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  • 简介:[目的]转基因作物的大规模种植,可能会对人类健康和生态环境造成影响。因此,商业化种植之前,评价环境安全性十分必要。[方法]以转基因(RRM2)高产棉为实验品种,受体材料中棉所12为对照品种,分别于2013年和2014年连续2年对2种棉田的苗期蚜虫及其几种主要捕食性天敌的田间种群数量进行系统的田间调查,并比较它们在这2种不同棉田间的差异。[结果]与中12相比,转RRM2基因棉苗期无翅蚜的发生数量显著增加,有翅蚜迁入棉田的数量也有所增加,但二者差异不显著;2个棉花品系间棉蚜的几种主要捕食性天敌发生数量也无明显差异。[结论]与亲本材料相比,转高产棉花苗蚜数量显著增加,但其捕食性天敌数量增加不明显。本研究为转RRM2高产基因棉花环境安全评价技术的完善提供了理论依据。

  • 标签: 转RRM2基因棉 棉蚜 捕食性天敌 种群密度
  • 简介:【背景】米尔顿姬小蜂是一种入侵我国台湾地区的植食性小蜂,能够严重影响水果的产量和食用价值。目前在我国大陆没有分布,由于其个体微小,与近似种区别较小,通过传统的形态学分类方法难以鉴定,因此有必要研究其基因片段序列,探讨分子鉴定方法。【方法】利用PCR方法扩增并测定了米尔顿姬小蜂线粒体16SrRNA和COⅠ基因的部分序列,并对各序列的碱基组成进行了分析。然后根据COⅠ基因部分序列,利用DNAMAN的MaximumLikelihood方法构建了米尔顿姬小蜂与膜翅目其他科的系统发育树。【结果】16SrRNA基因的PCR扩增产物为426bp,COⅠ基因的PCR扩增产物为488bp。通过测序获得米尔顿姬小蜂16SrRNA和COⅠ基因部分序列,序列分析表明,16SrRNA和COⅠ基因的A+T含量均较高,存在较强的A+T偏向性。系统发育树显示,米尔顿姬小蜂与蚜小蜂科的Encarsiaberlesei亲缘关系最近,与姬小蜂科的Chrysocharisnautius、C.eurynota亲缘关系较远。【结论与意义】本研究为米尔顿姬小蜂的分子鉴定提供了依据。

  • 标签: 米尔顿姬小蜂 16S RRNA基因 COⅠ基因 序列分析 分子鉴定
  • 简介:【背景】节肢动物群落是农田生态系统的重要组成部分,转基因作物的种植对节肢动物群落结构及多样性的影响是环境安全评价的重要内容之一。转植酸酶基因玉米是我国首例获得生产应用安全证书的转基因粮食作物。【方法】以转植酸酶基因玉米10TPY005、非转基因亲本玉米蠡玉35和当地常规品种郑单958为试验材料,在大田种植条件下,采用直接观察法定期调查了玉米田间主要节肢动物的种类和发生数量,通过分析比较3个玉米品种田间节肢动物群落、天敌亚群落和害虫亚群落的多样性指数、均匀性指数以及优势集中性指数,研究了转植酸酶基因玉米对田间节肢动物群落多样性的影响。【结果】在各个调查时间,转植酸酶基因玉米10TPY005与亲本玉米蠡玉35相比,各群落指数均不存在显著性差异;随着玉米生育期的延长,各群落指数的变化趋势也基本一致。【结论与意义】转植酸酶基因玉米的短期种植,对田间节肢动物群落多样性没有明显影响。

  • 标签: 转植酸酶基因玉米 节肢动物群落 多样性
  • 简介:丝胶是在Bombyxmori的中间的丝绸腺明确地表示的一种水溶性的蛋白质。当sericin-1基因倡导者被克隆,转基因的向量被构造表示外国蛋白质时,特定的电子螺旋管,Bmhel-8,在Bombyxmori和Bombyxmandarina的一些遗传型在sericin-1基因倡导者顺序被识别。给Bmhel-8电子螺旋管transposon在一些遗传型仅仅是在场的,它能是在sericin-1倡导者的突变而产生之遗传的变化的来源。sericin-1倡导者顺序的长度是约1063或643bp。顺序或等位基因的更大的尺寸被归功于到Bmhel-8的存在。蚕遗传型能为也是同型结合的更矮或更大的倡导者顺序或异质接合,包含两等位基因。在sericin-1倡导者的Bmhel-8展出enhancer活动,在BmE房间线由一个双酶的记者系统示威了。而且,Bmhel-8在sericin-1显示enhancer活动倡导者驱动的基因表达式系统但是不调整sericin-1的织物特定的表达式。

  • 标签: 基因启动子 增强子 活性 家蚕 启动子序列 基因等位变异
  • 简介:提炼俄语的小麦蚜虫(RWA),Diuraphisnoxia(Mordvilko)(Homoptera:Aphididae),是小谷物的一个主要害虫。就象喂植物的蚜虫一般来说,在RWA和主人植物之间的相互作用被管理在昆虫方面上,由在口水的蛋白质和酶。在这个工作,我们在编码RWA唾液的腺的蛋白质和酶的抄本检验了顺序变化。我们在1和2份使用的教材从豌豆蚜虫orthologs导出的RWA遗传因子型进行了反向的抄写聚合酶链反应,并且克隆17个通常认为的唾液的腺抄本的区域。为四个抄本,我们没在在二遗传因子型之间的序列观察差别。为另外的13个抄本,例如编码蔗糖酶,trehalase和蛋白质C002的抄本,在每遗传因子型以内并且在二遗传因子型之间,大量变化被观察。通常,二遗传因子型分享了仅仅一变体,它典型地是在两遗传因子型的最普通的变体。大多数抄本比同义的codon在他们的变体之中变化的有非同义的更多。我们的结果为区分二遗传因子型和卓见进他们的进化提供可能的分子的标记。

  • 标签: 小麦蚜虫 生物型 唾液腺 俄罗斯 成绩 多态性
  • 简介:【目的】为了评估转基因高蛋氨酸大豆ZD91对土壤生态系统的安全性,开展了其对土壤主要有机元素和酶活性影响的实验.【方法】连续2年,在大豆苗期、花期、鼓粒期和成熟期,采用抖落法采集根际土壤样品,通过室内测定,分析了转基因大豆ZD91对根际土壤含水量、pH、主要有机元素和酶活性的影响.【结果】转基因大豆ZD91较之对应的非转基因大豆对根际土壤含水量、pH、主要有机元素和酶活性无显著影响,但同一种酶活在不同年份和不同生育期存在显著差异.【结论】转基因大豆ZD91对土壤生态系统具有安全性.

  • 标签: 转基因高蛋氨酸大豆 ZD91 土壤有机元素 土壤酶活性
  • 简介:【目的】二化螟是水稻的重要害虫之一,钙黏蛋白(cadherin,CAD)是一类重要的Bt杀虫蛋白受体,在获得二化螟钙黏蛋白基因(CsCAD1)的基础上,明确CsCAD1蛋白与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【方法】利用PCR技术克隆CsCAD1基因片段,将构建的pET-28a-(+)-CsCAD1重组质粒转入原核表达菌株BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。目的蛋白经Ni柱亲和纯化后SDS-PAGE电泳检测,利用westernblot和ligandblot技术分析其与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白的结合能力。【结果】重组载体可在表达菌株BL21中表达一个约44ku的蛋白,原核表达载体构建成功。SDS-PAGE显示该蛋白条带单一,且纯度较好。Ni柱亲和层析纯化该目的蛋白后进行Ligandblot分析,结果显示CsCAD1重组蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合。【结论】CsCAD1蛋白可以与Cry1Ac和Cry2Aa蛋白结合,是潜在的Cry蛋白受体,所得结果有助于阐明Cry1Ac和Cry2Aa蛋白对二化螟的作用机制。

  • 标签: 二化螟 钙黏蛋白 原核表达 蛋白结合
  • 简介:【背景】转基因手段已成为改良玉米品种的重要途径之一,具有诸多优点的转基因玉米越来越受到人们的青睐。转基因玉米带来巨大经济和社会效益的同时,其安全风险问题也引发人们广泛关注,因此有必要对转基因玉米进行生物多样性影响评价。【方法】采用直接观察法和陷阱法对种植转EPSPS基因抗除草剂玉米CC-2及其对应的非转基因对照郑58的田间节肢动物进行调查,分析其群落组成、群落结构及主要类群动态。【结果】转基因玉米CC-2无论是喷施除草剂还是不喷施除草剂处理,与其对应的非转基因对照郑58相比,田间节肢动物群落组成、群落结构,以及田间主要节肢动物类群动态均无显著差异。【结论与意义】初步认为转EPSPS基因抗除草剂玉米CC-2对节肢动物多样性无安全风险,为转EPSPS基因抗除草剂玉米的推广提供一定生态安全数据。

  • 标签: 转基因抗除草剂玉米 节肢动物 种群动态 生物多样性
  • 简介:【目的】明确不同生育期调查方法对棉田物种结构和生物多样性的影响,以期选择合适的生育期调查方法开展转基因棉花的安全性研究。【方法】于2016和2017年,选择2个新型转基因棉花(GGK2,N15-5)及其亲本(K312,J14)为材料,使用3种调查方法对棉田节肢动物群落进行调查:(1)在整个生育期每7d调查一次(5月上旬—9月中下旬);(2)主要生育期调查(5月中旬、6月中旬、7月中旬、8月中旬和9月中旬)和(3)6月中旬—8月下旬期间的3个棉铃虫发生高峰期调查。计算出不同调查方法下的棉田节肢动物群落个体总数、物种丰富度、多样性指数、均匀性指数和优势集中性指数。【结果】3种方法对物种个体总数和物种丰富度影响最大,第1种方法数值最大,第3种方法数值最小。2016年,转抗除草剂基因棉田(GGK2)与其亲本(K312)相比,3种调查方法得到的物种个体总数在节肢动物群落和害虫亚群落差异显著,其他指数无差异。此外,2016年与2017年相比,相同棉田中的多样性指数、均匀性指数和优势集中性指数均无明显差异。【结论】不同生育期调查方法仅对物种个体总数和物种丰富度有影响,而对多样性指数、均匀性指数和优势集中性指数无显著影响。因此,在转基因生物安全研究中可根据不同的研究目的选择合适的生育期开展调查。

  • 标签: 转基因棉田 全生育期 关键生育期 棉铃虫 节肢动物群落 生物多样性
  • 简介:在蚕,白鸡蛋1(w-1)异种,被白眼睛和白鸡蛋描绘,在Bombyxkynurenine3-monooxygenase(KMO)是缺乏的活动。Toinvestigatew-1异种显型是否被介绍野类型的KMO基因救,我们在细胞质的肌动朊基因倡导者(A3KMO)或本国的KMO基因倡导者(KKMO)的控制下面与野类型的BombyxKMO基因构造了转基因的蚕。我们与KKMO构造与A3KMO和一根线创造了二根转基因的线。在这些线的成年人的眼睛是棕色的,并且转基因的女性生的鸡蛋也是棕色的。Reversetranscription聚合酶链反应(RT-PCR)分析证明A3KMO蚕线在中间勇气的、胖身体表示了抄本,并且肾小体小管。KKMO线仅仅在胖身体表示了抄本并且肾小体小管。在转基因的线的眼睛和卵色的紧张与KMO表示水平成正比。有趣地,有A3KMO构造的转基因的幼虫有轻褐幼虫的表皮,而是KKMO线不。这些结果显示野类型的KMO基因能作为标记基因被使用视觉上屏蔽转基因的蚕。

  • 标签: 家蚕 白卵突变体 犬尿氨酸3-单氧酶基因 野生型 转基因系 KMO
  • 简介:摘要二乙酰胆碱酯酶(王牌)基因在许多昆虫种类被报导了。在象Helicoverpaassulta和Plutellaxylostellas那样的害虫,ace1基因编码是organophosphorus(OP)和氨基甲酸酯杀虫剂的主要目标的占优势的synaptic酶。杀虫剂选择影响王牌基因进化,这被报导了。驯养的蚕,Bombyx粗腐殖质i,也有二王牌基因。当这没在过去的十年面对杀虫剂选择,我们在蚕学习了王牌基因表情和酶活动。二王牌基因,Bm-ace1和Bm-ace2的表情层次,被量的即时聚合酶链反应估计。Bm-ace2在不同发展阶段或纸巾的所有测试样品比Bm-ace1更高度被表示,建议ace2,而非ace1,在Bombyx粗腐殖质i是乙酰胆碱酯酶(疼痛)的主要类型。这与上述的鳞翅目ons不一致农业害虫,部分由于可以在这些害虫导致ace1基因的高表示的杀虫剂的普遍使用。除在头的高表示以外,Bm-ace1也在丝绸腺高度表示,Bm-ace2充满细菌线,暗示两王牌基因可以有在开发的潜在的non-hydrolytic角色。而且,我们发现二王牌基因和他们的比率(ace2/ace1)的mRNA层次在第一和第三中间形态把白天改变到白天。这质问作为一个酶答案用粗略的摘录估计酶的活动的常规方法,因为它是AChE1和AChE2的混合物。为分开不同疼痛的一个有效、简单的方法为可靠毒物学的分析是必要的。

  • 标签: 乙酰胆碱酯酶 基因 活性 小菜蛾
  • 简介:【背景】多样性比较是评价转基因作物对生物群落影响的标准参数之一。以往用于描述多样性的指数很多,但这些指数各有优缺点,生物学解释不全面。运用现代生物多样性表示方法,能够描述更复杂情况下的多样性关系。本文主要介绍了Rényi多样性指数曲线在生物安全研究中的应用。【方法】Rényi多样性指数曲线与以往常用的一维多样性指数不同,当其等级参数为某些特定值时代表了几个著名的多样性指数,该方法可较为确切地评价复杂的生物群落的多样性。本文在介绍其计算公式后,通过比较河北省2种转Bt基因棉田(孟山都33B和中棉30,均未施农药)以及常规管理(施用农药)和综合治理(IPM,施用农药和释放赤眼蜂相结合)条件下非转基因棉田的蜘蛛群落,证明了该方法的适用性。【结果】Rényi多样性指数曲线分析表明了所有可能的互作类型:1个明确的多样性排序以及2类棉田蜘蛛群落间不同的潜在关系。Rényi指数分析表明,在供试棉田中,中棉30棉田的蜘蛛多样性指数最高,其他3种棉田蜘蛛的多样性高低则难以一概而论。蜘蛛稀有种的多样性以孟山都33B棉田最高,IPM和常规棉田次之;蜘蛛常见种的多样性以IPM棉田最高,常规棉田和孟山都33B棉田次之。【结论与意义】Rényi多样性指数可用于生物群落多样性的综合评价,并可用于评价不同管理措施对生物多样性的影响。该方法弥补了仅用单一数量参数评价多样性的传统方法的缺陷,将不同参数整合成一个具有内在关联的概念框架。

  • 标签: BT棉 可扩展多样性指数 农药效应 生物安全评价 生物多样性比较 Rényi多样性指数
  • 简介:Theinsectcuticleplaysimportantrolesinnumerousphysiologicalfunctionstoprotectthebodyfrominvasionofpathogens,physicalinjuryanddehydration.Inthisreport,weconductedacomprehensivegenome-widesearchforgenesencodingproteinswithperitrophinA-type(ChtBD2)chitin-bindingdomain(CBD)inthesilkworm,Bombyxmori.Oneofthesegenes,whichencodesthecuticleproteinBmCBP1,wasadditionallycloned,anditsexpressionandlocationduringtheprocessofdevelopmentandmoltinginB.moriwereinvestigated.Intotal,46protein-codinggeneswereidentifiedinthesilkwormgenome,includingthoseencoding15cuticleproteinsanalogoustoperitrophinswithoneCBD(CPAP1s),ninecuticleproteinsanalogoustoperitrophinswiththreeCBD(CPAP3s),15peritrophicmembraneproteins(PMPs),fourchitinases,andthreechitindeacetylases,whichcontainedatleastoneChtBD2domain.MicroarrayanalysisindicatedthatCPAP-encodinggeneswerewidelyexpressedinvarioustissues,whereasPMPgeneswerehighlyexpressedinthemidgut.QuantitativepolymerasechainreactionandwesternblottingshowedthatthecuticleproteinBmCBP1washighlyexpressedintheepidermisandhead,particularlyduringmoltingandmetamorphosis.Animmunofluorescencestudyrevealedthatchitinco-localizedwithBmCBP1attheepidermalsurfaceduringmolting.Additionally,BmCBP1wasnotablyup-regulatedby20-hydroxyecdysonetreatment.Theseresultsprovideagenome-levelviewofthechitin-bindingproteininsilkwormandsuggestthatBmCBP1participatesintheformationofthenewcuticleduringmolting.

  • 标签: Bombyx mori CHITIN cuticle protein METAMORPHOSIS
  • 简介:抽象昆虫由被不变的微生物引起的表面分子的识别激活的一个有效天生的免疫系统保护自己免于微生物引起的感染。在水果苍蝇果蝇melanogaster,细菌的存在在主人与抗菌剂肽的表示被联系免疫者能干的纸巾。主人受体检测感染并且中继信号装适当有免疫力的反应。在果蝇像血球的l(2)有Pefabloc的mbn房间感染前处理,一个通常使用的丝氨酸朊酶禁止者,导致了二主要效果:它响应现场克否定的细菌和细菌的表面分子(peptidoglycans污染的粗略的lipopolysaccharide)堵住了抗菌剂肽Diptericin的表示,它导致了词法变化。

  • 标签: 丝氨酸蛋白酶抑制剂 血细胞 诱导 微生物感染 革兰氏阴性菌 表面分子
  • 简介:细胞色素P450基因的新奇完整的长度被孤立在杀虫药剂抵抗(命名CYP6CX1v1)并且易受影响(命名CYP6CX1v2)Bemisiatabaci,作为B遗传因子型被识别,福建,中国(Sj)。CYP6CX1(1940bp包含了1557bp开的读框架)对CYP6成员普通的包括的保存领域在carboxyl附近的helix-K,氧绑定主题AGLDPV和保存顺序PEKFNP的通常认为的曲流绑定顺序ETLR和PERF例如heme有约束力的主题PFGEGPRFCIA,结束。有在R和SB之间的氨基酸残余的四不同代替。tabaci(Thr300翼,Thr354Pro,Arg486His和Ile503Thr),在哪个之中替换Ile503Thr位于底层识别地点区域。CYP6CX1v1的mRNA抄写水平象CYP6CX1v2的一样高是2.38褶层。结果显示了从B遗传因子型B的CYP6CX1。在Sj的tabaci是CYP6成员之一,并且提高了CYP6CX1表示和氨基酸残余的代用品可能在域B涉及抵抗机制。tabaci。

  • 标签: 细胞色素P450基因 识别位点 烟粉虱 杀虫剂 氨基酸残基 抗性
  • 简介:这研究的目的是识别响应有斑纹的茎borer(SSB)(Chilosuppressalis沃克)在第一点喂到第二个幼虫的阶段的米饭基因。用减少性的杂交(SSH)和点污点接近的联合抑制,我们分析了发生在大批出没于未经触动的米饭(OryzasativaL.)的开始的72h期间的导致的防卫基因在有SSB幼虫的鞘纸巾的植物。由定序整个SSH图书馆,39个表示顺序标签在疾病应力,昆虫压力或另外的压力回答包含了被识别由喂的SSB幼虫起来调整。在这些基因,米饭allene氧化物cyclase(AOC),萜烯synthase(TPS)和四朊酶之中,禁止者(PI)基因由喂的SSB幼虫是起来调整的。实时量的反向的抄写聚合酶链反应分析证明四米饭PI基因在6h已经是起来调整的,并且到达了在6h之间的山峰到12h。另外,基因在早有关米饭表明象allene氧化物cyclase(AOC)那样的小径的jasmonate包含的抄写对喂的SSB的防卫反应在为2h由SSB喂的米饭以后被激活。尽管米饭萜烯synthase(TPS)的表示基因,在monoterpenes或diterpenes的生合成包含了,在7h已经是起来调整的,表示的重要增加被推迟直到12h并且在24h到达了它的山峰。现在的学习识别了六SSB反应基因和他们的表示模式,它提供证据和信息在植物理解昆虫压力反应。

  • 标签: 水稻基因 喂养 幼虫 螟虫 条纹 表达谱
  • 简介:Pheromone-bindingproteins(PBPs)arethoughttobindandtransportsexpheromonesontotheolfactoryreceptorsonthedendritemembraneofolfactoryneurons,andthusplayavitalroleinsexpheromoneperception.However,thefunctionofPBPshasrarelybeendemonstratedinvivo.Inthisstudy,twoPBPs(PBP1andPBP3)ofChilosuppressalis,oneofthemostnotoriouspyralidpests,wereinvivofunctionallycharacterizedusinginsectswiththePBPgeneknockedoutbytheCRISPR/Cas9system.First,throughdirectinjectionofPBP-singleguideRNA(sgRNA)/Cas9messengerRNAintonewlylaideggs,ahighrateoftarget-geneediting(checkedwithpolledeggs)wasinducedat24hafterinjection,21.3%forPBPl-sgRNAinjectedeggsand19.5%forPBP3-sgRNAinjectedeggs.Second,byanin-crossingstrategy,insectswithmutantPBP1orPBP3(bothwithaprematurestopcodon)werescreenedandhomozygousmutantswereobtainedintheG3generation.Third,themutantinsectsweremeasuredforelectroantennogram(EAG)responsetofemalesexpheromones.Asaresult,bothPBPmutantmalesdisplayedsignificantreductioninEAGresponse,andthisreductioninPBP1mutantswashigherthanthatinPBP3mutants,indicatingamoreimportantroleofPBP1.Finally,therelativeimportanceoftwoPBPsandthepossibleofftargeteffectinducedbysgRNA-injectionarediscussed.Takentogether,ourstudyprovidesadeeperinsightintothefunctionofandinteractionbetweendifferentPBPgenesinsexpheromoneperceptionofC.suppressalis,aswellasavaluablereferenceinmethodologyforgenefunctionalstudyinothergenesandothermothspecies.

  • 标签: CRISPR/Cas9 system ELECTROANTENNOGRAM PHEROMONE binding protein
  • 简介:【背景】转基因棉花在商业化种植之前,必须评价其环境安全性。其中新型棉花材料的生存竞争能力和对物种丰富度的影响是评价的重要内容。【方法】以转Cry1Ac+Cry2Ab基因棉为试验材料,转Cry1Ac棉花中棉所41和非转基因棉花中棉所49为对照品种,分别于2014年5~9月对棉花株高、主茎叶片数、叶绿素含量、比叶面积、果枝数、蕾铃数等生长参数进行比较,同时对二代、三代和四代棉铃虫发生期棉田物种丰富度进行系统调查。【结果】转Cry1Ac+Cry2Ab棉花的生长势与转Cry1Ac棉花和非转基因棉花基本相当,没有表现出明显的竞争优势;产量构成参数在成铃和脱落等方面比非转基因棉表现出良好的优势。对棉田节肢动物物种丰富度的影响表明,转Cry1Ac+Cry2Ab棉花对靶标害虫棉铃虫具有良好的控制效果,对主要刺吸性害虫棉蚜、棉蓟马、烟粉虱、绿盲蝽与天敌龟纹瓢虫、草间小黑蛛、草蛉和小花蝽等的种群丰富度在个别时期有所影响,但总体上与转Cry1Ac棉田和非转基因棉田没有显著性差异。【结论与意义】转Cry1Ac+Cry2Ab棉花无竞争优势,但目标性状优势较好;对棉田节肢动物物种丰富度无明显影响。研究结果为新型转Cry1Ac+Cry2Ab棉花对棉田环境安全方面的研究进一步补充了内容,为转基因棉花的环境安全评价提供科学数据。

  • 标签: 转Cry1Ac+Cry2Ab棉花 生长势 节肢动物 物种丰富度