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  • 简介:目的:克隆并表达caspase-8/10相关RING结构域蛋白1(CARP1)基因,检测其泛素连接酶活性。方法:提取结肠癌HCT116细胞总RNA,RT-PCR扩增CARP1基因,将其克隆到真核表达载体pcDNA3-Flag中,序列正确阳性克隆进行扩增,提取质粒转染至293T细胞中进行瞬时表达,通过体内泛素化检测其泛素化酶活性,通过萤光素酶报告基因方法检测其NF-kB转录活性影响,利用细胞生长曲线检测CARP1基因结肠癌细胞生长影响。结果:免疫印迹实验表明CARP1基因在293T细胞中获得有效表达;免疫共沉淀实验表明,当CARP1存在时,受体相互作用蛋白1(RIP1)被泛素化;萤光素酶实验结果表明CARP1抑制肿瘤坏死因子a(TNFa)引起NF-kB报道基因激活;通过生长曲线发现CARP1能促进结肠癌细胞系HCT116生长,并能部分抵抗顺铂抑制细胞生长作用。结论:构建的人CARP1基因真核表达载体在293T细胞中获得表达,表达产物具有RIP1泛素连接酶活性,可抑制TNFa引起NF-kB报告基因激活,并且促进结肠癌细胞生长,为进基因功能研究奠定了基础。

  • 标签: CASPASE 8 10相关RING结构域蛋白1 真核表达 泛素连接酶 细胞生长
  • 简介:本文以'蒸馏'教学为例,阐述传统板书与多媒体相结合在化工原理中教学过程中应用。采用多媒体和板书相结合教学方法,使二者优势互补,以达到学生兴趣、提高教学效果目的。

  • 标签: 多媒体和板书相结合 无机化学 分子轨道 教学效果
  • 简介:目的:建立种灵敏、特异、快速ELISA方法,用于猕猴血清中抗死亡受体5(DR5)单克隆抗体检测。方法:采用双抗夹心ELlSA法,用猴血清吸附羊抗入IgG包被于96孔酶标板,加入待测样品,用HRP标记猴血清吸附羊抗人IgG进行检测,加底物显色,读取D450值。结果:建立了检测抗DR5单克隆抗体ELISA方法并进行了确证,方法线性范围为12.5-800ng/mL,定量下限为12.5ng/mL,板内和板间精密度均小于15%,准确度为-4-15%,冻融稳定性和稀释稳定性良好。结论:方法学确证结果表明,本研究建立抗DR5单克隆抗体检测方法符合新生物制品临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于抗DR5单克隆抗体检测。

  • 标签: 死亡受体5 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验法 药代动力学
  • 简介:柳树是东北平原地区重要造林绿化树种,其被广泛应用于营造用材林、防护林及风景林。朝白B80柳是以朝鲜柳为母本、新疆白柳为父本经人工杂交育种方法选育出柳树新品种,该品种具有速生、耐寒、耐干旱、耐水湿、抗烂皮病特性,其10年生平均树高、胸径、材积生长量分别为12.37m、25.94cm、0.3495m3,分别为对照品种垂爆109柳1.4、2.3、6.61倍,该品种是适宜在东北寒冷、干旱地区大力推广乔木柳新品种。

  • 标签: 柳树新品种 朝白B80柳 耐寒速生
  • 简介:随着科技发展,社会更加需要创新型素质人才。医学微生物学是高等医学院医学体系部分,具有较高综合性和实际操作性。因此,高等学校和教师不仅需要重点培养学生科学理论知识,还要培养学生实践操作能力,使学生具有学习积极性,全面提高医学微生物学实验课程质量。本文分析了如何提升医学微生物学实验课程教学质量。

  • 标签: 医学微生物学 实验课程 学生 教学质量
  • 简介:职业生涯规划教育首要功能就是让学生初步掌握职业类型、气质类型、人职匹配理论基础上,进行心理测试、引导学生了解自己性格、兴趣、能力、气质等个性特征,并客观分析环境,自我做正确定位。学生自己了解越多,其自我塑造愿望就越强烈、计划也就越具体,学习动力就越强,有利于培养学生良好学习心理。

  • 标签: 职业生涯规划 学习心理 相关性
  • 简介:目的:建立大鼠缇解复发型实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)模型,进行病理学研究,为多发性硬化(MS)研究提供依据。方法:呆用大鼠脊髓和弗氏完全佐剂混合乳剂次性注入SD大鼠双足垫和尾部,1周后半剂量注射进行次加强.诱导大鼠发生EAE;观察发病情况,HE染色观察病理变化,监牢兰染色观察脱髓鞘情况j结果:空白对照大鼠均未出现症状,HE染色小脑及脊髓无炎性细胞浸润,监牢兰染色未见髓鞘脱失;模型临床症状发生率为90%以上,HE染色可见小脑白质及脊髓血管周围有大量炎性细胞浸润,监牢兰染色发现有大片髓鞘脱落。结论:用SD大鼠脊髓髓鞘蛋白和弗氏完全佐利混合乳剂可诱导同种SD大鼠发生缓解复发型EAE。

  • 标签: 实验性变态反应性脑脊髓炎 多发性硬化 动物模型
  • 简介:微生物学是制药专业核心课程,为了适应我国职业教育改革发展与培养人才要求,本文着重分析了传统教学方法弊端,微生物学试验教学改革进行了探索。教师应该主要通过合理设置微生物学实验课程,合理教学实训做出安排,并且要采用科学教学模式、教学方法和考核制度,加强学生对于微生物学课程理论认识,培养学生在相关领域能熟练应用微生物进行生产实践能力,使教学达到良好效果。

  • 标签: 微生物学 试验 教学改革 探索 实践
  • 简介:目的:构建能介导结缔组织生长因子(CTGF)基因RNA干扰复制缺陷型腺病毒表达载体。方法:以大鼠CTGF基因为靶序列,设计并合成含编码短发夹RNA序列寡核苷酸,构建腺病毒穿梭质粒P-shuttle-CTGF,酶切及测序分析正确后,与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转染AD-293细胞,进行病毒包装,得到腺病毒载体Ad.H1-CTGF,用该载体感染HSC-T6细胞,观察其CTGF基因表达抑制效果。结果:构建腺病毒穿梭质粒p-shuttle-CTGF经酶切、测序分析证实正确;包装病毒载体滴度为4×1010PFU/mL,感染HSC-T6细胞后,Western印迹证实CTGF表达显著减少。结论:构建腺病毒载体Ad.H1-CTGF可有效抑制HSC-T6中CTGF表达,为抗纤维化研究提供了有力工具。

  • 标签: 结缔组织生长因子 RNA干扰 腺病毒载体
  • 简介:目的:观察分析瑞芬太尼应用于腹腔镜下全子宫切除术麻醉临床效果。方法:选取该类患者224例,基于随机分组原则将其分作均等观察和对照,观察患者接受"瑞芬太尼+丙泊酚"麻醉,对照患者接受"芬太尼+丙泊酚"麻醉,比较实际麻醉效果。结果:在麻醉效果等方面,观察均优于对照,且差异明显具有统计学意义,P<0.05。结论:在腹腔镜下全子宫切除术中,瑞芬太尼具有较为理想麻醉效果,不仅有助于患者尽快尽好恢复,同时还具有不良反应相对较少优点。

  • 标签: 瑞芬太尼 腹腔镜下全子宫切除术 麻醉效果 观察分析
  • 简介:目的:探讨错配修复基因1(hMLH1)、错配修复基因2(hMSH2)启动子区甲基化与子宫内膜异位症关系。方法:采用甲基化特异性PCR方法检测23例子宫内膜异位症组织和20例正常子宫内膜中hMLH1、hMSH2基因启动子区甲基化状态。结果:hMLH1基因在子宫内膜异位症中甲基化率为39%(9/23),在正常子宫内膜组织中甲基化率为5%(1/20),者比较,差异有统计学意义P0.05);hMSH2基因在子宫内膜异位症中甲基化率为8%(2/23),在正常子宫内膜组织中甲基化率为5%(1/20),者比较,无明显差异P0.05)。结论:hMLH1基因启动子区甲基化可能与子宫内膜异位症发病有关;hMSH2基因启动子区甲基化与子宫内膜异位症之间不存在显著联系。

  • 标签: 子宫内膜异位症 错配修复基因1 错配修复基因2 甲基化
  • 简介:目的:构建GFE-1多吠与重组人肿瘤坏死因子d(rmhTNF仅)融合蛋白(GFE-1-rmhTNF),研究该融合蛋白体外活性和体内分布。方法:利用基因工程方法,将人工合成编码GFE—l寡核苷酸片段连接在rmhTNF—d序列3’端,转入大肠杆菌中诱导表达,采用Q—SepharoseFF阴离子层析柱和SP—SepharoseFF阳离子层析柱纯化蛋白,SDS—PAGE和Western印迹鉴定,测定该融合蛋白体外活性,观察其在小鼠体内分布情况。结果:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF,并在大肠杆菌中获得高效表达。体外活性实验显示,GFE-1-rⅢhTNFL929细胞有明显杀伤活性;体内分布实验证实,GFE-I-rmhTNF在小鼠肺组织富集远高于肝肾组织。结论:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF.,可显著杀伤L929细胞并特异性富集于小鼠肺组织。

  • 标签: 人肿瘤坏死因子 GFE-1多肽 融合蛋白 体外活性 体内分布
  • 简介:目的:采用巢式PCR甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体轻链和重链基因进行扩增,获得基因进行序列分析,并找出克隆鼠Igκ轻链和重链可变区基因通用方法。方法:设计22扩增鼠Igκ轻链可变区和重链可变区基因引物,6株鼠抗人甲型H1N1流感病毒血凝素单克隆抗体轻链和重链可变区基因进行克隆并测序,与NCBI公布鼠免疫球蛋白序列比对分析。结果:巢式PCR方法可以有效避免单克隆抗体克隆过程假基因,并且得到单克隆抗体氨基酸序列均符合鼠免疫球蛋白可变区特征。结论:建立了克隆鼠免疫球蛋白轻链和重链可变区基因通用方法,为后期克隆鼠源性单克隆抗体可变区基因提供了基础,并为研究甲型H1N1流感病毒血凝素与抗体结合位点提供了实验数据。

  • 标签: 甲型H1N1流感病毒 单克隆抗体 可变区 巢式PCR 序列分析