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  • 简介:[目的]建立脑炎原虫感染豚鼠模型,分析白化豚鼠花色豚鼠在脑炎原虫感染动物模型建立中异同点。[方法]动物分四组:花色组、白化组、花色应用氢化可的松组、白化应用氢化可的松组,16只/组。发病兔粪便中收集纯化脑炎原虫虫体,灌胃法接种豚鼠,染虫后不同时间点粪便捡虫观察豚鼠染虫率。造模后30天心脏采血,测免疫球蛋白含量,HE染色观察豚鼠主要脏器病变,纯化后虫体行电镜超微结构观察。[结果]接种之后7天内,未用氢化可的松两组均未检出原虫,用氢化可的松两组中,白化豚鼠最先在第3天检出,于第6天全部检出,而花色豚鼠最先在第4天检出,在第7天检出11只。体液免疫测定结果表明FMMU白化豚鼠花色豚鼠感染脑炎原虫后,白化组血清IgG、IgA含量均显著低于花色组(P<0·05),IgM含量极显著低于花色组(P<0·01)。光镜观察发现主要脏器有大量炎性细胞浸润,肾脏皮质区有大量以虫体为中心,周围由淋巴细胞、浆细胞及巨噬细胞形成肉芽肿,脑水肿,脑实质可见以虫体为中心、周围由淋巴细胞、浆细胞、小神经胶质细胞及上皮细胞包围形成肉芽肿病变。胆道上皮坏死脱落。染虫花色豚鼠各器官病理学改变与白化豚鼠基本一致。纯化脑炎原虫呈长椭圆...

  • 标签: 原虫豚鼠 实验研究 感染模型
  • 简介:目的采用限制下肢活动方法,建立食蟹猴肌肉萎缩动物模型,建立模型评价方法。方法采用高分子纤维绷带固定食蟹猴右侧下肢(踝关节至膝关节)15周,期间每两周测量体重、双侧小腿腿围、下肢容积,造模11、13、15周行双侧小腿腓肠肌MRI检查,15周行肌肉组织活检。结果造模15周后,动物体重无明显变化,右小腿腿围、右大腿腿围、右下肢体积比造模前均明显下降(P〈0.05);造模15周后血清肌酐、血糖、碱性磷酸酶均出现显著下降(P〈0.05),血清胆固醇水平明显升高(P〈0.05);MRI显示右侧腓肠肌萎缩,右侧腓肠肌容积较造模前减小;肌肉组织活检显示右侧腓肠肌萎缩,肌纤维变细;腓肠肌纤维横截面积缩小。结论通过外固定限制食蟹猴下肢活动方法制作肌肉萎缩模型,造模周期适当,操作性强。综合采用腿围、下肢排水体积、生化指标、MRI成像及肌肉活检相结合评价方法,能够简单、客观评价食蟹猴肌肉萎缩模型。

  • 标签: 食蟹猴 肌肉萎缩 MRI 组织病理学 血液生化
  • 简介:目的探讨盲肠结扎穿孔法(cecalligationandpuncture,CLP)所致脓毒症大鼠模型凝血功能变化。方法采用CLP诱导SD大鼠脓毒症,术后8、1648h时检测相关凝血功能指标,采用HE染色观察肺、肾、肝、脾组织病理学变化。结果CLP诱导脓毒症大鼠12d生存率为30%,发病急且死亡率较高。在疾病发展急性期内,CLP大鼠8h时出现APTT时间延长(P<0.05),16h时出现PT时间延长(P<0.05),内源凝血途径XII活性及外源性凝血途径VII活性出现一过性抑制。TT在48h出现延长(P<0.01)。FIB含量从16h开始逐渐增多(P<0.001)。与凝血抗凝功能有关其他重要指标中PLT数量从8h逐渐下降(P<0.01);vWF:Ag量从8h逐渐增多(P<0.001);D-D量从16h逐渐升高(P<0.05);PS:Ag量直到48h出现明显下降(P<0.001);而AT-III含量无明显变化。病理检查发现肺、肾、肝、脾组织存在不同程度损伤,但未显示明显静脉血栓出血特征。结论大鼠脓毒症模型在急性期内存在凝血功能紊乱,但未观察到凝血功能引起组织病理变化。

  • 标签: 脓毒症 大鼠 凝血功能 病理
  • 简介:目的通过尾静脉注射,建立一种符合临床特征肺腺癌转移瘤动物模型,为下一步肺腺癌转移机制研究提供可靠实验造模方法。方法取对数生长期A549细胞,11只SPF级、4~6周龄BALB/c裸鼠,分别以1×106个细胞/只注射入裸鼠尾静脉。接种后每天观察小鼠状态。分别于接种肿瘤细胞后第4、5、6、7周随机处死2只,余3只小鼠处于濒死状态时处死。解剖小鼠,观察肺部有无转移、转移结节数目及全身其他器官转移情况,并做病理取材,HE染色观察。结果注射过程中小鼠均存活。未处死3只分别于第11、13、14周出现恶液质。第4周肺部未见转移结节;第5周出现镜下肺部转移结节;第6周肉眼可见肺部转移结节;第7周转移结节数增多;第11周出现纵隔淋巴结转移。第11、13、14周出现肺部结构大量破坏,弥漫性肿瘤细胞浸润,出现淋巴结浸润,病理证实为腺癌。结论通过尾静脉注射A549细胞可以成功建立人肺腺癌转移瘤模型。

  • 标签: 肺腺癌 肿瘤转移 动物模型 裸鼠
  • 简介:目的为了寻求一种新小口径血管代用品,建立异种移植动物实验模型,以观察异种移植物安全性、可靠性、通畅性及组织学改变。方法共采用17只杂种雌性犬,实验组10只,植入经环氧化物处理猪血管移植物;对照组7只,植入人造血管。手术方法为右侧股动静脉瘘。术后通过超声血管造影方法来观察移植血管通畅性,并在术后3月将移植物取出,进行病理学检查,观察移植前后移植物组织学改变。结果术后第一周、二周行Doppler超声检查结果,两组动静脉瘘均通畅,2周内血管通畅率为100%。术后3个月动脉造影检查后,生物血管组(PG)通畅5只,通畅率62.5%,e-PTFE组通畅4只,通畅率66.7%。两组数据统计学处理,差异无显著性(P〉0.05)。术后3月移植物取材,进行光镜及扫描电镜病理学检查,通畅生物血管吻合口无狭窄,吻合部位有新内膜覆盖,周围组织无钙化,有新生内皮细胞覆盖。结论经环氧化物处理血管移植物(PG)生物血管作为异种移植物,生物相容性好,具有一定可行性。

  • 标签: 异种移植 生物血管材料 小口径 病理学
  • 简介:目的建立一种高效应用TaqMan探针荧光定量PCR技术Leprdb/+小鼠子代基因分型方法。方法提取228例Leprdb/+小鼠子代鼠尾DNA,针对Lepr基因突变位点(rs1801133)设计1PCR引物2条TaqMan探针。设定条件进行实时荧光PCR扩增,用SDS软件SNP位点进行分型。通过2月龄动物肥胖表现型验证并进行Hardy-Weinberg平衡检验。结果用建立TaqMan探针荧光定量PCR方法228份样本进行检测,其中GG基因型64份,基因型频率为0.1929;GT基因型123份,基因型频率为0.5395;TT基因型41份基因型频率为0.2807。TaqMan探针荧光定量PCR方法分型结果与通过肥胖表现型分型结果比较,灵敏度为97.56%,特异度为99.47%。结论应用TaqMan探针荧光定量PCR技术可实现Leprdb/+小鼠子代基因位点早期分型检测,方法简便,高效。

  • 标签: TAQMAN探针 Leprdb/+小鼠 基因分型
  • 简介:目的鉴于目前斑马鱼视锥细胞视蛋白运输机制并不明确,且缺乏相应抗体,本实验拟构建一种可以在视锥细胞中特异表达荧光转基因斑马鱼.方法利用编码紫外敏感型视蛋白基因(sws1)启动子,构建了一种在紫外敏感型视锥细胞中特异表达红色荧光蛋白tdTomato转基因斑马鱼.同时,将tdTomato荧光蛋白与非洲爪蟾rhodopsin蛋白末端44个氨基酸相融合,将该融合蛋白定位于紫外敏感型视锥细胞外节段,进而可模拟内源性视蛋白定位.结果共筛选出三种不同品系转基因斑马鱼,经过免疫组化分析,确定其中一种转基因品系是正确目标品系.结论该转基因斑马鱼构建将会为进一步研究视锥细胞中视蛋白运输机制提供帮助.

  • 标签: 斑马鱼 视锥细胞 紫外敏感型 SWS1 转基因 sws1
  • 简介:目的克隆日本大耳白兔白毛黑眼系(白毛黑眼兔)眼部虹膜Trp1、Trp2基因,获取其完整外显子序列。进一步推测这两个基因编码蛋白,并分析其特征。方法从白毛黑眼兔黑色虹膜组织中提取RNA,并反转录成cDNA。利用来自小鼠、大鼠同源引物,扩增获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子片段。然后已知片段进行3’RACE5’RACE,从而获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子完整序列。利用相关软件获得序列进行翻译分析。结果首次获得了白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子全序列。该实验兔Trp1基因编码序列全长1604个碱基,其核苷酸序列与人相似度为87.9%,与小鼠相似度为82.7%。TRP1成熟蛋白包含513氨基酸,氨基酸序列与人相似度为89.8%,与小鼠相似度为86.6%。该实验兔Trp2基因序列全长1554个碱基,其核苷酸序列与人相似度为83.2%,与小鼠相似度为81.9%。TRP2成熟蛋白包含494个氨基酸,其序列与人一致度为84.2%,与小鼠一致度为84.4%。结论本研究获得TRP1、TRP2序列与已知家兔酪氨酸相关蛋白家族成员TYR序列进行比对,结果显示这三种蛋白之间有较高相似度,并且TRP1TRP2蛋白序列表现出了酪氨酸酶家族结构上保守性特有的结构特征。

  • 标签: 白毛黑眼兔 酪氨酸相关蛋白1 酪氨酸相关蛋白2
  • 简介:目的通过暂时阻断妊娠期大鼠子宫血供方法建立子宫缺血引起胎儿生长受限动物模型。方法根据大鼠子宫动脉是卵巢动脉一个分支解剖特点,于孕鼠妊娠第15天时施行手术暂时阻断卵巢动脉并于第21天行剖宫产术,术后称量新生胎仔体重及胎盘、脑、心、肝、肺、肾等重要脏器重量,对比各组间新生胎仔预后不同,并对照研究阻断血供10、20、30及40min胎仔不同影响。结果妊娠晚期阻断孕鼠卵巢动脉20min可成功构建胎儿生长受限模型,这种方法与阻断动脉血流30或40min相比,手术时间短,技术要求不高,胎仔死亡率与对照组差异无显著性(P〉0.05)。各实验组较对照组新生胎仔体重及胎盘、各重要脏器重量均明显降低(P〈0.05)。结论通过阻断卵巢动脉从而阻断子宫动脉血流,成功建立缺血缺氧性FGR孕鼠模型。该模型重复性好,操作简便,并可成功设立同体对照,为进行FGR相关产科理论研究提供了一个有利技术平台。

  • 标签: 胎儿生长受限 大鼠 Sprague-Dawley 模型 动物 胎盘功能试验
  • 简介:目的探讨HCMv感染是否引起大鼠家兔睾丸、卵巢组织损伤。方法将人巨细胞病毒ADl69毒株经静脉接种50只人鼠平和130只新四兰兔,30d后以原他杂交免疫组化力方法检验病毒感染动物组织证据,以组织病理学方法检查动物睾丸、卵巢组织病理变化。结果接种病毒之动物睾丸、卵巢组织内町查到痫毒抗原或基因,睾丸组织多见牛精细胞变性、坏死,精细胞减少甚至消失。结论HCMV感染可以导致动物睾丸组织生精细胞损伤牛精功能下降。

  • 标签: HCMV感染 卵巢组织 睾丸组织 损伤 经静脉 人巨细胞病毒
  • 简介:目的本实验通过小鼠卵巢组织进行冻存研究,掌握卵巢低温生物学特性,摸索出一种简便有效组织器官冻存法,为卵巢移植及器官冷冻提供有用技术方法。方法通过小鼠卵巢组织进行慢速程序法与快速液氮蒸汽法冻存,比较分析了不同方法所需保护剂种类、浓度、渗透平衡时间。采用解冻后卵巢组织超微结构观察、组织化学染色、微素测定及自体、异体移植后动情期恢复作为评价指标。结果与结论通过上述实验表明用同种冷冻保护剂,液氮蒸汽法冻存卵巢组织超微结构保存良好,组织化学染色示其活性与程序法冻存组织相同,自体、异体移植后,小鼠动情周期恢复率及血清雌二醇水平各项指标均与慢速程序法冷冻无显著性差异。

  • 标签: 小鼠 卵巢组织 超速冻存法 液氮蒸汽法 程序法
  • 简介:目的了解掌握引入西藏高原家兔生理生化指标,以便为实践教学、临床诊疗科学研究提供参数。方法采用朗道全自动生化分析引入西藏高原20年加利福尼亚兔(Californianrabbit)中国白兔(Chinesewhiterabbit)12项血清生化指标进行了测定。结果加利福尼亚兔在品种内比较发现TP、ALB、A/G、CRE、CHOL、LDH指标表现极强雄兔特征(P〈0.01),而ALT、GLU测定值雌兔明显高于雄兔(P〈0.05);中国白兔在品种内比较发现CRE、LDH指标显示差异有显著性(P〈0.01),CRE指标是雄兔高于雌兔,LDH参数是雌兔高于雄兔。加利福尼亚雄兔与中国白雄兔参数比较中发现AST、TP、ALB、GLO、A/G、GLU、CRE、LDH指标显示差异有显著性(P〈0.01),而TG、BUN指标显示差异有显著性(P〈0.05);加尼福利亚母兔与中国白母兔参数比较中发现ALT、GLO、CRE、TG指标显示差异有显著性(P〈0.05),AST、TP、BUN、LDH指标显示差异有显著性(P〈0.01)。结论实验结果将为西藏高原教学、临床诊疗科学研究提供生理数据参考。

  • 标签: 加利福尼亚兔 中国白兔 生化指标
  • 简介:目的为建立SHIV艾滋病动物模型提供毒力较强病毒株,将新合成SHIV-XJ02170病毒适应猴体,并增强其毒力.方法实验前采集猴血清并进行血清学检查PCR检测.选出13只无SIV,STLV-1,SRV/DB病毒感染猴.第一批实验,将SHIV前病毒DNA质粒经肌肉注射到猴体内,每只500μg;SHIV病毒液,经静脉注射到猴体内,每只2ml.病毒质粒病毒液各接种2只猴.当第一批猴体检出病毒后,10ml感染猴全血,抗凝后静脉注射到第二批猴体内,当第二批猴检出病毒后再将10ml感染猴全血静脉注射到第三批猴体内,连续传代4次.每批实验均定期采集血液标本,分别用肝素EDTA抗凝,进行病毒分离;病毒基因PCR检测;CD4,CD8测定;病毒抗体检测.结果SHIV-XJ02170病毒SHIV-XJ02170前病毒DNA质粒在猴体内传代中均能分离出病毒;从传代猴血浆外周血单核细胞(PBMC)中检出了病毒DNARNA基因;CD4,CD8测定结果显示有暂时性倒置现象,后变为正常倒置与正常交替出现;在传代猴血清中检测出特异性HIV病毒抗体.结论SHIV-XJ02170病毒与SHIV-XJ02170前病毒DNA质粒,均能在恒河猴体内复制.

  • 标签: 体内 复制 病毒DNA 外周血单核细胞 PCR检测 静脉注射
  • 简介:目的:通过显微外科技术建立小鼠原位肺移植模型,为肺移植研究提供动物模型。方法采用C57BL/6小鼠作为供、受体,行同基因小鼠原位左肺移植,使用Cuff套管法进行气管及血管吻合。术后7、14、21、28d取移植肺及原肺,行HE染色,评价肺移植后效果。结果学习曲线后,共30例小鼠移植,手术成功率89%,小鼠成活率100%。供体手术时间:(35.2±9.81)min,受体手术时间:(24.6±7.42)min,冷缺血时间是:(46.6±8.92)min,热缺血时间是:(17.2±3.08)min。同基因移植物大体及病理无明显改变,病理显示与原肺无差别。结论本技术能够方便快捷建立小鼠肺移植模型,成功率高,可重复性强,符合原位肺移植临床生理,是研究肺移植发病机制治疗良好动物模型。

  • 标签: 原位肺移植 动物模型 小鼠
  • 简介:参照人T细胞分离方法用于猪T细胞分离,经二次绵羊红细胞分离T细胞,用PHA从功能上鉴定获得纯度很高T细胞,能进一步用于有关T细胞方面研究。

  • 标签: T细胞 绵羊红细胞 分离方法 鉴定 PHA 研究
  • 简介:采用人工感染法,严重联音免疫缺陷小鼠(scid小鼠)进行夜现周期性斑氏丝虫实验感染研究。结果表明,斑氏丝虫经人工感染后能在Scid小鼠体内发育成熟并产生微丝蚴,且虫体回收率较高为6-30%,平均14.8%:感染10只小鼠均在外周血中检获出微丝蚴,及解剖收集到成虫,感染成功率高达100%。作者认为Seid小鼠由于T、B淋巴细胞功能缺如,不能产生相应抗丝虫感染抗体,是一种感染成功、潜伏期短、微丝蚴密度及成虫回收率高较理想实验动物。

  • 标签: SCID小鼠 微丝蚴 丝虫感染 鼠模型 体内发育 免疫缺陷小鼠
  • 简介:目的建立高脂饮食诱导果蝇心衰模型。方法选择野生型果蝇w1118果蝇作为实验对象,采用含不同浓度椰油(0%,7.5%,15%,30%)食物喂食果蝇5d,检测果蝇体内三酰甘油含量。后续实验以非高脂喂食组(0%椰油)作为对照,30%椰油高脂喂食组作为实验组。负向趋地性实验检测果蝇运动能力。果蝇成体心脏功能分析平台,拍摄果蝇在半解剖条件下心脏跳动情况(30s),软件分析获得成体心脏功能指标,包括心跳周期,收缩舒张直径,心脏收缩力指数等。实时定量PCR检测高脂喂食果蝇心脏RNA表达变化。结果与非高脂喂食果蝇相比,不同比例高脂喂食果蝇三酰甘油含量随椰油浓度呈剂量递增(P<0.05);高脂饮食显著影响果蝇活动力(P<0.001);高脂喂食果蝇心跳周期缩短(P<0.01),心脏收缩力减弱(P<0.001);实时定量PCR发现高脂喂食果蝇中,参与脂代谢相关一些基因fa2h,CG6277,CG3699,CG9914,lip2表达明显下调(P<0.05)。结论高脂饮食严重影响果蝇运动能力成体心脏功能,成功建立了高脂饮食诱导果蝇心衰模型。

  • 标签: 果蝇 心衰 高脂饮食 代谢 三酰甘油
  • 简介:复制结核分枝杆菌(MTB)感染动物模型是进行结核病研究基础。本文分别对小鼠、豚鼠、兔非人灵长类结核(TB)模型特点及其应用进行综述,由于潜伏性感染是结核病重要特征,因此慢性持续性感染模型是TB动物模型研究重点。Animalmodelisessentialfortuberculosis(TB)research.Thereportedanimalmodelsincludingmice,guineapig,rabbitsandnonhumanprimatemodelwerereviewedinthiscuurentpaper.MTBcanpersistwithinthehumanhostforyearswith-outcausingdisease,inasyndromeknownaslatentTB,soMTBchronicpersistenceinfectionanimalmodel(Cornellmodel)shouldbepayattentionto.结核分枝杆菌感染动物模型@师长宏$第四军医大学实验动物中心@...

  • 标签: 分枝杆菌感染 感染动物模型 结核分枝杆菌
  • 简介:目的研究链脲菌素(STZ)处理新生期大鼠后诱发成年发病糖尿病量效关系及其胸腺淋巴细胞增殖活性变化.方法STZ分别以20、40、60及100mg/kg,ip,给予Wistar新生期大鼠,于注射STZ后第3天、第7天、第17天、第42天观察体重、血糖、血浆胰岛素及胸腺淋巴细胞增殖反应动态变化.结果100mg/kg剂量组可于第42天形成慢性糖尿病模型,血糖值(16.8±4.6)mmol/Lvs(5.8±1.6)mmol/L,P<0.001;血浆胰岛素水平(5.2±1.2)mIU/Lvs(8.4±1.6)mIU/L,P<0.01),胸腺淋巴细胞增殖呈现升高、受抑制再恢复变化过程.其他各剂量组,特别是40mg/kg虽无明显高血糖形成,但可使胸腺淋巴细胞增殖活性增强.结论STZ(100mg/kg,ip)处理新生期大鼠诱发糖尿病最适剂量为100mg/kg,诱发时间为42d.诱发过程中伴有胸腺增殖活性变化.

  • 标签: 链脲菌素 大鼠 糖尿病 实验性 胸腺 淋巴细胞增多