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  • 简介:目的初步研究巴尔通体在恒河猴体内存在情况,并分析其柠檬酸合成酶(gltA)基因序列,判断巴尔通体种属。方法16只来自福建恒河猴,用血琼脂培养基分离可能存在巴尔通体。根据NCBI数据库上巴尔通体gltA基因序列,设计一对引物,以巴尔通体菌落为模板进行扩增,将获得序列进行克隆测序。结果从3只恒河猴体内成功分离到了巴尔通体病原,并获得了巴尔通体gltA全长基因序列,测序结果表明该序列与五日热巴尔通体同源性99%。结论福建来源恒河猴种群携带巴尔通体病原,巴尔通体流行地区可能存在鼠与灵长类动物之间病原体流行和传播。

  • 标签: 五日热巴尔通体 柠檬酸合成酶 恒河猴 序列分析
  • 简介:目的通过暂时阻断妊娠期大鼠子宫血供方法建立子宫缺血引起胎儿生长受限动物模型。方法根据大鼠子宫动脉是卵巢动脉一个分支解剖特点,于孕鼠妊娠第15天时施行手术暂时阻断卵巢动脉并于第21天行剖宫产术,术后称量新生胎仔体重及胎盘、脑、心、肝、肺、肾等重要脏器重量,对比各组间新生胎仔预后不同,并对照研究阻断血供10、20、30及40min对胎仔不同影响。结果妊娠晚期阻断孕鼠卵巢动脉20min可成功构建胎儿生长受限模型,这种方法与阻断动脉血流30或40min相比,手术时间短,技术要求不高,胎仔死亡率与对照组差异无显著性(P〉0.05)。各实验组较对照组新生胎仔体重及胎盘、各重要脏器重量均明显降低(P〈0.05)。结论通过阻断卵巢动脉从而阻断子宫动脉血流,成功建立缺血缺氧性FGR孕鼠模型。该模型重复性好,操作简便,并可成功设立同体对照,为进行FGR相关产科理论研究提供了一个有利技术平台。

  • 标签: 胎儿生长受限 大鼠 Sprague-Dawley 模型 动物 胎盘功能试验
  • 简介:目的本实验通过对小鼠卵巢组织进行冻存研究,掌握卵巢低温生物学特性,摸索出一种简便有效组织器官冻存法,为卵巢移植及器官冷冻提供有用技术方法。方法通过对小鼠卵巢组织进行慢速程序法与快速液氮蒸汽法冻存,比较分析了不同方法所需保护剂种类、浓度、渗透平衡时间。采用对解冻后卵巢组织超微结构观察、组织化学染色、微素测定及自体、异体移植后动情期恢复作为评价指标。结果与结论通过上述实验表明用同种冷冻保护剂,液氮蒸汽法冻存卵巢组织超微结构保存良好,组织化学染色示其活性与程序法冻存组织相同,自体、异体移植后,小鼠动情周期恢复率及血清雌二醇水平各项指标均与慢速程序法冷冻无显著性差异。

  • 标签: 小鼠 卵巢组织 超速冻存法 液氮蒸汽法 程序法
  • 简介:目的了解和掌握引入西藏高原家兔生理生化指标,以便为实践教学、临床诊疗和科学研究提供参数。方法采用朗道全自动生化分析仪对引入西藏高原20年加利福尼亚兔(Californianrabbit)和中国白兔(Chinesewhiterabbit)12项血清生化指标进行了测定。结果加利福尼亚兔在品种内比较发现TP、ALB、A/G、CRE、CHOL、LDH指标表现极强雄兔特征(P〈0.01),而ALT、GLU测定值雌兔明显高于雄兔(P〈0.05);中国白兔在品种内比较发现CRE、LDH指标显示差异有显著性(P〈0.01),CRE指标是雄兔高于雌兔,LDH参数是雌兔高于雄兔。加利福尼亚雄兔与中国白雄兔参数比较中发现AST、TP、ALB、GLO、A/G、GLU、CRE、LDH指标显示差异有显著性(P〈0.01),而TG、BUN指标显示差异有显著性(P〈0.05);加尼福利亚母兔与中国白母兔参数比较中发现ALT、GLO、CRE、TG指标显示差异有显著性(P〈0.05),AST、TP、BUN、LDH指标显示差异有显著性(P〈0.01)。结论实验结果将为西藏高原教学、临床诊疗和科学研究提供生理数据参考。

  • 标签: 加利福尼亚兔 中国白兔 生化指标
  • 简介:目的为建立SHIV艾滋病动物模型提供毒力较强病毒株,将新合成SHIV-XJ02170病毒适应猴体,并增强其毒力.方法实验前采集猴血清并进行血清学检查和PCR检测.选出13只无SIV,STLV-1,SRV/D和B病毒感染猴.第一批实验,将SHIV前病毒DNA质粒经肌肉注射到猴体内,每只500μg;SHIV病毒液,经静脉注射到猴体内,每只2ml.病毒质粒和病毒液各接种2只猴.当第一批猴体检出病毒后,10ml感染猴全血,抗凝后静脉注射到第二批猴体内,当第二批猴检出病毒后再将10ml感染猴全血静脉注射到第三批猴体内,连续传代4次.每批实验均定期采集血液标本,分别用肝素和EDTA抗凝,进行病毒分离;病毒基因PCR检测;CD4,CD8测定;病毒抗体检测.结果SHIV-XJ02170病毒和SHIV-XJ02170前病毒DNA质粒在猴体内传代中均能分离出病毒;从传代猴血浆和外周血单核细胞(PBMC)中检出了病毒DNA和RNA基因;CD4,CD8测定结果显示有暂时性倒置现象,后变为正常倒置与正常交替出现;在传代猴血清中检测出特异性HIV病毒抗体.结论SHIV-XJ02170病毒与SHIV-XJ02170前病毒DNA质粒,均能在恒河猴体内复制.

  • 标签: 体内 复制 病毒DNA 外周血单核细胞 PCR检测 静脉注射
  • 简介:目的:比较不同移植部位对睾丸移植效果影响,以探索建立疾病模型小鼠安全保存新方法。方法按移植部位不同分为3组:背部皮下组,睾丸白膜内组和肾包膜下组。移植后处死受体鼠回收移植物。测试和分析受体精囊重量,移植物存活率,回收物增重倍数和生殖细胞分化情况。结果不同实验组移植睾丸生殖细胞分化差异显著。睾丸白膜内组分化情况最好与假移植对照组相似;背部皮下移植组睾丸分化率为29.2%;肾包膜下组未见分化。结论睾丸白膜内移植最利于精子发生;背部皮下移植是睾丸移植次优选择;肾包膜下睾丸移植不适合用于小鼠雄性生殖器官安全保存。

  • 标签: 小鼠 睾丸移植 移植部位 生殖细胞分化
  • 简介:目的:通过显微外科技术建立小鼠原位肺移植模型,为肺移植研究提供动物模型。方法采用C57BL/6小鼠作为供、受体,行同基因小鼠原位左肺移植,使用Cuff套管法进行气管及血管吻合。术后7、14、21、28d取移植肺及原肺,行HE染色,评价肺移植后效果。结果学习曲线后,共30例小鼠移植,手术成功率89%,小鼠成活率100%。供体手术时间:(35.2±9.81)min,受体手术时间:(24.6±7.42)min,冷缺血时间是:(46.6±8.92)min,热缺血时间是:(17.2±3.08)min。同基因移植物大体及病理无明显改变,病理显示与原肺无差别。结论本技术能够方便快捷建立小鼠肺移植模型,成功率高,可重复性强,符合原位肺移植临床生理,是研究肺移植发病机制和治疗良好动物模型。

  • 标签: 原位肺移植 动物模型 小鼠
  • 简介:采用人工感染法,对严重联音免疫缺陷小鼠(scid小鼠)进行夜现周期性斑氏丝虫实验感染研究。结果表明,斑氏丝虫经人工感染后能在Scid小鼠体内发育成熟并产生微丝蚴,且虫体回收率较高为6-30%,平均14.8%:感染10只小鼠均在外周血中检获出微丝蚴,及解剖收集到成虫,感染成功率高达100%。作者认为Seid小鼠由于T、B淋巴细胞功能缺如,不能产生相应抗丝虫感染抗体,是一种感染成功、潜伏期短、微丝蚴密度及成虫回收率高较理想实验动物。

  • 标签: SCID小鼠 微丝蚴 丝虫感染 鼠模型 体内发育 免疫缺陷小鼠
  • 简介:随着对小型猪研究不断深入,其作为人类疾病模型优势越来越明显,在生物医学研究中应用数量也越来越多。但是,小型猪在我国应用时间不长,实验操作上有一定难度,影响了小型猪应用推广。解放军总医院医学实验动物中心在国家"十五"科技攻关项目的支持下建设了小型猪实验应用基本条件,探索形成了一套实用小型猪基本实验操作技术。于2008年5月15日至17日在北京与中国实验动物学会联合举办了-小型猪在医学研究中应用培训班,来自全国从事实验动物学、临床医学、基础医学、畜牧兽医等相关专业工作50余人参加了培训。本次培训目的旨在普及推广小型猪在医学研究中应用,发挥我国小型猪品种资源优势,促进交流和合作,推动原创性研究。会议内容涉及我国小型猪应用进展、小型猪在毒理学研究、口腔医学研究异种移植、人类疾病小型猪模型及小型猪实验操作等方面。应广大读者要求,征得作者同意,本刊陆续刊出,以飨读者。

  • 标签: 生物医学 小型猪 应用 实验动物中心 实验操作 科技攻关项目
  • 简介:目的建立高脂饮食诱导果蝇心衰模型。方法选择野生型果蝇w1118果蝇作为实验对象,采用含不同浓度椰油(0%,7.5%,15%,30%)食物喂食果蝇5d,检测果蝇体内三酰甘油含量。后续实验以非高脂喂食组(0%椰油)作为对照,30%椰油高脂喂食组作为实验组。负向趋地性实验检测果蝇运动能力。果蝇成体心脏功能分析平台,拍摄果蝇在半解剖条件下心脏跳动情况(30s),软件分析获得成体心脏功能指标,包括心跳周期,收缩和舒张直径,心脏收缩力指数等。实时定量PCR检测高脂喂食果蝇心脏RNA表达变化。结果与非高脂喂食果蝇相比,不同比例高脂喂食果蝇三酰甘油含量随椰油浓度呈剂量递增(P<0.05);高脂饮食显著影响果蝇活动力(P<0.001);高脂喂食果蝇心跳周期缩短(P<0.01),心脏收缩力减弱(P<0.001);实时定量PCR发现高脂喂食果蝇中,参与脂代谢相关一些基因fa2h,CG6277,CG3699,CG9914,lip2表达明显下调(P<0.05)。结论高脂饮食严重影响果蝇运动能力和成体心脏功能,成功建立了高脂饮食诱导果蝇心衰模型。

  • 标签: 果蝇 心衰 高脂饮食 代谢 三酰甘油
  • 简介:目的观察体重增减影响血糖水平变化规律特点。方法8周龄雄性C57BL/6小鼠高热量饲料(脂肪热量占60%)喂养8周呈肥胖模型,随机分入体重干预组(interventiongroup,IT)和肥胖组(obesitygroup,OB),肥胖组维持高热量饲料至终点。正常对照组(controlgroup,CON)喂食普通饲料。限制热量摄入使IT组体重先减至CON组水平(P>0.05),后恢复高热量饲料再次诱导体重反弹至OB组水平(P>0.05)时终止。采用腹腔注射葡萄糖耐量试验反映葡萄糖代谢水平,胰岛素耐受试验评价胰岛素敏感性。胰腺病理HE染色观察胰岛形态学改变。结果IT组体重反弹时体重增速是干预前2.27倍,空腹血糖则高达5.13倍。与OB组相比,实验终点葡萄糖耐量试验血糖曲线下面积显著增加(P<0.05),胰岛素敏感性显著下降(P<0.05),内脏脂肪增加(P<0.05),胰岛面积显著减小(P<0.05)。结论体重波动导致内脏脂肪量增加、胰岛素敏感性降低和葡萄糖耐量受损。

  • 标签: 肥胖 减重 血糖 胰岛素敏感性
  • 简介:复制结核分枝杆菌(MTB)感染动物模型是进行结核病研究基础。本文分别对小鼠、豚鼠、兔和非人灵长类结核(TB)模型特点及其应用进行综述,由于潜伏性感染是结核病重要特征,因此慢性持续性感染模型是TB动物模型研究重点。Animalmodelisessentialfortuberculosis(TB)research.Thereportedanimalmodelsincludingmice,guineapig,rabbitsandnonhumanprimatemodelwerereviewedinthiscuurentpaper.MTBcanpersistwithinthehumanhostforyearswith-outcausingdisease,inasyndromeknownaslatentTB,soMTBchronicpersistenceinfectionanimalmodel(Cornellmodel)shouldbepayattentionto.结核分枝杆菌感染动物模型@师长宏$第四军医大学实验动物中心@...

  • 标签: 分枝杆菌感染 感染动物模型 结核分枝杆菌
  • 简介:目的比较不同免疫状态小鼠对禽流感病毒易感性,并探讨可能原因。方法四种免疫状态小鼠,无菌BALB/c小鼠,SPF级BALB/c小鼠,SCID小鼠和nude小鼠,以10TCID50禽流感病毒50μL感染小鼠,观察小鼠体重变化,存活率,各组织脏器病毒分布,肺组织细胞因子变化和肺组织病理病变。结果四种小鼠均能感染禽流感病毒,其中,无菌小鼠对禽流感病毒H5N1易感性最低,存活率最高。并且病毒在无菌鼠体内病毒复制水平最低,细胞因子TNF-α,IL-12,MIP2,GATA3,IFN-a/β在感染后表达水平最低,其中第7天最低。结论无菌小鼠能感染禽流感病毒,但是相比较SPF级BALB/c小鼠,SCID小鼠和nude小鼠,其易感性最低,可能与病毒在组织内低复制和细胞因子低表达均有关。

  • 标签: 禽流感病毒H5N1 易感性 病毒复制 细胞因子 小鼠品系
  • 简介:21只泌乳母兔根据其产仔数分为5个小组.进行一个月饲养试验.试验结果表明.泌乳期间母兔体重变化与产仔数关系各组差异不显著(P>0.05).与仔兔增重呈正相关(r=0.898)。母兔产仔后20日龄体重降到最低点.以后母兔体重开始逐渐恢复,而窝产仔数与个体初生重呈负相关(r=-0.849)。

  • 标签: 母兔 饲养试验 产仔后 窝产仔数 初生重 增重
  • 简介:目的比较实验大鼠泰泽菌检测方法─nested-PCR、IFA、免疫抑制诱发试验-触片染色镜检和组织病理学诊断.方法根据泰泽菌16SrDNA合成引物,对16个菌株作nested-PCR扩增并进行特异性、敏感性试验、验证.将此PCR应用于20只免疫抑制Wistar大鼠和5只非免疫抑制SD大鼠泰泽菌检测,并作IFA、常规细菌学检测和组织病理学诊断.结果nested-PCR中仅有泰泽菌出现196bp特异性扩增条带;而15株非泰泽菌均未出现此扩增条带.该PCR能检出10pg泰泽菌DNA.将此PCR应用于大鼠泰泽菌检测,结果未检出阳性样品.nested-PCR与常规细菌学检测、组织病理学诊断结果相一致.采用IFA方法,以购得大鼠泰泽菌抗原片对上述25份大鼠血清进行检测,结果有6份血清产生非特异性反应.结论采用IFA对动物群进行筛查出现阳性结果,须采用免疫抑制诱发试验、PCR和组织病理学诊断技术组合进一步验证.本研究建立nested-PCR方法,特异、敏感、快速,结合组织病理学诊断技术对实验动物泰泽菌感染可做出精确诊断.

  • 标签: 大鼠 泰泽菌 芽孢杆菌 聚合酶链反应 荧光抗体技术 检测方法
  • 简介:目的探索小鼠基因组39个微卫星PCR条件,评价微卫星在小鼠遗传检测中运用.方法采用梯度法探索39个微卫星PCR条件;选择本中心不同来源及引种时间C57BL/6、BALB/c、DBA/2J、CBA/N、FVB/NJ、ICR共6个品系(8个组)小鼠,每组采用10只个体鼠尾,提取DNA并混合成DNA池,用39个微卫星扩增后电泳观察、比较种系纯度.结果小鼠微卫星PCR条件差异较大,Mg2+浓度多数在1.5mmol/L左右,退火温度多数在59℃左右.在6个品系小鼠39个微卫星位点中,C57BL/6、BALB/c、DBA/2J都是纯合;其余品系有1~3个杂合位点.BALB/c在D5Mitl68、D8Mit320、D13Mit262三个位点,DBA/2J在D14Mit205位点与数据库记录有差异.结论本研究为小鼠39个微卫星提供了候选PCR条件,并对6个品系小鼠微卫星概貌及微卫星运用价值进行了探讨.

  • 标签: 小鼠 微卫星 检测 PCR条件
  • 简介:Huntington病(HD)是一种由HD基因中CAG重复扩增导致遗传性神经变性性疾病。谷氨酸盐受体过量刺激所致兴奋毒性细胞损害可能是PD发病原因之一。HD转基因小鼠模型对兴奋毒性表现出不同敏感性。目前已经建立了多种HD动物模型,这些模型有不同遗传背景,不同长度和类型转基因表达启动子,不同长度CAG重复序列和/或HD基因。另外,还有转基因和基因敲除等制作方法区别。所有的这些因素都可能影响到对兴奋毒性敏感性。作者建立了一种HD转基因大鼠模型,并研究了其对兴奋毒性敏感性。该模型转基因片段启动子为HD基因启动子,含22%大鼠HD基因和和51个CAG重复序列。受试动物为3和18个月龄HD转基因大鼠,和野生型同窝鼠。在动物单侧脑纹状体内注入谷氨酸类似物喹啉酸。注射后7天后取脑组织检测病变情况,用Fluoro-Jade染色和免疫组化方法检测神经蛋白NeuN。

  • 标签: 转基因小鼠模型 大鼠模型 敏感性 HD 毒性 兴奋
  • 简介:目的探讨蜂胶乙醇提取物(EEP)安全性。方法用0.5%EEP对家兔进行皮肤急性毒性试验、皮肤刺激试验以及对豚鼠过敏试验。结果EEP低剂量、高剂量皮肤破损组和对照组皮肤破损组各有’只家免,在24h观察到皮肤破损处微红,48h消失,其余各实验兔皮肤、毛发、眼、粘膜、呼吸、中枢神经系统均无任何中毒表现;按照皮肤刺激反应强度,评价标准,完整皮肤组平均分为0,判为无刺激性:破损皮肤组平均分值为033<0.50,亦判为尢刺激性;A组空白对照组和B组EEP组动物均无红斑和水肿反应,判为无致敏性。结论蜂胶提取物EEP在对实验动物体外寄生虫净化中安全、无毒、无刺激。

  • 标签: 皮肤 刺激性 EEP 蜂胶提取物 高剂量 对照组
  • 简介:目的由于原肠期细胞剧烈运动,在斑马鱼胚胎背侧汇聚形成了称为胚盾(shieldorganizer)结构,是胚胎发育信号组织中心,在背腹轴建立和胚层诱导过程中具有关键作用。系统鉴定在胚盾特异表达基因,可为进一步探讨胚盾形成机制及其指导胚胎早期发育分子机理提供参考。方法Tg(gsc:GFP)转基因鱼在胚盾表达特异绿色荧光。通过流式细胞分选技术分离富集GFP阳性细胞并提取总RNA进行RNA深度测序,检测可能在胚盾高水平表达基因。然后利用荧光实时定量PCR(quantitativereal-timePCR,qRT-PCR)和原位杂交技术鉴定若干在胚盾特异表达基因。结果从Tg(gsc:GFP)转基因鱼胚胎中分离富集到了纯度超过96%GFP阳性细胞,RNA深度测序结果显示有657个基因表达水平比整胚细胞或GFP阴性细胞高2倍以上。最后,确认了KIAA1324、ripply1、twist2、isthmin1、nme4、zgc174153、rrbp1b等7个基因在胚盾特异表达。结论系统鉴定到了斑马鱼胚胎胚盾特异表达基因,为下一步研究这些基因发育生物学功能奠定了基础。

  • 标签: 斑马鱼 胚盾 流式细胞分选 RNA深度测序 原位杂交
  • 简介:许多种类动物都被用于结核病研究,每一种动物都有其优缺点,非人灵长类对结核分枝杆菌易感,通过气溶胶途径感染能发展成类似人类疾病,包括肺病变,疾病不同进展过程,以及免疫特征。在体内和体外能表现T淋巴细胞增殖反应,能通过接种BCG疫苗获得保护。因此,非人灵长类感染结核病感染模型在研究结核病感染和免疫,探讨结核病感染过程中,结核菌是怎样摧毁机体免疫系统;在评价肺结核病疫苗有效性方面,是许多常规动物模型所不可替代。然而,目前世界上对于结核病感染非人灵长类动物模型研究报道较少,可利用数据也较少,先进免疫学技术还很少应用于结核病感染非人灵长类动物模型,严重限制了结核病研究进展。因此,利用非人灵长类进行结核病研究,还需要做大量基础工作,特别是在感染免疫学指标的研究方面。Avarietyofanimalshavebeenusedfortuberculosisresearch,andeachanimalmodelhasitsstrengthsandweakness.Primatesarequitesusceptibletoinfectionbyaer...

  • 标签: 中的灵长类 感染模型 灵长类感染