简介:目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库,以阳性克隆为模板,RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础,经过多次酶切连接,构建逆病毒表达载体pMX—MTA1-flag—IRES—EGFP。将构建好的逆病毒载体系统,转染293-gag/pol细胞,包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞,获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿,获得大量单克隆细胞系,以GFP为筛选标志,筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、WesternBlot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关,相关系数r=0.932,P〈0.01。结论利用逆病毒表达系统,快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系,为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。
简介:摘要目的探讨活动义齿压痛的解决方法。方法运用软衬材料衬垫义齿组织面。结果该方法有效解决了活动义齿的压痛。结论加聚硅橡胶软衬材料衬垫活动义齿的组织面是解决活动义齿压痛的快捷有效的方法。
简介:摘要目的探讨胎儿脐静脉脱细胞基质作为尿道缺损修补替代材料的可行性。方法选择24只雄性白兔,随机分为实验组(n=18)和对照组(n=6)。实验组切除尿道2.0cm后用人脐静脉细胞外基质修复,对照组离断长2.0cm的尿道后直接缝合两断端,术后行组织学和膀胱尿道造影评价尿道修复情况及功能。结果实验组中有1只出现尿瘘,对照组4只出现尿瘘,2只排尿困难。术后16周实验组尿道膀胱造影实验组见尿道完整、光滑,无尿液外渗、尿道憩室等形成。对照组尿道缺损处管腔变窄,无法注入造影剂。术后2周实验组移植段尿道有上皮细胞生长,8周时移植段出现不规则紊乱的平滑肌细胞生长,无炎性细胞;16周后,新尿道上皮下方为正常的尿道海绵体组织,无明显的炎性细胞浸润。结论胎儿脐静脉脱细胞基质是一种较为理想的管状尿道修补替代材料。
简介:背景:随着技术的发展,不同种类颅骨修补材料性能及临床应用效果不尽相同,很多修补材料因自身的种种缺点已经被淘汰,新型的生物材料仍在进一步开发。目的:探讨颅骨修补材料的研究进展及数据分析结果。方法:SCI数据库中2002/2011检索有关生物材修复颅骨缺损文献,检索词为"颅骨缺损(skulldefect);修补(repair);复合材料(material);钛网(titaniumplate);骨水泥(bonecement);自体骨(autogenousbone);硅橡胶(siliconerubber);有机玻璃(organicglassor"pmma"orpolymethylmethacrylate)",共检索文献242篇。结果与结论:颅骨缺损的修复材料甚多,疗效不一,目前主要有自体骨、异体骨、医用高分子材料、钛金属材料、骨水泥以及组织工程复合材料等,采用何种修补材料能将颅骨缺损修复的更加完美是当前国内外学者研究的热点。
简介:目的研究利用自组装法制备的纳米羟基磷灰石/胶原(HA/COL)复合物的理化特性和生物学特性。方法采用自组装法制备出HA/COL复合物,通过傅里叶红外光谱仪、透射电镜、X射线粉末衍射仪分析HA/COL复合物的理化特性;采用MTT法及扫描显微镜分析HA/COL复合物的生物学特性。结果HA/COL复合物微观结构与自然骨相似,胶原与HA之间产生了化学键合,晶粒尺度在纳米范围内,细胞毒性为0—1级,细胞在其表面生长状态良好。结论自组装法制备的仿生HA/COL复合物骨材料,具有与天然骨相似的组成成分和微观结构,并具有良好的生物相容性,是一种理想的人工骨支架材料。
简介:摘要目的探讨不同填充材料在根管治疗中的应用效果。方法选取2009-2011年于我院口腔门诊收治的需行根管治疗的患者150例,共166颗牙,根据填充材料的不同选择,分为三组。其中,使用日本vitapex糊剂(主要成分氢氧化钙、碘仿)的50例为A组;使用为填料Cortisomol根管糊剂(氧化锌加碘仿按61比例用丁香油调制)的50例为B组;使用氧化锌糊剂为充填材料的50例为C组,氧化锌由南昌扬子医药化工厂生产。三组均采用常规根管治疗法对进行根管充填,观察三组的临床效果。结果A组临床有效率高于B组和C组,且比较差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。结论vitapex糊剂作为填充材料临床疗效显著,Cortisomol根管糊剂根管治疗中的效果也可以保证,但需要填充过程中糊剂用量的经验性较大。