质粒,共转染HEK293。通过亲和层析获得纯化抗体,抗原抗体免疫反应测定抗体特异性和敏感性,生物膜干涉(biolayer interferometry,BLI)技术测定抗体亲和力和流式细胞技术(fluorescence activating cell sorter,FACS)检测对肿瘤细胞系EGFR结合活性。结果成功构建肺癌单链抗体噬菌体库,抗体库库容≥108,筛选获得两株单抗,分别为BTHG17-1,BTHG17-2,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定结合抗原敏感性为10 ng/mL,亲和力在10-8 mol/L水平,两抗体结合相同表位,可特异性结合野生型EGFR和突变体EGFRvⅢ蛋白,具有结合肺癌和神经胶质瘤细胞活性。结论获得较高亲和力全人源EGFR单链抗体(single-chain variable fragment,scFv),具有EGFR(包括EGFRVⅢ)特异性,为EGFR靶点封阻和免疫导向治疗研究提供一种新抗体工具。
简介:摘要:目的:讨现代分析技术在中药鉴定中的应用方法及效果。方法 综合分析中药鉴定过程中应用不同现代分析技术的效果,包括光谱法、中药指纹图谱技术、X 射线衍射法、色谱法、广谱 - 色谱联合法以及经典物理化学法等。结果 在对不同种类的中药进行鉴定时,需采取一种最适的现代分析技术,并能获得比较高的鉴定准确率。 结论 在中药鉴定工作开展过程中,现代分析技术的应用,如红外光谱法、X 线衍射法、色谱法等,能够确保中药鉴定的结果符合相关药典规定标准要求,提高中药鉴定结果的准确度,为进一步在临床治疗中的合理、高效应用提供客观、科学的参考依据。
简介:摘要目的探讨ABO亚型B(A)的血型鉴定方法及其分子机制。方法选择2015年7月,于山东省泰安市中心医院因ABO血型正反定型不符,拟行进一步血型鉴定的1例患者为先证者;以先证者、先证者丈夫及其2个儿子为研究对象。本例先证者为女性,45岁。采用常规血清学方法鉴定受试者的ABO血型。采用序列特异性引物(SSP)-PCR法对受试者ABO基因第6、7外显子进行直接测序,并且根据测序结果确定其ABO基因型。本研究遵循的程序符合山东省泰安市中心医院人体试验委员会制定的标准,经过该伦理委员会批准(批准文号:2015-018),并与所有受试者签署临床研究知情同意书。结果① ABO血型正反定型检测结果显示,先证者及其长子ABO血型为B(A)亚型,先证者丈夫和次子为O型。吸收放散试验结果显示,先证者与其长子血清标本中检测出A抗原,其丈夫与次子未检测出A抗原。② ABO基因测序结果显示,先证者及其长子均检出O02等位基因,ABO基因第7外显子存在c.640A>G突变,符合B(A)04等位基因的特征,其基因型均为B(A)04/O02;先证者丈夫和次子基因型为O01/O02。先证者长子的B(A)04等位基因来源于先证者,B(A)04等位基因的遗传方式为顺式遗传。结论分子生物学方法是鉴定罕见ABO亚型的必要方法。ABO基因第7外显子c.640A>G突变是形成B(A)04等位基因的分子遗传学基础之一。
简介:摘要目的探索器官捐献与法医鉴定的协调与实践,阐明并有效化解公众视角中两者之间的概念与矛盾冲突。方法由于交通事故死亡案件涉及责任认定等事宜,需要法医提供鉴定文书,故使家属对器官捐献产生疑虑,并陷入抉择两难。分析4例因交通事故患者逝世后进行器官捐献的案例。最终导致器官捐献意愿受阻。结果供者临床病历数据资料为法医就原发性、继发性损伤及并发症与死亡之间的关系进行系统分析提供了科学可靠的依据。器官捐献和法医鉴定两者之间并不冲突也不矛盾。结论建立有效的供者法医尸检管控策略,完善相关法规与流程,并进一步明确器官获取组织(OPO)及法医工作者在器官捐献及相关案件中的工作范畴与职责,为供者家属提供科学的理论依据及司法解析,可以有效消除家属对器官捐献的顾虑及排斥,促进我国器官捐献的发展。
简介:摘要目的构建大鼠RNAi-腺苷A2a受体(A2aR)慢病毒载体并进行鉴定。方法首先构建3对短发夹RNA(shRNA)-A2aR序列(shRNA-A2aR 1、shRNA-A2aR 2、shRNA-A2aR 3),在shRNA慢病毒载体中分别插入3对双链shRNA oligo,shRNA慢病毒重组质粒构建成功后,将重组质粒、包装载体、穿梭载体共转染293T细胞,从而获得病毒液。实验Ⅰ 采用随机数字表法将大鼠原代心肌细胞分为3组(n=6):空载组(V组)、shRNA-A2aR 1组和shRNA-A2aR 3组,各组分别转染MOI为10的相应病毒液,转染48 h时,Western blot法检测A2aR表达水平,确定干扰效率,以筛选最佳慢病毒载体。实验Ⅱ 采用随机数字表法将大鼠原代心肌细胞分为5组(n=36):空载组(V组)、MOI5组、MOI10组、MOI15组和MOI20组,各组分别转染相应MOI的病毒液(最佳慢病毒载体),于转染24、48和72 h时,采用CCK-8法测定细胞存活率,荧光显微镜下观察细胞活力和细胞死亡情况,Western blot法检测A2aR表达水平,确定干扰效率。结果实验Ⅰ 成功构建了2种shRNA-A2aR慢病毒载体(shRNA-A2aR 1、3)。shRNA-A2aR 3病毒液滴度为3.5×108 TU/ml。与V组和shRNA-A2aR 1组比较,shRNA-A2aR 3组心肌细胞A2aR表达下调(P<0.01),shRNA-A2aR 3慢病毒载体干扰效率73%。实验Ⅱ 选择shRNA-A2aR 3慢病毒载体转染24 h时,各组细胞存活率均>85%;转染48 h时,MOI5组和MOI10组细胞存活率>80%;转染72 h各组细胞存活率<70%。倒置荧光显微镜下可见,MOI5组荧光密度稍低,MOI10组转染48 h及MOI20组转染24 h时,荧光密度较高且细胞状态较好;转染72 h时各组心肌细胞活力明显下降、死亡细胞增加。Western blot显示:MOI10组转染48 h、MOI15组转染48 h、MOI20组转染24和48 h时干扰效率均>70%。结论成功构建了大鼠shRNA-A2aR慢病毒载体,且MOI为10、转染48 h或MOI为20、转染24 h为最佳转染方案。