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269 个结果
  • 简介:为建立穿心莲甲基化敏感扩增多态性(methylationsensitivityamplificationpolymorphism,MSAP)反应体系,本研究以穿心莲叶片为材料,提取总基因组DNA,采用L25(55)正交试验对穿心莲MSAP预扩增和选择性扩增相关参数进行了优化,并对MSAP引物进行了筛选,以期建立穿心莲MSAP最佳反应体系。优化后体系具有稳定图谱,清晰丰富条带。运用优化后体系,在穿心莲MSAP80对引物中筛选出8对有效引物。筛选出引物组合特异性良好,能够用于后续穿心莲甲基化相关研究。为其他药用植物MSAP分析提供参考。

  • 标签: 穿心莲 MSAP 预扩增 选择性扩增 引物筛选
  • 简介:农作物大多数性状都是由多基因控制数量性状,对数量性状基因座(quantitativetraitloci,QTL)进行鉴定和定位对作物遗传育种具有重要意义.单片段替换系(singlesegmentsubstitutionlines,SSSL)消除了遗传背景干扰,是用于QTL分析重要试验材料.本研究以6个水稻品种为供体,利用回交和微卫星标记辅助选择相结合方法,建立了以华粳籼74为遗传背景水稻单片段替换系群体,并选用其中59个单片段替换系对水稻24个重要农艺性状QTL进行了鉴定;还利用一个单片段替换系次级分离群体对抽穗期基因Hd-3-1进行了定位.主要试验结果如下:1对供体亲本苏御糯、IR64、IRAT261、成龙水晶米、Lemont和IAPAR9与华粳籼74之间微卫星标记多态性进行了检测,6个供体亲本与华粳籼74之间多态率分别为56.33%、34.93%、59.31%、33.19%、55.90%和56.55%.2对回交遗传效应进行了分析,在BC2F1和BC3F1单株中检出替换片段平均数分别为8.93个和4.37个,在BC2F1和BC3F1单株中检出替换片段平均长度分别为32.23cM和27.63cM,BC2F1和BC3F1受体亲本基因组回复率分别为81.55%和92.32%.3建立了118个以华粳籼74为遗传背景单片段替换系,其中包括86个不同单片段替换系.这些单片段替换系分布于水稻12条染色体上,10号染色体上单片段替换系最多,有16个.单片段替换系中替换片段平均长度为23.0cM,全部单片段替换系对水稻基因组覆盖率为57.11%.4利用59个单片段替换系对水稻24个重要农艺性状QTL进行了鉴定,总共鉴定出了248个QTL,分别为25个抽穗期QTL、1个有效穗数QTL、13个穗颈长QTL、16个株高QTL、5个穗长QTL、7个倒一节间长QTL、8个倒二节间长QTL、4个倒节间长QTL、7个倒四节间长QTL、12个剑叶长QTL、22个剑叶宽QTL、13个倒二叶长QTL、14个倒二叶宽QTL、4个倒叶长QTL、12个倒叶宽QTL、14个一次枝梗数QTL、2个�

  • 标签: 水稻 单片段替换系群体 QTL 数量性状位点 遗传育种 分子标记技术
  • 简介:以龙牙百合鳞片叶切块为外植体,通过多种培养基比较试验,得出MS+2,4-D2mg/L+6-BA0.2mg/L是诱导愈伤最佳培养基,MS+6-BA1mg/L+NAA0.05mg/L是不定芽诱导及伸长适宜培养基.MS+NAA2mg/L是生根最佳培养基.本试验已建立了适用于龙牙百合遗传转化快速高频再生系统.用携带有几丁质酶基因和β-1、3葡聚糖酶基因工程菌,通过农杆菌介导法和基因枪转化法转化龙牙百合,经PCR和点杂交检测证明外源基因已经整合到植物染色体中.同时对农杆菌介导法和基因枪法进行比较,发现农杆菌介导法转化率为16.7%,基因枪法转化率为50%,因此可能基因枪转化法更适于龙牙百合遗传转化.

  • 标签: 龙牙百合 植株再生 遗传转化 外植体 培养基 基因枪法
  • 简介:本研究利用SSR标记对15份葡萄种质进行了遗传多样性分析。从30对SSR引物中筛选出11对多态性引物,共扩增出107条带。每对引物可检测到等位位点数为4~22,多态率为75%~100%。根据SSR扩增结果,利用NTSYSpc2.10e软件进行Jaccard相似性系数分析,15份葡萄种质遗传相似系数在0.20~0.98,平均遗传相似系数为0.398。UPGMA聚类分析结果表明,在遗传相似系数0.29处,15份葡萄材料可分为2大类群。第一类包含7份山葡萄资源,2个山欧杂交品种,第二类包含3个欧亚种品种、2个欧美杂种品种和1个美洲杂种品种。由此可见,山葡萄与欧亚种、美洲杂种亲缘关系较远,欧亚种与美洲种之间亲缘关系较近。此外,引物Vmc9a2.1、VMC4F3、VMC4A1、Scu14vv分别在欧亚种‘无核白’、‘山葡萄雄株’(雄1-2,雄1-3)、山葡萄‘左山二’、山葡萄‘双丰’扩增出一条特性条带,这为利用SSR标记鉴定葡萄品种或品系提供了基础数据。

  • 标签: 葡萄 SSR 遗传多样性
  • 简介:综述了现代分子标记技术在番茄几个主要质量抗病性状和数量抗病性状基因定位中研究进展.质量抗病性状基因定位主要包括番茄病毒病、番茄根结线虫、番茄白粉病、番茄细菌性斑疹病、番茄斑萎病、番茄叶霉病等,数量抗病性状基因定位主要包括番茄青枯病和番茄晚疫病.

  • 标签: 番茄 基因定位 分子标记 质量抗病性状 数量抗病性状
  • 简介:利用转sck基因高代稳定水稻亲本和组合为材料,研究了外源sck基因遗传表达特性。结果表明:外源sck和hpt基因都能自交连锁稳定遗传到T11并表达,且连锁基因和表达活性可杂交转移到不育系和杂交组合中,外源sck基因在杂种F2代以单基因显性遗传3:1模式进行分离,但也出现自交hpt基因丢失,杂交hpt基因甚至sck基因未获得成功转移现象。田间抗虫性观测表明,转sck基因水稻对钻蛀性螟虫抗性不足,对卷叶螟具有一定抑制作用。外源sck基因在转化或杂交转育亲本及组合中均获得表达,且具有一定空间分布特性和基因累加效应,基本为叶片表达活性高于叶鞘。

  • 标签: 转基因水稻 sck基因 hpt基因 遗传表达
  • 简介:辣椒资源遗传多样性丰富,育种潜力大,本研究从分子水平研究不同种间辣椒种质资源遗传多样性差异,为辣椒种质资源收集、研究及合理利用提供参考。并首次利用基于辣椒全基因组编码区序列设计152对SSR辣椒基因组引物,用不同地理来源且性状差异显著11个种(亚种)24份辣椒种质资源对152对SSR引物进行筛选,从而获得条带清晰、稳定性好41对SSR多态性引物,并利用NTSYS-pc2.10e和POPGENE32软件分析24份辣椒种质资源遗传多样性数据。结果表明:41对SSR引物扩增出211个多态性条带,平均每对引物扩增出5.15个位点,说明SSR引物在辣椒遗传分析中有较高实用性。有效等位基因数(Ne)、观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、香农指数(Shannon-Weaver)(I)、多态信息含量(PIC)均值结果分别为4.0861、0.4198、0.7247、1.4232、0.6654,表明辣椒遗传信息非常丰富。UPGMA方法聚类分析及主成分分析将24份辣椒聚为7类,结果基本与辣椒种类来源相符。

  • 标签: 辣椒 SSR分子标记 遗传多样性 聚类分析
  • 简介:为建立适合于大葱花蕾总蛋白双向电泳体系,本研究以大葱花蕾为材料,对大葱花蕾总蛋白提取方法、IPG胶条梯度范围、上样量、等电聚焦等双向电泳关键步骤进行优化。结果表明最适宜大葱花蕾总蛋白双向电泳条件为:TCA-丙酮沉淀法提取大葱花蕾总蛋白,选择24cmpH4~7IPG胶条,上样量800μg,按聚焦程序Ⅰ聚焦后进行双向电泳并采用考马斯亮蓝染色。采用该体系可以获得分辨率高、重复性好双向电泳图谱。

  • 标签: 大葱 花蕾 蛋白质组 双向电泳
  • 简介:安吉白茶是一种低温敏感型茶树变异品种,其新梢发育过程具有阶段性白化现象。安吉白茶茶叶品质与其白化程度密切相关,鲜叶越白,氨基酸含量越高,加工后成茶感官品质越好,所以确保良好白化程度是安吉白茶栽培主要目标之一。因此,研究安吉白茶新梢发育过程中阶段性白化现象机理,对于安吉白茶开发利用具有重要意义。本文综述了植物白化与安吉白茶白化机理研究进展,并展望了今后研究重点。

  • 标签: 安吉白茶 白化机理 研究进展
  • 简介:MADS-box基因是一类编码转录因子基因大家族,在植物发育过程中具有重要作用。本研究采用RT-PCR技术从叶籽银杏(Ginkgobilobavar.epiphyllaMak.)中克隆了MADS-box基因GbMADS5。序列分析表明,该基因编码区全长为666bp,含有一个完整开放阅读框,编码221个氨基酸残基组成蛋白质,具有典型植物MADS-box基因结构,编码肽链包含了MADS区、I区、K区和C末端,但该基因不具有拟南芥(Arabidopsisthaliana)AG基因N端区域。GbMADS5基因编码蛋白序列与其它植物MADS-box蛋白序列有着较高一致性,与裸子植物(Gymnospermae)AG基因相似性最高,其中与苏铁(Cycasrevolute)同源性高达91.07%。系统发育树分析显示,GbMADS5基因属于AG亚家族基因。

  • 标签: 叶籽银杏 GbMADS5 MADS-BOX基因 序列分析
  • 简介:本研究建立了一套简便、行之有效水稻成熟花粉辐照诱变技术工作程序,解决了水稻成熟花粉保鲜技术难关,提出了水稻成花粉适宜诱变剂量为46Gy左右,确认了辐照花粉杂交后代以产生数量性状突变为主,第代较第二代出现更多突变性状,扩大了突变幅度,而且随着世代递增,突变性状有累加现象,大部分株系在第五代即可稳定.利用本项技术获得了一批熟期提早或推迟15天以上,株高变矮或增高10cm以上、稻谷增长5mm,米长增加4.4mm,长宽比最大达4.5,千粒重较起始种增减10-23g等特殊性状一批新种质.本研究初步认为水稻成熟花粉辐照诱变主要是诱发DNA位点突变,同时存在隐性突变,在水稻及其它作物育种中具有应用前景.

  • 标签: 水稻 成熟花粉 Γ射线 辐照诱变 杂交后代 突变效应
  • 简介:虎尾草(Chlorisvirgata)是禾本科虎尾草亚族一种一年生草本植物,适应性极强,能在恶劣盐碱化土壤上生长。本实验构建了虎尾草cDNA基因文库,随机挑选出2300个克隆,并且通过点杂交分析在NaCl胁迫下这些基因表达情况。结果表明有59个基因在NaCl胁迫下强烈表达,这些上调基因中23个同时也被NaHCO3胁迫表达。这个结果暗示了NaCl逆境与NaHCO3逆境在基因表达应答机制存在明显差异。59个基因可以分成8类:能量代谢(21.70%),信号转导(5.0%),氧化逆境(13.30%),光合作用(10.0%),生长发育(5.5%),转录因子(1.67%),各种酶类00.0%)和一些未知基因(28.3%)。从中选出了一些上调基因进行Northern杂交分析,Northern杂交表明这些基因中有些是在根或叶中表达,与点杂交结果有一致趋势。

  • 标签: 虎尾草 ESTS 基因表达 胁迫 上调
  • 简介:本研究以拟南芥DNA为模板,将罗勒烯合成酶AtTPS03基因一个目的片段克隆到T-载体上。对克隆片段测序后,进行Blast比对,结果目的片段序列与GenBank上报道序列同源性达到100%。根据RNA干扰基本原理,将目的片段正反向连到干扰载体pFGC5941查尔酮内含子两侧,经限制性酶切和PCR扩增检测,证明已成功构建了干扰载体P-2AT03。利用农杆菌介导浸花法转化拟南芥。收获种子在含草丁膦培养基上筛选抗性苗,通过对抗性苗PCR检测,已成功获得了12株转基因苗。这些转基因苗为进一步研究罗勒烯和罗勒烯合成酶功能奠定了良好基础。

  • 标签: AtTPS03基因 RNA干扰 拟南芥转化
  • 简介:通过花生籽仁不同时期转录组测序分析,从分子水平上揭示控制花生油脂合成重要基因。本研究以高油和低油花生新品系为研究对象,构建了花生籽仁早期和中后期4个转录组测序文库。通过高通量测序共获得了59236条Unigenes,其COG功能涉及了大多数生命活动,整体功能类基因最多有4730条;其中与代谢类和油脂转运相关基因有654条;Unigene参与花生代谢通路可分为126类,其中涉及生化代谢Unigene数量最多,达到了7672条,占整体32.95%;有4大类代谢与油脂相关,分别是脂肪酸生物合成,涉及基因有85条;脂肪酸生化代谢,涉及基因有145条;不饱和脂肪酸生物合成途径,涉及116条基因;亚麻酸代谢途径,涉及有138条基因。对花生籽仁两个不同发育时期差异表达基因进行分析,共得到了120多种代谢途径(passway);并且籽仁发育中后期基因表达量大部分下调,说明花生种子发育初期,各类调控脂肪酸合成基因比较活跃,而随着合成油脂调控不断继续,相关调节基因表达量下降,同时各类脂肪酸和油脂合成也渐渐变慢。研究结果为深入揭示花生籽仁发育过程中油脂合成调控相关基因及其功能提供了丰富数据资源。

  • 标签: 花生 转录组测序 油脂合成 差异表达基因
  • 简介:本研究以新颖极端粗茎水稻材料R404及细茎品种日本晴为亲本杂交构建F2分离群体(152个单株)为作图群体,对控制水稻茎秆粗、茎壁厚以及穗颈粗3个茎粗度相关性状QTL进行定位分析。通过QTLIciMapping分子标记作图软件分析,在水稻3、8、11以及12号染色体上分别检测到7个QTLs,其中茎粗和穗颈粗2个QTLqSDM8.1和qRDM8.1可能为同一基因位点调控,茎粗和茎壁厚2个QTLqSDM3.1及qSWT3.1也定位在相近位置,这2个染色体位置可能存在控制茎粗一因多效基因。qSWT3.1(15.39%)、qRDM3.1(44.66%)和qSDM8.1(19.16%)在其所控制相应性状(茎粗,茎壁厚和穗颈部粗)中贡献率是最大,是主效QTL。除了定位于3号染色体QTLs外,其他与粗茎性状相关QTLs均为新发现QTLs。本研究结果为粗茎QTL进一步精细定位奠定了基础,也为粗茎QTL应用于水稻抗倒伏品种培育及种质创新提供重要基因来源,对保障国家粮食安全具有重要意义。

  • 标签: 水稻 茎粗 穗颈粗 茎壁厚 QTL定位
  • 简介:甘氨酸甜菜碱是植物细胞内一种重要调渗物质,盐胁迫下,甘氨酸甜菜碱积累可以保护细胞内蛋白质结构和功能,降低细胞水势,从而增强植物自身耐盐能力。从大肠杆菌中克隆胆碱脱氢酶基因(betA)是甘氨酸甜菜碱合成关键酶基因,该基因编码胆碱脱氢酶(CDH)可将胆碱一步合成为甜菜碱。本实验室已将胆碱脱氢酶基因(betA)转入到小黑杨花粉植株基因组中,并最终获得了4个转基因株系。本研究以4个转betA基因株系(TB1、TB2、TB3、TB4)及非转基因对照为试材,在浓度为1.2%NaCl盐胁迫下,测定其甜菜碱含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量,并调查试材盐害情况,计算盐害指数,目的是为了研究转基因株系耐盐效果,从中筛选出耐盐能力较强转基因株系。试验结果表明,4个转基因株系甜菜碱含量均高于非转基因对照;在1.2%NaCl胁迫下TB1、TB2、TB3超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性均高于非转基因对照,TB3低于对照:TB1、TB4丙二醛含量低于对照,TB2、TB3与对照相近。进一步盐害分析表明4个转基因株系中TB1和TB4株系盐害指数低于对照42.1%和33.4%,TB2、TB3与对照无显著差异。综合各转基因株系耐盐性及生理指标测定结果,4个转基因株系中,TB1、TB2耐盐性明显优于对照,有希望用于盐碱地造林及推广。

  • 标签: 转基因小黑杨花粉植株 甜菜碱 耐盐性 抗氧化酶
  • 简介:自1902年德国科学家Haberlandt提出'植物细胞全能性'概念以来,无数中国学者对这一理论进行了大量实验,从不同方面和层次对其进行验证和探索,取得了诸多有实践和理论意义成果,丰富和充实了植物细胞全能性理论.同时,基于该理论而发展起来植物细胞离体培养技术在各方面也取得了可喜成就.本文就植物细胞全能性基础理论方面的研究以及在生产实践中应用作了比较系统总结.

  • 标签: 植物细胞全能性理论 中国 细胞培养 离体培养
  • 简介:在含有105个标记位点大白菜AFLP连锁图谱上,利用MAPQTL4.0软件采用区间作图方法对控制大白菜干烧心病数量性状基因位点进行QTL定位和遗传效应分析。利用离体叶片扦插方法进行干烧心病苗期鉴定,共检测到4个与抗干烧心病有关QTL位点,分布在4个连锁群上。cal-1和cal-2表现为增效加性效应,cal-3和cal-4表现为减效加性效应。4个QTL解释遗传变异范围在11.0%~58.9%之间,其中cal-4最大,cal-2次之,而cal-1最小。这为大白菜抗干烧心病分子标记辅助选择提供了依据。

  • 标签: 大白菜 干烧心病 QTL
  • 简介:利用RT-PCR技术从海岛棉品种新海21中克隆了1个WRKY基因,在GenBank数据库中比对发现其与陆地棉GhWRKY32序列高度同源,因此命名为GbWRKY32。该基因ORF为1077bp,编码358氨基酸,预测分子量为39.288kD,等电点为5.02。序列分析表明该基因含有一个WRKY保守结构域,锌指结构为:C-X5-C-X23-H-X1-H,属于WRKY转录因子家族Ⅱ类D组成员。GbWRKY32蛋白为疏水性蛋白,不具有跨膜区和信号肽结构。GbWRKY32转录因子不具有转录自激活活性。本研究成功构建GbWRKY32基因植物表达载体并转入根癌农杆菌EHA105菌株中,这有助于该基因功能后续研究。

  • 标签: 海岛棉 GbWRKY32 转录自激活活性 植物表达载体