简介:摘要:通过流行病学分析,近20年来我国乳腺癌病人特征呈现年轻化和高发趋势,每年新增乳腺癌患者总数跃居世界第二。长期以来乳腺癌术后微小病灶的残留并导致乳腺癌最终复发的临床问题尚未根除,因而没有一个公认的促进乳腺癌早期发现可行方案,治疗方案尚不明确,疗效无法评估,复发无法控制。循环肿瘤DNA(ctDNA)是微小残留癌细胞死亡后释放的一段小片段DNA,其特点携带了癌细胞所特有的基因突变信息,但是由于ctDNA极其的微量并被掩盖在大量的循环游离DNA(cfDNA)之中,且通常ctDNA与cfDNA极其的相似,甚至只有单个碱基的区别,所以ctDNA一直没有被发现。随着二代测序技术(NGS)的发展与革新,科学家已经能够进行DNA的深度测序。本文旨在通过讨论乳腺癌的基本发病规律以及微小残留病灶的特征,进一步阐述ctDNA的基本性质以及在诊疗乳腺癌的预测,治疗方案的选择,疗效监测与复发风险的评估。重点讨论基因突变在区别正常cfDNA与ctDNA的重大应用。ctDNA已成为一种特征性肿瘤标志物,这意味着可以通过检测ctDNA而发现早期的肿瘤,这对于肿瘤的早期诊断、用药方案的制定和预后观察有着重大意义。
简介:摘要目的结直肠癌组织标本中Numb甲基化状况,p53基因的突变情况,探讨p53突变与Numb/Notch1表达模式的关系。方法分别采用甲基化特异性的聚合酶链反应(MSP)检测Numb基因启动子区甲基化状况、聚合酶链反应(PCR)及DNA测序检测p53基因突变状况,采用固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测Numb在60例切除结直肠癌组织中的表达,分析p53突变状态与Numb表达水平的相关性,研究两者表达模式关系与表观遗传关系。结果60例结直肠癌组织中Numb基因启动子甲基化状况,与正常肠黏膜组织比较,其中25例(41.7%)结直肠癌组织Numb基因启动子呈部分甲基化,但与其mRNA及蛋白表达并无明显相关性(P>0.05)。60例患者中31例存在p53基因突变,突变率为51.7%,外显子(E) 5、6、7、8的突变次数分别为5、6、12、11例次(其中有2例检出E7、E8 2个外显子突变,1例为E5、E8 2个外显子突变),Numb在p53突变组表达水平(0.45±0.13)显著低于非突变组(0.87±0.12,P<0.05)。p53突变与Numb蛋白表达呈线性负相关,相关系数为-0.69,p53突变与Notch1蛋白表达呈线性正相关,相关系数为0.33,而与Delta及Jagged1蛋白表达无明显相关。Numb低表达(39例)预后差于Numb高表达患者(21例),差异有统计学意义(P<0.05)。结论p53突变状态与Numb表达水平密切相关,有助于判断结直肠癌某些生物学行为及预后。
简介:摘要目的对艰难拟梭菌630(Cd630)菌株和致病决定区基因座(PaLoc)敲除突变株(ΔPaLoc)进行转录组测序和分析,获得Cd630野生型菌株和ΔPaLoc基因的差异性表达谱,并测定野生型Cd630菌株和ΔPaLoc突变株的细胞毒力,为构建艰难拟梭菌全菌减毒疫苗奠定基础。方法对Cd630菌株和ΔPaLoc敲除突变株进行转录组测序,接着对差异表达基因进行筛选,随后对差异基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。最后在非洲绿猴肾细胞(Vero)和人克隆结肠腺癌细胞株(Caco-2)中进行Cd630野生型菌株和ΔPaLoc敲除突变菌株的细胞毒性验证实验。结果转录组数据表明ΔPaLoc突变株毒素基因tcdA、tcdB未转录。CD630_36010、 CD630_020910、 CD630_02080和cel等基因分别上调17.92、11.40、8.93和7.55倍;编码高丝氨酸脱氢酶的hom2基因、孢子形成蛋白基因CD630_15810、锌结合脱氢酶基因CD630_23230、1-磷酸半乳糖醇 5-脱氢酶基因CD630_23240分别下调为野生型的0.06、0.075、0.133和0.183倍。GO和KEGG富集分析结果表明,ΔPaLoc突变株差异转录基因主要富集于密度感应系统、ABC运输系统、双组分系统、磷酸转移酶(PTS)系统、糖代谢通路以及万古霉素耐药相关的通路等。细胞毒力实验结果表明野生型Cd630菌株对Vero细胞和Caco-2细胞具有毒力,ΔPaLoc突变株丧失对Vero细胞和Caco-2细胞的毒力。结论通过对Cd630和ΔPaLoc突变株进行转录测序,表明毒素基因未转录,其他差异性基因可为进一步研究ΔPaLoc突变株生理生化特征提供指引。细胞毒力实验表明,ΔPaLoc突变株丧失了对Vero细胞和Caco-2细胞的毒力,ΔPaLoc突变株为艰难拟梭菌全菌减毒疫苗的构建奠定了基础。
简介:AIM:Tocharacterizetemporalpatternofresolutionandrecurrenceofnaivechoroidalneovascularization(CNV)secondarytowetage-relatedmaculardegeneration(AMD)treatedwithintravitrealbevacizumabonasneededregimen,andtoanalyzebaselineriskfactorsforCNVresolutionorrecurrence.METHODS:Ninety-oneeyesof80patientswithnewlydiagnosedwetAMDwereretrospectivelystudied.Alleyesweretreatedwitharoundofthreemonthlyintravitrealbevacizumabinjections,followedbyoneadditional’bonus’injectionafterresolutionofCNVactivity.Duringfollow-up,eyesweremonitoredwithfluoresceinangiography,opticalcoherencetomography,andbest-correctedvisualacuity(BCVA).IncaseofrecurrencesofCNVactivity,eyeswereretreatedwithotherroundsofbevacizumabinjectionsfollowingthesametreatmentprotocol.RESULTS:Overamedianfollow-upof532d,themedianresolutiontimeofCNVactivityinthefirst,second,andthirdtreatmentroundwas98d,126d,and111d,respectively.Themedianrecurrencetimeforthethreeroundswas154d,126d,and151d,respectively.Nosignificantdifferenceinresolutiontime(P=0.09)orinrecurrencetime(P=0.11)wasdetectedamongtreatmentrounds.Age(P=0.0082)andlensstatus(P=0.035)werefoundtobeassociatedwithCNVresolution;forevery1-yearincreaseinagetherewas4%greaterchanceofCNVresolution;Phakiceyesdemonstrateda33%betterchancetoexperienceCNVresolutionthanpseudophakiceyes.ForCNVrecurrence,lensstatus(P=0.0009)andgender(P=0.0446)werefoundtobepredictive;pseudophakiceyeshada3.69-foldgreaterrisktoexperiencerecurrenceofCNVactivitycomparedtophakiceyes;maleshada2.19-foldgreaterrisktoexperiencerecurrenceofCNVactivitythanfemales.NosignificantBCVAchangesamongthreetreatmentroundswerenoted(P=0.56).CONCLUSION:ResolutiontimeandrecurrencetimeofCNVactivitywerenotsignificantlydifferentamongtreatmentrounds,suggestingabsenceoftachyphylaxistobevacizumab.Acautiousdecisionshouldbemadeupondisco
简介:摘要子宫内膜异位症是女性的常见疑难疾病,但对子宫内膜异位症的病因、发病机制的研究至今还未达到十分明晰的地步,近年来国内学者提出“在位内膜决定论”表明不同患者(患子宫内膜异位症患者与未患子宫内膜异位症者)的在位子宫内膜存在差异,这一学说与中医的体质学说相吻合。文章就子宫内膜异位症的在位内膜决定论与中医体质学说的相关性进行综述。
简介:目的报告GFM1突变所致疾病的临床特征及验证基因型和临床表型关系。方法回顾性分析1例门诊就诊的GFM1基因突变儿童的临床及基因突变资料,结合文献归纳GFM1基因突变的临床特点,构建编码线粒体翻译因子G1(mtEFG1)空间结构图,检验GFM1基因错义突变位置与临床表型关系的假说。结果患儿,女,6个月28d。生长发育迟缓,急性肝衰竭。体格检查:反应差,嗜睡,全身皮肤黏膜黄染,腹平软,肝脾肿大。辅助检查:总胆红素、直接胆红素、转氨酶、碱性磷酸酶、血清γ-谷氨酰转肽酶和血氨升高,白蛋白下降,凝血酶原时间延长,血糖下降,酸中毒,血乳酸升高,血浆氨基酸及酰基肉碱谱示血中多种氨基酸升高,尿有机酸检查提示酮尿,头颅MRI示双侧丘脑、大脑脚、基底节区、枕叶前内侧异常信号。GFM1基因的复合杂合突变,第5外显子c.688G〉A点突变致蛋白质改变为p.Gly230Ser;第14外显子c.1686delG的移码突变致蛋白质改变为p.Asp563Thrfs*24。mtEFG1空间结构图显示,p.Gly230Ser处于蛋白周边位置,预测表现应该为脑型。结论1例携带GFM1基因复合杂合突变(c.688G〉A和c.1686delG)的中国儿童,其临床表现为急性肝衰竭,不支持以往GFM1基因错义突变导致蛋白周边位置的氨基酸改变时临床表现为脑型的假设。
简介:摘要:子宫内膜异位症是女性的常见疑难疾病,但对子宫内膜异位症的病因、发病机制的研究至今还未达到十分明晰的地步,近年来国内学者提出“在位内膜决定论”表明不同患者(患子宫内膜异位症患者与未患子宫内膜异位症者)的在位子宫内膜存在差异,这一学说与中医的体质学说相吻合。文章就子宫内膜异位症的在位内膜决定论与中医体质学说的相关性进行综述。
简介:摘要本文报告了1例染色体核型为46,XX,Y染色体性别决定基因(sex-determining region on the Y chromosome,SRY基因)阳性的孕妇及其女性胎儿。孕12周+6时,超声显示胎儿颈项透明层增厚,羊水染色体核型和定量荧光聚合酶链反应检测结果显示胎儿核型为46,XX,SRY基因阳性。但B超显示胎儿社会性别为女性,与46,XX,SRY阳性男性综合征表型不一致。通过荧光原位杂交技术分析结果发现1条X染色体长臂2区8带(Xq28)包含Y染色体短臂1区1带3亚带(Yp11.3)片段。同时,染色体微阵列分析技术检出Yp11.31p11.2的片段重复,长度约1 Mb,证实了胎儿X染色体含有部分Y染色体片段,与孕妇本人一致。经遗传咨询,胎儿父母选择继续妊娠至足月分娩,随访未见异常。
简介:摘要目的探讨护理本科生个人知识管理能力、自我决定动机与高阶思维能力的关系。方法应用一般资料问卷、高阶思维能力量表、自我决定动机量表、个人知识管理能力问卷对中国医科大学护理学院469名护理本科生进行调查。结果护理本科生在高阶思维能力量表的条目均分为(4.42 ± 0.51)分,自我决定动机量表的条目均分为(4.83 ± 0.65)分,个人知识管理能力问卷的条目均分为(3.84 ± 0.55)分;高阶思维能力与自我决定动机、个人知识管理能力呈显著的正相关(r值为0.437、0.499,均P<0.01);年级和是否为学生干部对护理本科生高阶思维能力无显著的预测作用(β值为0.000、0.064,均P>0.05),自我决定动机显著正向预测高阶思维能力(β值为0.270,P<0.01),个人知识管理能力显著正向预测高阶思维能力(β值为0.381,P<0.01);结构方程显示,个人知识管理能力对高阶思维能力的直接效果值为0.41,通过自我决定动机对高阶思维能力的间接效果值为0.16,自我决定动机在护理本科生高阶思维能力与个人知识管理能力间起部分中介作用。结论提高护理本科生的个人知识管理能力和自我决定动机是提升高阶思维能力的有效途径。
简介:摘要子宫内膜异位症是女性的常见疑难疾病,但对子宫内膜异位症的病因、发病机制的研究至今还未达到十分明晰的地步,近年来国内学者提出“在位内膜决定论”表明不同患者(患子宫内膜异位症患者与未患子宫内膜异位症者)的在位子宫内膜存在差异,这一学说与中医的体质学说相吻合。文章就子宫内膜异位症的在位内膜决定论与中医体质学说的相关性进行综述。
简介:摘要目的探讨性别决定区Y框蛋白2(SOX2)和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在正常脑组织和胶质瘤组织中的表达水平及临床意义。方法收集2016年5月至2021年10月大庆油田总医院(齐齐哈尔医学院附属第十医院)病理确诊的13例正常脑组织和70例胶质瘤组织,采用免疫组织化学方法检测SOX2和PDCD4在上述组织中表达,结合相关临床资料行χ2检验相关性分析。结果胶质瘤组织中SOX2阳性表达率75.71%(53/70),明显高于正常脑组织中阳性表达率15.39%(2/13),两者差异有统计学意义(χ2= 17.851,P<0.01)。胶质瘤组织中PDCD4阳性表达率34.29%(24/70),明显低于正常脑组织中阳性表达率76.92%(10/13),两者差异有统计学意义(χ2=8.242,P<0.01)。SOX2和PDCD4表达水平与胶质瘤组织学分级明显相关(χ2=4.953、5.587,P<0.05)。SOX2和PDCD4表达水平与胶质瘤性别、年龄、肿瘤部位无明显相关(χ2=0.026、0.064、0.071、0.021、0.018、0.095,P>0.05)。结论胶质瘤组织中SOX2高表达和PDCD4低表达与胶质瘤的恶性程度和不良预后密切相关,检测SOX2和PDCD4有助于预测可胶质瘤进展及预后。
简介:摘要目的探讨性别决定相关基因簇9(SOX9)对胰腺癌干细胞增殖、侵袭的影响及其与吉西他滨耐药性的关系。方法流式细胞术分选PANC-1细胞(购自中国科学院上海细胞生物学研究所)中以CD24+CD44+ESA+为标志物的细胞亚群,并通过小鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)移植成瘤实验验证胰腺癌干细胞的特性。分选的胰腺癌干细胞分为对照组、shNC组和shSOX9组。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞中SOX9的表达。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力。Transwell细胞侵袭实验检测各组细胞的侵袭能力。CCK-8检测各组细胞对吉西他滨的敏感性。细胞流式术检测各组细胞经吉西他滨处理后的凋亡。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验,率的比较采用χ2检验。结果PANC-1细胞中分选出CD24+CD44+ESA+细胞(占0.8%),其在小鼠皮下移植后的移植瘤体积[(567.35±23.21) mm3]大于接种PANC-1细胞小鼠的皮下移植瘤体积[(106.83±12.43) mm3,t=18.040,P<0.01]。SOX9 mRNA在shSOX9组中的相对表达量(0.42±0.05)低于对照组(1.00±0.03)和shNC组(1.01±0.03,F=77.470,P<0.01);SOX9蛋白表达量在shSOX9组(0.12±0.04)中低于对照组(0.64±0.12)和shNC组(0.62±0.07,F=85.230,P<0.01)。shSOX9组细胞的吸光度值(0.74±0.13)低于对照组(1.38±0.21)和shNC组(1.37±0.23,F=78.320,P<0.01)。shSOX9组侵袭细胞数目[(162.20±16.34)个]低于对照组[(250.50±24.21)个]和shNC组[(253.13±21.78)个,F=21.040,P<0.01]。shSOX9组吉西他滨的半数抑制浓度(IC50)值为(2.78±0.08) mg/L,低于对照组[(5.12±0.13) mg/L]和shNC组[(5.08±0.11) mg/L,F=23.450,P<0.01]。shSOX9组细胞的凋亡率为[(35.93±3.25)%],高于对照组[(20.08±3.14)%]和shNC组[(19.76±2.67)%,χ2=50.130,P<0.01]。结论沉默SOX9可抑制胰腺癌干细胞增殖与侵袭,提高胰腺癌干细胞对吉西他滨的敏感性。
简介:摘要目的探讨微RNA(miR)-214靶向性别决定区Y-box 4(SOX4)对RA滑膜成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法收集2017—2019年商丘市第一人民医院就诊的45例RA患者的滑膜组织样本和30例接受关节置换手术的关节创伤患者的滑膜组织样本,分别作为RA组和对照组。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测滑膜组织中miR-214和SOX4表达水平;ELISA法检测患者血清RF、CRP浓度,采用血沉动态分析仪检测ESR浓度,Pearson相关分析miR-214及SOX4与患者血清RF、CRP、ESR相关性。采用Lipofectamine 3000将人成纤维样滑膜细胞(HFLS)-RA细胞分为对照组、miR-214 mimic组、mimic-NC组、miR-214 mimic+pcDNA3.1-SOX4组。通过CCK8检测各组细胞活力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测相关指标蛋白表达水平。2组比较采用独立样本t检验,多组比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果与对照组(4.6±0.7,1.9±0.7)和HFLS细胞(1.00±0.06,1.00±0.09)比,miR-214在RA患者组织(2.6±0.9)和HFLS-RA(0.30±0.05)中低表达(t=10.026,P<0.05;t=15.815,P<0.05);SOX4在RA患者组织(4.6±0.9)和HFLS-RA(3.89±0.41)中高表达(t=14.772,P<0.05;t=12.020,P<0.05)。RA组患者血清RF、ESR、CRP表达水平[(46±7)U/ml、(46.4±9.6)mm/1 h、(34.8±9.8)mg/ml]较对照组[(16±4)U/ml、(9.2±2.0)mm/1 h、(2.1±0.7)mg/ml]显著升高(t=22.906,P<0.05;t=25.338,P<0.05;t=22.314,P<0.05)。患者血清RF、CRP、ESR与miR-214呈负相关(r=-0.574,P<0.05;r=-0.448,P<0.05;r=-0.549,P<0.05),与SOX4、ESR呈正相关(r=0.492,P<0.05;r=0.369,P<0.05;r=0.325,P<0.05)。转染miR-214 mimic 24 h后细胞活力、Ki-67和p-p65/p65蛋白表达量较对照组和mimic-NC组显著下降(F24 h=16.980、F48 h=42.735、F72 h=164.448、FKi-67=290.112、Fp-p65/p65=223.548,P<0.05),细胞凋亡率和Bax蛋白表达量显著升高(F=344.360,P<0.05;F=106.376,P<0.05)。过表达SOX4可逆转miR-214的作用。结论miR-214靶向SOX4抑制RA滑膜成纤维细胞增殖,并促进凋亡,其机制可能与miR-214抑制NF-κB信号通路有关。