简介:组织学特殊染色技术及免疫组织化学技术已广泛应用于基础医学和临床医学的科研工作中.本快速染色法即用组织学醛品红染色法和免疫组织化学SP法在同一张切片上对胰岛B细胞和A细胞进行了双重染色,取得较好的效果,现作简单介绍.取大鼠胰腺,Bouin液固定,石蜡包埋,切5μm厚切片.双染步骤如下:第一步,胰岛B细胞的醛品红染色:切片脱蜡到水;入0.25%浓硫酸和0.25%高锰酸钾等量混和液中3min;蒸馏水洗后入5%草酸2min;蒸馏水洗;再经70%酒精后入醛品红染液15min;70%酒精分色后,蒸馏水洗.第二步,胰岛A细胞的免疫组化染色:将经醛品红染色后的切片,入3%甲醇双氧水室温孵育15min;蒸馏水洗后枸橼酸缓冲液(0.01M,pH6.0)(电炉加热煮沸92℃~98℃)进行抗原修复10min;PBS浸泡5min后,用正常羊血清室温封闭30min;弃去多余羊血清,滴加一抗(抗胰高血糖素抗体,1∶1500),37℃,孵育2hr;PBS室温洗10min后,滴加生物素标记的二抗,37℃,孵育40min;PBS室温洗10min后,滴加辣根酶标记的链霉卵白素工作液,37℃,孵育40min;PBS室温洗10min,DAB显色.结果及讨论:此染色方法在同一张切片上所观察到的胰岛B细胞呈蓝紫色,而胰岛A细胞呈棕黄色,两者颜色对比清晰.细胞核不着色.本方法可在一个工作日内完成,即提高了工作效率,又减少了免疫组织化学多重染色中步骤多、时间长,易受外界因素影响的限制,进而降低了非特异性染色.因此,该方法在科研工作中具有一定的应用价值.
简介:摘要目的探讨输尿管内留置双J管的临床应用效果。方法回顾性分析522例侧上尿路疾病使用输尿管支架,留置时间2~24周,平均4.5周;观察置管过程中及留置双J管期间,出现输尿管反流、膀胱刺激征、血尿、拔管困难、双J管滑脱、漏尿及感染、异物排斥反应等;置管后腹部平片或B超复查522例侧双J管位置正常,对比留置管前后肾功能值、肾输尿管积水以及肾输尿管切口漏尿情况。结果双J管具有到良好的内引流尿液及支撑扩张输尿管的作用,67例留置双J管期间出现输尿管反流性腰痛、尿痛、膀胱刺激征和血尿,对症抗炎治疗后消失,4例开放性手术患者出现切口漏尿,3~5天后自行停止;所有置管患者顺利拔管,复查肾功能得到改善,肾积水减轻。未出现双J管上缩堵塞输尿管及双J管滑脱进入膀胱。结论所有肾输尿管手术均应放置双J管,输尿管留置双J管操作简便、引流效果好、并发症较少,能有效防止术后肾输尿管漏尿、输尿管狭窄,缩短患者住院时间、降低医疗费用。