简介：摘要目的研究萝卜硫素（SFN）对人结肠癌SW480细胞增殖、侵袭及Notch通路的影响。方法MTT法测定不同浓度SFN对SW480细胞生长抑制作用，Transwell侵袭实验测定1、2、5 μmol/L SFN对SW480细胞体外侵袭能力的影响，划痕实验测定1、2、5 μmol/L SFN对SW480细胞体外迁移能力的影响，Western blotting法测定1、2、5 μmol/L SFN处理后SW480细胞Notch、Hes1、Ki-67、增殖细胞核抗原（PCNA）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、E-cadherin蛋白表达水平。结果与对照组比较，1、2、5、10、20、40 μmol/L SFN处理后均能显著抑制SW480细胞增殖（P<0.05）。5 μmol/L SFN作用48 h后对SW480细胞抑制率为（26.38±3.24）%，细胞活力大于70%，为防止SW480细胞活力过低导致侵袭实验和划痕实验出现假阳性结果，因此后续实验选取SFN浓度1、2、5 μmol/L进行。侵袭和迁移实验发现，与对照组比较，人结肠癌SW480细胞经1、2、5 μmol/L SFN处理48 h后侵袭能力、迁移能力、Ki-67、PCNA、MMP-9蛋白表达水平显著降低（P<0.05），E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P<0.05），呈浓度依赖性；与对照组比较，人结肠癌SW480细胞经1、2、5 μmol/L SFN处理48 h后，Notch、Hes1蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。结论SFN可能通过阻断Notch通路活化，下调Hes1表达水平，达到抑制结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭的目的。

简介：缺血性卒中是临床常见疾病,且致死致残率高,幸存的患者预后多不同程度的患有偏瘫等后遗症,但目前还没有好的治疗方法。很长一段时间以来,卒中后的治疗关注点在于神经元的保护,割裂了神经元和周围细胞的联系。2001年,“神经血管单元”概念的提出为缺血性卒中的临床治疗提供了新的角度。此外,有研究表明Notch信号通路参与了神经、血管再生过程,对于卒中后神经血管单元的修复有调节作用。因此,本文从神经血管单元和Notch信号通路两个切入点综述了二者在缺血性卒中发生后的作用。

简介：摘要目的探讨低氧环境下通过低氧诱导因子-1α（HIF-1α）调控Notch信号通路对人牙髓干细胞（HDPSC）成牙本质向分化能力的影响。方法组织块酶消化法培养HDPSC，给予氯化钴（CoCl2）诱导的化学性低氧环境，Western blot检测HIF-1α蛋白表达，茜素红染色检测细胞矿化结节形成能力，反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Notch下游靶基因Hes1与成牙本质相关基因的表达；进一步加入Notch信号通路特异性阻断剂γ分泌酶抑制剂（GSI），观察以上指标的变化。报告基因方法检测HIF-1α对Notch信号通路的调控作用。采用R version 3.5.3软件进行统计分析，计量资料进行正态检验，多组间比较采用单因素方差分析（方差齐）或Kruskal-Wallis H检验（方差不齐），两两比较采用LSD-t检验（方差齐）或Mann-Whitney U检验（方差不齐）。结果（1）CoCl2诱导的低氧条件下HDPSC中的HIF-1α蛋白水平上调，Notch下游靶基因Hes1 mRNA相对表达量为1.46 ± 0.12，相比常氧组（1.06 ± 0.09）显著增高（t = -4.64，P = 0.012）；GSI处理阻断Notch信号通路后，低氧条件下HDPSC中HIF-1α蛋白水平下调，Hes1 mRNA相对表达量降低至0.82 ± 0.14，与处理前相比差异有统计学意义（t = 5.98，P = 0.004）；常氧条件下GSI处理后的HDPSC中HIF-1α蛋白水平也明显下调，Hes1 mRNA相对表达量（0.30 ± 0.09）相比处理前也显著降低（t = 10.08，P = 0.001）；（2）矿化诱导后的茜素红染色结果显示：低氧处理后，HDPSC细胞成牙本质分化能力下降；GSI处理后，成牙本质向分化能力增强。成骨/牙本质相关基因mRNA表达水平检测结果显示：低氧处理后，BSP、OCN和DSPP的mRNA相对表达量分别为0.53 ± 0.14、0.43 ± 0.20、0.48 ± 0.11，相比常氧组（1.21 ± 0.12、1.08 ± 0.19、1.03 ± 0.13）显著降低（tBSP = 6.30，PBSP = 0.003；tOCN = 4.07，POCN = 0.015；tDSPP = 5.67，PDSPP = 0.005）；GSI处理后，低氧条件下BSP、OCN和DSPP mRNA相对表达量分别为0.99 ± 0.13、1.09 ± 0.13、0.95 ± 0.16，与处理前相比显著增高（tBSP = -4.17，PBSP = 0.014；tOCN = -4.83，POCN = 0.012；tDSPP = -4.30，PDSPP = 0.017），常氧条件下BSP、OCN和DSPP mRNA相对表达量分别为1.73 ± 0.20、1.55 ± 0.08、1.52 ± 0.14，与处理前相比显著增高（tBSP = -3.84，PBSP = 0.027；tOCN = -3.99，POCN = 0.035；tDSPP = -4.43，PDSPP = 0.011）。（3）荧光素酶报告基因结果显示，HIF-1α可调控NICD启动子，使双荧光素酶相对表达活性为5.37 ± 0.12，与对照组（2.09 ± 0.15）相比显著增强（t = -28.92，P<0.001），提示HIF-1α可能使Notch信号通路激活。结论低氧引起HDPSC中HIF-1α升高并可能通过激活Notch信号通路抑制其成牙本质向分化能力。

简介：目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对急性淋巴细胞白血病细胞株Molt-4中Notch1基因的作用机制。方法：采用反转录（RT）-PCR检测正常人外周血淋巴细胞与急性淋巴细胞白血病细胞株A3和Molt-4中Notch1基因mRNA的相对表达量,选取Notch1mRNA表达量较高的Molt-4细胞,分别经浓度0、2、4μmol/LAs2O3处理细胞后,应用细胞计数试剂盒（CCK8）检测细胞活力,显微镜下观察细胞形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测Notch1mRNA表达率,蛋白质印迹法检测细胞内Notch1、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）及胱天蛋白酶3（caspase-3）凋亡蛋白的表达情况。结果：As2O3能下调Molt-4细胞中Notch1基因及蛋白的表达,降低Bcl-2/Bax蛋白比例,并促进凋亡蛋白胱天蛋白酶3的活化,2μmol/LAs2O3处理后,随作用时间延长,Molt-4细胞的凋亡率逐渐增高（r=0.989,P〈0.05）。Molt-4细胞分别经2μmol/L和4μmol/LAs2O3处理72h后,流式结果显示,随As2O3浓度升高,Molt-4细胞凋亡率升高（r=1.000,P〈0.05）。As2O3以时间和浓度依赖的方式诱导Molt-4细胞凋亡。结论：As2O3通过抑制Molt-4细胞株Notch1信号通路的表达,抑制其增殖并诱导凋亡。

简介：摘要目的研究Notch信号通路对婴幼儿血管瘤间充质干细胞(Hem-MSCs)增殖的影响。方法通过手术获取南京医科大学附属儿童医院烧伤整形科收治的25例婴幼儿血管瘤标本，患儿男15例，女10例，年龄3个月至4岁，皆为单发血管瘤，增生期15例，消退期10例，另外取10例患儿瘤旁正常皮肤组织。使用实时定量荧光PCR检测增生期、消退期血管瘤及正常皮肤组织中Notch1、Jagged1及Hes1 mRNA表达情况。用贴壁筛选法从增生期血管瘤中分离Hem-MSCs，通过流式细胞术进行鉴定。在Hem-MSCs中分别加入Notch信号通路抑制剂DAPT和激动剂Jagged1，培养72 h后，实时定量荧光PCR检测试剂干预前、后Hem-MSCs中Notch1、Jagged1及Hes1 mRNA表达情况；蛋白质印迹法检测蛋白表达情况；CCK-8法判定细胞活性和增殖情况。资料以均值±标准差表示。2组间指标比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果在增生期血管瘤组织中Notch1、Jagged1及Hes1相对表达量为0.379±0.121、0.243±0.095、0.222±0.060；在消退期血管瘤组织中Notch1、Jagged1及Hes1相对表达量为0.338±0.091、0.405±0.107、0.310±0.109；在正常皮肤组织中Notch1、Jagged1及Hes1相对表达量为0.111±0.042、0.065±0.036、0.074±0.029。Notch1、Jagged1及Hes1在增生期及消退期血管瘤组织中表达均高于正常皮肤组织，差异具有统计学意义(P值均<0.05)。Notch1在不同时期血管瘤中表达并无明显差异(t＝0.896，P＝0.380)。与增生期血管瘤相比，Jagged1及Hes1在消退期血管瘤中表达更高，差异具有统计学意义，(tJagged1＝3.895、PJagged1＝0.007，tHes1＝2.603、PHes1＝0.016)。在体外成功分离培养出Hem-MSCs，通过流式细胞术鉴定该细胞大量表达间充质干细胞标志物CD90、CD105，不表达CD34、CD45。在Hem-MSCs中加入Jagged1后，Notch1、Jagged1及Hes1的mRNA表达量分别为1.41±0.37、2.42±0.39、1.89±0.35，蛋白表达量为0.42±0.25、1.14±0.32、0.74±0.35，与对照组相比，表达量均增多，差异有统计学意义(P值均<0.05)。加入DAPT后，Notch1、Jagged1及Hes1的mRNA表达量分别为0.58±0.31、0.56±0.21、0.43±0.15，蛋白表达量分别为0.19±0.11、0.62±0.25、0.12±0.04，与对照组相比，表达量均减少，差异具有统计学意义(P值均<0.05)。在Hem-MSCs中加入Jagged1后，细胞吸光度A值为0.52±0.17，与对照组相比，细胞活性和增殖状态都受到抑制，差异具有统计学意义(t＝2.447，P＝0.034)，而加入DAPT后，细胞吸光度A值为1.14±0.24，细胞活性和增殖状态均增强，差异具有统计学意义(t＝3.526，P＝0.006)。结论Hem-MSCs存在活化的Notch信号通路。激活Notch信号通路抑制Hem-MSCs的增殖，抑制Notch信号通路则结果相反。

简介：目的探讨Notch/Dll4通路中Notch1a和Dll4分子在卵巢癌组织中的表达情况及对卵巢癌诊断的价值。方法应用qRT-PCR技术检测39例卵巢癌（观察组）及28例正常卵巢组织（对照组）中Notch1a和Dll4中mRNA的表达差异。结果Notch1a在卵巢癌组织与正常卵巢组织中mRNA表达差异倍数为2.55,差异有统计学意义（P〈0.05）。Dll4在卵巢癌组织与正常卵巢组织中的mRNA表达差异倍数为1.32,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论Notch1a和Dll4可作为卵巢癌诊断的参考指标,亦可将Notch/Dll4通路作为针对卵巢癌治疗的靶标。

简介：目的：探讨牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgingivalis,Pg）脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）刺激人牙周膜成纤维细胞（humanperiodontalligamentcells,hPDLCs）后Notch信号通路的表达及其对RANKL/OPG表达的影响。方法：酶消化法结合组织块法原代培养hPDLCs,取第三代至第五代细胞给予0.1、1、10μg/mlPg-LPS刺激72h,Real-timePCR检测RANKL/OPGmRNA的表达,并选择最佳诱导浓度1μg/ml组,采用Real-timePCR检测Notch通路Notch1-2、Notch4、Jagged-1、Jagged-2、DLL-1以及Hey-1表达受体配体及目的基因表达。随后,以γ-分泌酶抑制剂DAPT预处理hPDLCs1h,予1μg/mlPg-LPS刺激72h后,Real-timePCR、Western-Bloting检测Notch通路目的基因Hey-1及RANKL/OPGmRNA、蛋白水平的表达。结果：1μg/mlPg-LPS可显著上调hPDLCsRANKL、Notch通路受体Notch4、配体DLL-1、Jagged-1及目的基因Hey-1的表达（P〈0.05）;而对OPG、Nocth1-2、Jagged-2mRNA水平表达无明显影响（P〉0.05）。此外,γ-分泌酶抑制剂DAPT可抑制Pg-LPS诱导RANKL及Hey-1mRNA及蛋白的表达上调,而仅对OPGmRNA表达有影响（P〈0.05）。结论：Notch信号通路参与调控Pg-LPS诱导的hPDLCsRANKL/OPG表达。

简介：摘要目的观察低氧条件下HIF-1α/VEGF/Notch信号通路在人脐静脉内皮细胞（HUVEC）血管生成中的作用。方法将HUVEC进行常氧和低氧[二氯化钴（CoCl2），200 μmol/L]诱导，再将常氧和低氧处理的HUVEC应用Notch1信号通路的抑制剂DAPT （30 μmol/L，24 h）和激活剂JAG-1 （30 μmol/L，24 h）干预。通过体外小管形成实验观察低氧对HUVEC血管生成能力的影响。应用RT-PCR和Western blot检测HUVEC中低氧诱导因子-1α （HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、基质金属蛋白酶-9 （MMP-9）和Notch1信号分子（Notch1、Dell4和JAG-1）的mRNA和蛋白表达。通过Transwell迁移实验和伤口愈合实验观察低氧、DAPT、JAG-1对HUVEC迁移能力的影响。应用MTT法检测低氧及Notch1对HUVEC增殖的影响。两组间比较采用t检验，采用析因设计方差分析低氧和DAPT以及低氧和JAG-1对HUVEC迁移能力、距离、小管形成能力和细胞增殖的交互作用。结果与常氧组比较，低氧组小管总长[（8.18±0.62）mm比（15.43±1.32）mm]增高，差异具有统计学意义（P < 0.05）。与常氧组比较，低氧组的HIF-1α、VEGF、MMP-9、Notch1、Dell4和JAG-1的mRNA相对表达量和蛋白相对表达量（1.01±0.03比4.43±0.35，1.02±0.03比3.55±0.28，0.98±0.04比3.24±0.25，1.01±0.03比3.22±0.25，0.99±0.02比2.89±0.22，1.02±0.04比2.43±0.19，0.98±0.01比3.13±0.24，0.98±0.02比2.67±0.21，0.97±0.03比2.45±0.19，1.01±0.03比2.44±0.19，1.00±0.04比2.30±0.18，1.03±0.05比2.27±0.18）均升高，差异有统计学意义（P均< 0.05）。Transwell迁移实验和伤口愈合实验显示，低氧条件下，DAPT干预使HUVEC的迁移能力降低，JAG-1干预使HUVEC的迁移能力升高（P均< 0.05）。小管形成和MTT法测定显示，低氧条件下，DAPT干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力降低，JAG-1干预使HUVEC的小管形成能力和细胞增殖能力升高（P均< 0.05）。析因设计的方差分析结果显示，低氧和JAG-1对迁移细胞数、小管形成和细胞增殖能力交互作用具有协同作用（P < 0.05）。结论低氧可通过激活HIF-1α/VEGF/Notch1信号通路提高HUVEC的血管生成能力、迁移能力和细胞增殖能力。

简介：目的探讨Notch信号通路在人牙髓细胞（dentalpulpcells,DPCs）和牙周韧带细胞（periodontalligamentcells,PDLCs）向成牙本质/成骨样细胞分化及组织损伤修复中的调控作用。方法酶消化法分离培养DPCs和PDLCs,实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Notch信号通路相关基因Notch1、Notch2、DLL1和DLL3mRNA在DPCs和PDLCs矿化诱导过程中表达水平变化;建立大鼠牙髓和牙周联合损伤动物模型,观察4周后牙髓牙本质复合体及牙周附着装置修复情况,免疫组织荧光染色检测Notch1在牙髓和牙周联合损伤修复动物体内模型的表达和分布。结果DPCs和PDLCs经矿化诱导,Notch1、Notch2、DLL1mRNA表达均上调,与对照组间的差异有统计学意义（P〈0.05）;DLL3mRNA表达上调,与对照组间差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫荧光示Notch1蛋白在损伤处的新生牙髓及牙周韧带组织细胞浆强表达,而在正常牙髓及牙周韧带组织基本无表达。结论在DPCs和PDLCs诱导成牙本质/成骨分化的过程中,Notch1、Notch2、DLL1呈现相似的表达变化趋势上调,Notch1信号在牙髓及牙周损伤修复的新生组织明显激活,提示Notch信号通路参与DPCs和PDLCs成牙本质/成骨分化,且在牙髓牙本质复合体和牙周附着装置的损伤修复中起重要的调控作用。

简介：摘要目的研究双氢青蒿素（dihydroartemisinin，DHA）对人胶质瘤细胞增殖和侵袭的作用及对Notch信号通路关键基因和蛋白表达的影响。方法体外培养人胶质瘤U87细胞，加入不同浓度的DHA，采用MTT比色法检测不同浓度DHA对人胶质瘤U87细胞增殖的影响；采用Transwell小室和基质渗透率测定试验检测DHA对人胶质瘤U87细胞迁移和侵袭的影响；采用Real-timePCR和Westernblot检测不同浓度DHA后人胶质瘤U87细胞Notch信号通路关键基因和蛋白表达的变化。结果不同浓度的DHA处理后，人胶质瘤U87细胞的增殖、迁移和侵袭均明显受到抑制（P＜0.01或P＜0.05）；随着DHA浓度的增加，人胶质瘤U87细胞内Notch信号通路关键基因和蛋白的表达逐渐下降（均P＜0.01或P＜0.05）。结论DHA可能通过下调Notch信号通路的表达抑制人胶质瘤U87细胞的增殖、迁移和侵袭。

简介：

简介：摘要目的探究天麻素对脑卒中大鼠神经的保护作用及其机制。方法2020年1月至2021年3月，将体质量为（250±10）g的清洁级健康雄性SD大鼠94只分为假手术组、模型组、天麻素低剂量组（50 mg/kg）、天麻素中剂量组（100 mg/kg）、天麻素高剂量组（150 mg/kg）。对大鼠神经功能进行Longa评分；称量计算大鼠脑含水量；2，3，5三苯基氯化四氮唑（TTC）染色观察大鼠脑梗死情况；取脑组织，苏木素伊红（HE）染色观察海马组织神经元形态；比色法测定半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（cysteinyl aspartate-specific protease，Caspase）-3、Caspase-9活性；实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）检测微小RNA155（microRNA-155，miR-155）表达；蛋白质免疫印迹检测Notch1及其配体Jagged1的表达。符合正态分布的计量资料以（x¯±s）表示，多组间比较行单因素方差分析，进一步两组间比较行SNK-q检验，P<0.05为差异有统计学意义。结果相较于假手术组，模型组大鼠神经功能受损严重，脑含水量、脑梗死率以及Caspase-3、Caspase-9活性显著上升，脑内miR-155表达显著升高，Notch1及其配体Jagged1、下游靶基因Hes1的表达差异无统计学意义（均P>0.05）；相较于模型组，天麻素低、中、高剂量组大鼠神经功能受损程度减轻，脑含水量［（81.52±2.19）%、（80.39±2.24）%、（79.33±2.05）%比（87.44±2.56）%］、脑梗死率［（24.66±2.35）%、（20.87±2.06）%、（15.65±1.54）%比（32.15±3.59）%］以及Caspase-3［（2.48±0.31）、（2.12±0.27）、（1.43±0.21）比（3.27±0.42）］、Caspase-9活性［（2.05±0.25）、（1.76±0.20）、（1.23±0.16）比（2.79±0.36）］显著下降，脑内miR-155表达［（2.15±0.18）、（1.97±0.16）、（1.63±0.15）比（2.64±0.27）］显著下降，Notch1［（0.77±0.13）、（0.84±0.16）、（0.95±0.18）比（0.42±0.09）］、Jagged1［（0.68±0.10）、（0.73±0.15）、（0.87±0.16）比（0.38±0.06）］、Hes1的表达［（0.81±0.12）、（0.93±0.15）、（1.07±0.17）比（0.43±0.07）］显著升高。结论天麻素可下调miR-155的表达，激活Notch通路，从而对脑卒中大鼠神经起到保护作用。

简介：摘要RA关节滑膜炎免疫微环境由多种细胞及细胞因子相互作用形成。近来研究发现Notch信号通路不仅调节细胞发育分化还有炎症驱动作用。Notch受体在RA滑膜细胞中表达并被激活，Notch信号通过调控多种免疫细胞和基质细胞的分化及功能促进RA的进展。本综述将阐述Notch信号通路如何通过促进辅助性T细胞（Th）17/调节性T细胞（Treg）失衡、巨噬细胞极化、滑膜成纤维细胞异常增殖这3个方面调控滑膜炎症免疫微环境促进RA滑膜炎发生的最新进展，为RA的治疗提供一种新思路。

简介：摘要目的评价缺刻基因1(Notch1)/发状分裂相关增强子1(Hes1)信号通路在高糖心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法取H9c2心肌细胞在含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基中培养、传代，采用随机数字表法分为6组(n＝12)：对照组(C组)用低糖培养基孵育72 h；缺氧复氧组(H/R组)用低糖培养基孵育72 h后，置于37 ℃、95%N2-5%CO2培养箱中缺氧24 h，然后立即置于37 ℃、95%O2-5%CO2培养箱中复氧6 h；缺氧复氧+Jagged-1组(H/R+J组)在低糖培养基中加入Notch1/Hes1信号通路特异性激动剂Jagged-1 5 μg/ml孵育72 h，然后进行缺氧复氧处理；高糖组(HG组)用高糖培养基(葡萄糖浓度33 mmol/L)孵育72 h；高糖+缺氧复氧组(HG+H/R组)用高糖培养基孵育72 h，然后进行缺氧复氧处理；高糖+缺氧复氧+Jagged-1组(HG+H/R+J组)用高糖培养基和Jagged-1 5 μg/ml共孵育72 h，然后进行缺氧复氧处理。于复氧6 h时，收集细胞培养液上清，测定SOD和LDH的活性，采用CCK-8法测定细胞活力，采用流式细胞仪测定细胞凋亡率，采用Western blot法检测Notch1、Hes1和c-caspase-3表达水平。结果与C组比较，H/R组、H/R+J组和HG组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高，H/R组和H/R+J组细胞Notch1、Hes1和c-caspase-3表达上调，HG组细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调(P<0.05)；与H/R组比较，H/R+J组细胞活力和SOD活性升高，细胞凋亡率和LDH活性降低，细胞Notch1和Hes1表达上调，c-caspase-3表达下调，HG+H/R组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高，细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调(P<0.05)；与HG组比较，HG+H/R组和HG+H/R+J组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高(P<0.05)，HG+H/R组细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调(P<0.05)；与HG+H/R组比较，HG+H/R+J组细胞活力和SOD活性升高，细胞凋亡率和LDH活性降低，细胞Notch1和Hes1表达上调，c-caspase-3表达下调(P<0.05)；与H/R+J组比较，HG+H/R+J组细胞活力和SOD活性降低，细胞凋亡率和LDH活性升高，细胞Notch1和Hes1表达下调，c-caspase-3表达上调(P<0.05)。结论Notch1/Hes1信号通路激活是高糖心肌细胞缺氧复氧损伤的内源性保护机制。

简介：摘要目的探讨骨髓间充质干细胞外泌体(BMSC-Exo)通过调控Notch信号通路促进移植脂肪血管化的机制。方法获取1例2020年8月在空军军医大学第一附属医院整形外科行腹部脂肪抽吸术的30岁健康女性的废弃脂肪，处理后将脂肪颗粒分别移植于12只Balb/c裸鼠背部皮下左、右两侧，每侧注射0.5 ml，建立脂肪移植模型。左侧设为外泌体组，每周以50 μg的BMSC-Exo溶于100 μl PBS溶液中，移植后即刻在脂肪周围多点局部注射，然后每周注射1次，连续4次；右侧设为对照组，于同一时间注射同等剂量的PBS溶液。观测项目：(1)分别在术后4、8周获取2组脂肪移植物组织，用电子天平称其湿重并计算保留率。(2)术后8周，通过HE染色、免疫荧光检测脂肪移植物中脂滴包被蛋白A(Perilipin A)阳性细胞，观察2组脂肪细胞的结构和完整性；(3)术后8周，免疫组织化学法检测脂肪移植物中CD31阳性细胞、计算微血管密度，检测Notch1、Notch4阳性细胞、计算阳性细胞面积比例；(4)术后8周，实时荧光定量PCR检测脂肪移植物中Notch1、Notch4、VEGF mRNA相对表达量。应用Graphad Prism 8.0分析数据，组间比较采用t检验，P<0.05表示差异有统计学意义。结果(1)术后4、8周，对照组脂肪湿重保留率分别为(41.15±9.68)%和(34.30±6.45)%，外泌体组分别为(61.77±10.98)%和(55.93±5.89)%，均高于对照组(P<0.05)。(2)术后8周，外泌体组较对照组中脂肪细胞结构完整性更好，具有较多的新生毛细血管；外泌体组中有较多的完整Perilipin A阳性脂肪细胞，而对照组中则较少。(3)对照组微血管密度为(4.67±0.57)个，显著小于外泌体组的(13.00±2.00)个(P<0.05)；对照组每视野下Notch1和Notch4阳性细胞面积比例均低于外泌体组[(0.53±0.28)% vs.(1.67±0.11)%，(0.11±0.06)% vs.(1.20±0.24)%，P<0.05]；(4)外泌体组Notch1、Notch4、VEGF mRNA相对表达量分别为1.53±0.20、1.50±0.26、2.56±0.55，均比对照组(1.00+0.00)明显上调(P<0.05)。结论BMSC-Exo可能通过上调VEGF mRNA的表达水平激活Notch信号通路，从而促进移植脂肪血管新生，提高移植脂肪保留率。

简介：摘要目的探讨重症急性胰腺炎(sever acute pancreatitis，SAP)并发急性肺损伤中Notch/Hes1信号转导通路的活性以及下游白细胞介素(interleukin，IL)-6，肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)的变化规律。方法选取健康成年雄性大鼠40只，随机分对照组(10只)和研究组(30只)，通过鼻胆管(biliary drainage, BD)针胰胆管逆行注入牛磺胆酸，建立SAP急性肺损伤大鼠模型。研究组在建模后6、12、18 h采用HITACHI 7600型全自动生化分析仪进行操作检测血淀粉酶、血气分析以及肺组织含水率，显微镜下进行胰腺和肺组织病变程度评分。免疫组化法检测肺组织Notch/hes1活性的变化，酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒检测血清中IL-6, TNF-α的含量。对照组在术后也进行上述相关指标的检测。结果造模后的研究组大鼠肺损伤程度较对照组逐渐加重，组织含水量及PaCO2逐渐升高(F值分别为100.614和29.843，P值均<0.05)。免疫组织化学检测结果提示Notch/Hes1信号转导通路在肺损伤发展的过程中逐步被激活，至18 h达到峰值。在建模6 h以及18 h后，Notch/Hes1信号转导通路下游细胞因子IL-6、以及TNF-α血清中的含量较对照组显著升高，且在18 h达到最高值[6 h(IL-6，TNF-α)：(1125.43±247.45)pg/L比(731.32±125.43)pg/L，(213.45±65.36)pg/L比(125.76±27.68)pg/L；18 h(IL-6，TNF-α)：(2147.56±326.54)pg/L比(731.32±125.43)pg/L，(324.47±88.67)pg/L比(125.76±27.68)pg/L]，研究组与对照组IL-6、以及TNF-α血清含量的组间差异均具有统计学意义(F值分别为62.790和14.881，P值均<0.05)。Notch/Hes1信号转导通路活性与肺损伤程度呈显著线性正相关(r＝0.681，P<0.05)。结论SAP早期肺组织中Notch/Hes1信号传导通路逐步被激活，导致下游细胞因子IL-6以及TNF-α表达上调，与肺组织中的浸润、急性肺损伤的发生和进展密切相关。

简介：Basedonanincompressiblemodel,byusingthelargestaintheory,thecontactofarubberwedgewitharigidnotchisanalyzedbytheasymptoticmethod.Theproblemistreatedasasymmetriccase,andthecontactsurfaceissmooth.Thestressandstrainfieldneartheapexoftherubberwedgeisshowntobesingular,andtheangulardistributionsofstressandstrainareobtained.Twoimportantparameterstandtareintroducedtoattaintheconclusions.TheresultshowsthatthesingularexponentorderofstressfieldisInr.

简介：摘要目的基于Notch信号通路探讨补肺益肾方（BYF）抑制香烟烟雾提取物（CSE）诱导气道上皮细胞黏液高分泌的机制。方法体外培养人气道上皮细胞株16HBE，取对数生长期细胞用于实验。①干预条件筛选实验：将16HBE细胞分组，分别采用噻唑蓝（MTT）比色法和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测不同浓度CSE（2.5%、5%、10%、20%、40%）、不同浓度BYF含药血清（5%、10%、20%、40%）及不同浓度Notch信号通路阻断剂DAPT（5、10、20、40 μmol/L）对细胞活性与分泌黏蛋白5AC（MUC5AC）水平的影响，并设空白对照组，筛选出制备CSE诱导细胞黏液高分泌模型及BYF、DAPT干预的最佳条件。②干预实验：将16HBE细胞分为4组。空白对照组不给予任何处理；CSE模型组采用10% CSE诱导16HBE细胞24 h制备黏液高分泌模型；CSE+BYF组和CSE+DAPT组在加入10% CSE的同时分别给予10% BYF或20 μmol/L DAPT干预24 h。采用实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测细胞中MUC5AC、Notch3和多毛分裂增强子1（HES1）的mRNA表达；采用蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）检测细胞中Notch3和HES1的蛋白表达。结果①干预条件筛选实验结果：与空白对照组比较，10% CSE诱导24 h是既不影响细胞活性又可增加MUC5AC分泌的制备细胞黏液高分泌模型的最佳条件；而10% BYF和20 μmol/L DAPT为最佳干预条件。②干预实验结果：与空白对照组比较，CSE模型组细胞中MUC5AC、Notch3、HES1的mRNA表达及Notch3、HES1的蛋白表达均显著升高，说明CSE可能通过促进Notch3、HES1信号活化，诱导16HBE细胞分泌黏蛋白；与CSE模型组比较，BYF和DAPT均可显著下调细胞中MUC5AC、Notch3、HES1的mRNA及蛋白表达〔MUC5AC mRNA（2-ΔΔCT）：1.03±0.13、0.96±0.05比1.35±0.07，Notch3 mRNA（2-ΔΔCT）：1.10±0.14、1.10±0.02比1.31±0.15，HES1 mRNA（2-ΔΔCT）：1.26±0.10、1.14±0.15比1.45±0.08，Notch3蛋白（Notch3/GAPDH）：0.10±0.03、0.16±0.03比0.31±0.09，HES1蛋白（HES1/GAPDH）：0.37±0.06、0.34±0.08比0.50±0.05，均P<0.05〕。结论BYF可抑制CSE诱导的16HBE细胞黏液高分泌，其机制与抑制Notch信号通路活化有关。

简介：摘要目的探讨乳腺癌新辅助化疗后骨髓抑制患者外周血miR-211-5p的表达及其通过靶向环氧化酶2（COX2）基因对Notch信号通路的调控机制。方法纳入2018年1月至2021年1月在临沂市人民医院首次就诊并接受新辅助化疗的185例乳腺癌患者作为研究对象。使用定量实时聚合酶联反应测量miR-211-5p、COX2基因和Notch信号通路相关基因（Notch1、Jagged1和Hes1）mRNA的表达水平。分别将miR-211-5p mimic、inhibitor、mimic NC和inhibitor NC转染SD大鼠骨髓间充质干细胞中，48 h后检测miR-10a-3p和COX2基因的mRNA表达量和Notch信号通路相关基因蛋白表达水平。结果严重骨髓抑制患者的miR-211-5p相对表达量为（2.41±0.32），显著高于轻度骨髓抑制患者的miR-211-5p相对表达量（1.53±0.18）（t=6.39，P<0.001）；严重骨髓抑制患者的COX2基因mRNA相对表达量为（3.64±0.74），显著低于轻度骨髓抑制患者的COX2基因mRNA相对表达量（5.37±1.02）（t=7.47，P<0.001）。在严重骨髓抑制患者中，miR-211-5p和COX2基因mRNA水平呈显著负相关关系（r=-0.70，P=0.006）。双荧光素酶报告实验结果证实COX2是miR-211-5p的靶基因。严重骨髓抑制患者外周血Notch信号通路相关基因Notch1、Jagged1、Hes1 mRNA相对表达量分别为（2.35±0.41），（2.76±0.46）和（3.04±0.52），显著低于轻度骨髓抑制患者（4.12±0.63），（4.53±0.58）和（5.12±0.67）（t=5.37、6.11、6.14，P均<0.001）。使用miR-211-5p模拟物和抑制物转染SD大鼠骨髓间充质干细胞后，mimic组的miR-211-5p相对表达量为（3.46±0.49），显著高于mimic NC组（2.24±0.32）、inhibitor组（1.28±0.19）和inhibitor NC组（2.33±0.37）（P<0.001），而inhibitor组的miR-211-5p相对表达量均显著低于其他3组（P<0.001）。mimic组的COX2基因mRNA表达量为（2.73±0.36），显著低于mimic NC组（4.05±0.59）、inhibitor组（6.15±0.86）和inhibitor NC组（4.18±0.65）（P<0.001），而inhibitor组的COX2基因mRNA表达量均显著高于其他3组（P<0.001）。inhibitor组的Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达显著升高，而mimic组的Notch1、Jagged1、Hes1蛋白表达显著降低。结论乳腺癌新辅助化疗后严重骨髓抑制患者外周血miR-211-5p的表达水平显著升高，且通过靶向下调COX2基因表达水平抑制Notch信号通路。

简介：摘要目的探索miRNA-126对甲状腺癌SW579细胞增殖、凋亡及迁移的影响，并进一步探索其机制。方法体外培养甲状腺癌SW579细胞，利用qPCR检测人甲状腺正常Nthy-ori3-1细胞和SW579细胞miRNA-126的表达；将细胞分为空白对照组、实验组及阴性对照组，分别不做任何处理、空质粒载体进行转染、转染miRNA-126表达质粒；通过转染质粒构建miRNA-126过表达的SW579细胞；利用CCK-8实验检测细胞增殖；Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭；流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧水平变化；Western blot检测Notch-1/Akt通路相关蛋白表达，利用SPSS 21.0统计软件通过正态分布和t检验来印证。结果SW579细胞中miRNA-126表达量为（0.25±0.07），与Nthy-ori3-1细胞相比差异具有统计学意义（P<0.001）；空白对照组、实验组及阴性对照组细胞存活率为（105.70±7.61）、（98.60±5.42）及（62.70±3.82）；细胞凋亡率为（9.14±0.83）、（12.28±1.34）及（36.39±3.21）（P均<0.05）；细胞迁移率为（34.51±2.45）、（33.29±3.17）及（11.22±1.23）（P均<0.05）；活性氧水平为（1.02±0.07）、（1.08±0.11）及（6.54±0.74）（P均<0.05）。结论过表达miRNA-126能通过上调细胞内活性氧水平抑制Notch-1/Akt通路，抑制SW579细胞的增殖、迁移、诱导SW579细胞发生凋亡，为miRNA-126在甲状腺癌的研究中提供一定的理论基础。