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24 个结果
  • 简介:目的构建细胞外基质蛋白1基因(ECM1)的真核表达载体ECM1-pEGFP-N2,检测其在人乳腺癌细胞系MCF-7中表达。方法采用PCR方法,以ECMleDNA为模板,扩增出ECM1基因,用Bg1Ⅱ和KpnⅠ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体,连接酶切目的片段,转化大肠杆菌DH5,筛选阳性克隆酶切、测序鉴定;利用脂质体介导的转染技术转染MCF-7细胞,荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP,免疫组化检测ECM1蛋白表达。结果利用PCR克隆出约1.6kb的ECM1基因;PCR鉴定、酶切鉴定及测序结果证实成功构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体;转染MCF-7细胞后,可在细胞内观察到报告基因产生的绿色荧光,用免疫组化方法可检测到ECM1蛋白。结论成功构建了ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,并在MCF-7细胞中表达,为进一步研究ECM1的功能奠定了基础。

  • 标签: 细胞外基质蛋白1 绿色荧光蛋白 真核表达载体
  • 简介:目的:构建miR-15a-5p和miR-16-5p的荧光素酶报告载体,利用此载体分析并验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因3'-UTR区域的确切结合位点,探讨miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的相互作用关系。方法:通过Pubmed和miRBase数据库分别寻找到CCND1基因3'-UTR区域碱基序列和miR-15a-5p、miR-16-5p的碱基序列。找出理论结合位点后,构建荧光素酶报告载体,并用荧光素酶报告基因方法验证miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因之间的作用关系。结果:通过基因测序表明,本实验成功构建了CCND1a/Ma和CCND1b/Mb荧光素酶报告基因表达载体。将上述载体应用于荧光素酶报告基因实验,结果发现CCND1b组的荧光素酶表达强度显著降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:miR-15a-5p和miR-16-5p与CCND1基因的3'-UTR区域存在结合位点,其具体结合位置在CCND1b区。这在理论上意味着miR-15a-5p和miR-16-5p可以抑制CCND1基因的表达。

  • 标签: CCND1 miR-15a-5p miR-16-5p 荧光素酶报告基因
  • 简介:半月板损伤是关节外科中最常见的损伤之一,对于半月板损伤最佳的治疗方法应该是用正常半月板去替代已损伤的组织。近年来,纤维软骨的修复重建尤其是半月板的组织工程学修复成为了研究重点。在组织工程技术中,有许多基本的生物学因素需要解决,主要包括细胞来源、支架材料、生物反应器的设计和培养环境等。支架材料是半月板组织修复再生中最主要的因素之一。

  • 标签: 半月板损伤 组织工程学 支架材料 组织工程技术 修复重建 正常半月板
  • 简介:为了适应及促进我国康复事业的发展,由上海交通大学和国家康复辅具研究中心主办,上海交通大学康复工程研究所承办的第三届国际康复医学工程会议(InternationalConferenceofRehabilitationMedicalEngineering1将于2014年5月24-26日在上海世博展览馆举办。大会名誉主席由戴魁戎院士和国际著名康复医学专家ZevRymer医师担任。会议期待建立一个全国性产学研医用管的综合性技术交流平台,力求开成一个具有国际影响力的高水平、综合性康复医学工程会议。

  • 标签: 康复医学工程 会议 国际 征文通知 上海交通大学 康复事业